植石全，張恒通，韋武奇，李曉陽(yáng)

（廣東綠楊農(nóng)業(yè)股份有限公司，廣東 茂名525243）

蛋雞出欄后，雞舍會(huì)留存大量的病原微生物，通過(guò)清洗可以減少一部分，但仍會(huì)有殘留，殘留的病原微生物對(duì)下一批雛雞生長(zhǎng)具有很大的健康隱患，進(jìn)而對(duì)產(chǎn)蛋期的生產(chǎn)性能造成影響[1]。因此，為了控制雛雞的早期感染風(fēng)險(xiǎn)，必須建立完整的生物安全體系。其中，雞舍的空舍消毒是生物體系建立的重要部分。由于雞舍消毒的不徹底，導(dǎo)致雞舍殘留大量微生物，使得剛?cè)肷岵痪玫牡半r雞感染，無(wú)法建立完整的免疫系統(tǒng)，蛋雞育雛的死淘率會(huì)明顯增加[2]。因此，如何正確選擇和使用消毒劑顯得格外重要。盲目和不規(guī)范地使用消毒劑，不僅不能有效殺滅雞舍內(nèi)的微生物，且會(huì)造成消毒劑的殘留和浪費(fèi)，而選擇合適的消毒劑能夠有效控制蛋雞舍傳染病的發(fā)生[3]。市場(chǎng)上有種類繁多的消毒劑，其效果也各有不同，選擇一種適合空舍消毒的消毒劑是規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)亟待解決的問(wèn)題。因此，本研究選擇三種養(yǎng)殖場(chǎng)常用的消毒劑，分別為衛(wèi)可、安滅殺和消特靈，在廣東綠楊農(nóng)業(yè)股份有限公司進(jìn)行消毒效果試驗(yàn)，通過(guò)檢測(cè)消毒前后雞舍內(nèi)空氣和設(shè)備表面的微生物情況，了解不同消毒劑對(duì)雞舍的消毒效果，以期為規(guī)?；唐返半u場(chǎng)育雛空舍消毒提供參考。

1 材 料

1.1 雞場(chǎng)情況

試驗(yàn)于2020年冬季在廣東綠楊農(nóng)業(yè)股份有限公司進(jìn)行。每棟雞舍的長(zhǎng)為100 m、寬15 m、高4.1 m（頂棚為6 m），雛雞飼養(yǎng)期為1~91日齡，舍內(nèi)設(shè)備配套齊全，每棟育雛舍的養(yǎng)殖規(guī)模達(dá)到10萬(wàn)羽左右，采用十列五層六走道層疊式的籠養(yǎng)模式，選擇3棟作為試驗(yàn)用雞舍。

1.2 主要試劑與儀器

衛(wèi)可，主要成分為過(guò)硫酸氫鉀復(fù)合物及氯化鈉，有效氯含量不少于10%，購(gòu)自英國(guó)安德國(guó)際有限公司；安滅殺，主要成分為戊二醛及苯扎氯銨，購(gòu)自英國(guó)考文垂化學(xué)藥品有限公司；消特靈，主要成分為二氯異氰尿酸鈉，有效氯含量為20%，購(gòu)自廣州益牲寶動(dòng)物藥業(yè)有限公司；LB瓊脂培養(yǎng)基，購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；菌落計(jì)數(shù)器（型號(hào)為XK-97A），購(gòu)自上海力辰邦西儀器科技有限公司；生化培養(yǎng)箱（型號(hào)為L(zhǎng)RH-150），購(gòu)自上海一恒科學(xué)儀器有限公司。

1.3 采樣時(shí)間

育雛舍的上一批蛋雛雞轉(zhuǎn)入蛋雞舍后，對(duì)整個(gè)雞舍進(jìn)行人工沖洗。人工沖洗育雛舍后，對(duì)雞舍進(jìn)行采樣，所采的樣品（空氣、料槽壁、雞籠底、刮糞刀）為消毒前樣品數(shù)據(jù)；然后用不同消毒劑進(jìn)行消毒，育雛舍消毒48 h后對(duì)雞舍所采的樣品為消毒后樣品數(shù)據(jù)。

2 方 法

2.1 消毒模式

共選3棟育雛舍，1號(hào)育雛舍采用衛(wèi)可消毒，2號(hào)育雛舍采用安滅殺消毒，3號(hào)育雛舍采用消特靈消毒。各育雛舍的消毒模式見表1。

表1 各雞舍消毒劑用法及用量

2.2 空氣中微生物的檢測(cè)

采用自然沉降法，根據(jù)五點(diǎn)梅花式在每棟雞舍4個(gè)角落和中央各選1個(gè)點(diǎn)均勻分布，每個(gè)點(diǎn)3個(gè)平行樣，采樣高度為0.8 m，采樣點(diǎn)需避開風(fēng)口，四個(gè)角落的采樣點(diǎn)離墻壁大約0.8 m，在各個(gè)采樣點(diǎn)放置LB瓊脂培養(yǎng)基，開蓋，蓋口置于平皿邊緣，暴露10 min，蓋上平皿并標(biāo)記包好，放置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。在培養(yǎng)基暴露期間注意減少人員走動(dòng)，關(guān)閉門窗，避免污染培養(yǎng)基。使用菌落計(jì)數(shù)器對(duì)培養(yǎng)皿上的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算各個(gè)采樣點(diǎn)的平均菌落數(shù)，以每個(gè)培養(yǎng)皿上菌落數(shù)進(jìn)行結(jié)果報(bào)告。

根據(jù)奧氏公式計(jì)算菌落總數(shù)：C=50 000×N/（A×T）

式中：C為每立方米菌落總數(shù)（cfu·m-3），N為培養(yǎng)皿菌落數(shù)（cfu），A為培養(yǎng)皿面積（cm2），T為采樣時(shí)間（min）[4]。

殺菌率（%）=（消毒前菌落數(shù)-消毒后菌落數(shù)）/消毒前菌落數(shù)×100%

2.3 物體表面微生物的檢測(cè)

采用3.5 cm×5 cm滅菌規(guī)板，放置在被檢的物體表面上（料槽壁、雞籠底、刮糞刀），用蘸有生理鹽水的滅菌棉拭子在被檢位置來(lái)回摩擦，采樣時(shí)間為15 s，折斷棉拭子，將其頭部放進(jìn)含有5 mL生理鹽水的離心管中，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。在雞舍前中后的料槽壁及雞籠底各采1個(gè)樣，在雞舍后端的刮糞刀位置采1個(gè)樣。

將離心管的待測(cè)樣品充分搖勻，在無(wú)菌超凈工作臺(tái)內(nèi)用生理鹽水進(jìn)行10-1~10-3倍稀釋，每個(gè)稀釋梯度用移液槍吸取1 mL置于培養(yǎng)皿中，每個(gè)梯度3個(gè)平行樣，再倒入40~50℃的LB瓊脂培養(yǎng)基中，搖勻冷卻后將其放置在37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)36 h。每個(gè)樣品的每個(gè)梯度都要在培養(yǎng)皿上做好相應(yīng)的標(biāo)記。使用菌落計(jì)數(shù)器對(duì)培養(yǎng)皿上的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算各個(gè)采樣點(diǎn)的平均菌落數(shù)。

物體表面菌落總數(shù)（cfu·cm-2）=培養(yǎng)皿菌落數(shù)×5×稀釋倍數(shù)/采樣面積（cm2）

殺菌率（%）=（消毒前菌落數(shù)-消毒后菌落數(shù)）/消毒前菌落數(shù)×100%

3 結(jié)果與分析

3.1 不同消毒劑對(duì)育雛舍空氣中微生物的消殺效果

采用五點(diǎn)梅花式對(duì)每棟雞舍四個(gè)角落和中央進(jìn)行微生物檢測(cè)，計(jì)算殺菌率，結(jié)果見表2。

表2 不同消毒劑對(duì)育雛舍空氣中微生物的消殺效果

由表2可知，衛(wèi)可對(duì)1號(hào)育雛舍空氣的最高殺菌率為46.77%，最低殺菌率為37.54%，平均殺菌率為41.82%；安滅殺對(duì)2號(hào)育雛舍空氣的最高殺菌率為96.46%，最低殺菌率為88.22%，平均殺菌率為92.24%；消特靈對(duì)3號(hào)育雛舍空氣的最高殺菌率為100.00%，最低殺菌率為86.12%，平均殺菌率為93.68%。衛(wèi)可、安滅殺、消特靈消毒對(duì)1、2、3號(hào)育雛舍空氣平均殺菌率結(jié)果分別為41.82%、92.24%和93.68%，衛(wèi)可對(duì)安滅殺、消特靈消毒效果的t檢驗(yàn)差異都顯著（P<0.05)，安滅殺和消特靈消毒效果的t檢驗(yàn)差異不顯著（P>0.05)。從空氣殺菌率總體來(lái)看，衛(wèi)可消毒效果是最差的，安滅殺和消特靈的消毒效果較好，兩者差異不明顯。

3.2 不同消毒劑對(duì)育雛舍設(shè)備上微生物的消殺效果

對(duì)每棟雞舍設(shè)備上微生物進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算殺菌率，結(jié)果見表3。

由表3可知，衛(wèi)可對(duì)1號(hào)育雛舍設(shè)備的最高殺菌率為22.41%，最低殺菌率為11.32%；安滅殺對(duì)2號(hào)育雛舍設(shè)備的最高殺菌率為100.00%，最低殺菌率為99.78%；消特靈對(duì)3號(hào)育雛舍設(shè)備的最高殺菌率為99.99%，最低殺菌率為99.70%。用衛(wèi)可、安滅殺、消特靈消毒后，1、2、3號(hào)育雛舍設(shè)備上平均總菌結(jié)果分別為5 382、2、2 cfu·cm-2。消毒后，1號(hào)育雛舍所有監(jiān)測(cè)位置仍有大量的微生物，2號(hào)育雛舍所有監(jiān)測(cè)位置的微生物量在4 cfu·cm-2以下，3號(hào)育雛舍所有監(jiān)測(cè)位置的微生物量在3 cfu·cm-2以下。衛(wèi)可、安滅殺、消特靈對(duì)1、2、3號(hào)育雛舍設(shè)備平均殺菌率結(jié)果分別為16.27%、99.97%和99.98%，衛(wèi)可對(duì)安滅殺、消特靈消毒效果的t檢驗(yàn)差異都顯著（P<0.05），安滅殺和消特靈消毒效果的t檢驗(yàn)差異不顯著（P>0.05）。從設(shè)備消毒效果總體來(lái)看，衛(wèi)可是消毒效果最差的，安滅殺和消特靈消毒效果較好，且兩者差異不明顯。

表3 不同消毒劑對(duì)育雛舍設(shè)備上微生物的消毒效果

4 討論

養(yǎng)殖場(chǎng)舍內(nèi)微生物的數(shù)量是評(píng)價(jià)養(yǎng)殖環(huán)境質(zhì)量的重要指標(biāo)，直接關(guān)系到入舍雛雞的健康及后期蛋雞生產(chǎn)性能的充分發(fā)揮[4]。韓文格[5]也有相應(yīng)的報(bào)道，入舍雛雞所處的環(huán)境質(zhì)量決定了后期雞群的健康狀態(tài)，空舍消毒有利于切斷上下批次雞群疫病的傳播。李玉清等[6]研究表明，消毒劑對(duì)雞舍空氣殺菌率達(dá)到了90%以上，說(shuō)明了這種消毒劑對(duì)雞舍空舍消毒是有效的。本試驗(yàn)結(jié)果表明，安滅殺及消特靈都可以明顯降低規(guī)?；r空舍空氣中的微生物數(shù)量，平均滅菌率分別達(dá)到了92.24%和93.68%，而衛(wèi)可消毒的平均殺菌率只有41.82%，由此來(lái)看，安滅殺及消特靈消毒均能夠?qū)σ?guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)蛋雞舍空氣中的微生物進(jìn)行有效的消毒。

從三種消毒劑對(duì)設(shè)備的消毒效果來(lái)看，衛(wèi)可對(duì)料槽壁、籠底、刮糞刀等表面微生物的殺菌率效果較差，殺菌率最高的位置只有22.41%，消毒后殘留著大量的微生物，平均殘留的總細(xì)菌為5 382 cfu·cm-2；而安滅殺及消特靈對(duì)料槽壁、籠底、刮糞刀等表面微生物有很強(qiáng)的殺菌率，所有位置殺菌率均達(dá)到了99%以上，兩種消毒劑消毒后，舍內(nèi)的微生物數(shù)量都大幅度地下降了，平均殘留的總細(xì)菌數(shù)均為2 cfu·cm-2。說(shuō)明不同消毒劑對(duì)于雞舍設(shè)備表面的消毒效果是有很大的差異，安滅殺及消特靈消毒均能夠?qū)σ?guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)雞舍設(shè)備有理想的殺菌效果，而衛(wèi)可消毒則不太理想。陳紹叔[7]用四種消毒劑帶雞消毒的效果表明，安滅殺具有最強(qiáng)的殺菌效果，而衛(wèi)可的殺菌效果是最差的。甘永新等[8]的研究表明，二氯異氰尿酸鈉具有很強(qiáng)的殺菌性能，可以大幅度地殺死各種微生物，在生產(chǎn)實(shí)踐中具有較強(qiáng)的應(yīng)用性。梁娜等[9]對(duì)二氯異氰尿酸鈉也有類似的研究結(jié)果。衛(wèi)可殺菌效果較弱的原因可能是：衛(wèi)可的主要活性物質(zhì)是過(guò)硫酸氫鉀復(fù)合物，而過(guò)硫酸氫根具有很強(qiáng)的氧化能力，可以在水溶液中不斷產(chǎn)生羥基自由基等，進(jìn)而改變細(xì)胞膜的通透性達(dá)到殺菌的效果[10]，而噴灑雞舍不利于過(guò)硫酸氫鉀復(fù)合物釋放羥基自由基等，反而它可能適用于水線消毒。畜禽空舍消毒是建立防疫的第一道防線，是畜禽建立完整的免疫系統(tǒng)的重要措施，有效的消毒能夠殺滅病原微生物，為剛?cè)肷岬男笄萏峁┮粋€(gè)良好的生活環(huán)境[4]。為了避免細(xì)菌出現(xiàn)耐藥性問(wèn)題，空舍消毒的消毒劑最好交替使用。

5 結(jié) 論

安滅殺及消特靈的消毒效果優(yōu)于衛(wèi)可，而安滅殺和消特靈消毒效果無(wú)明顯性差異，在實(shí)際生產(chǎn)中，安滅殺及消特靈可以在蛋雞空舍消毒中交替使用，避免產(chǎn)生耐藥性的病菌。試驗(yàn)結(jié)果表明安滅殺消毒和消特靈消毒都適用于規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)商品蛋雞育雛空舍的消毒。