亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        瑪咖-人參水煎液對小鼠免疫功能的影響

        2021-07-20 04:22:16陳紅映孫建輝于澤玥
        世界中醫(yī)藥 2021年7期
        關鍵詞:水煎液懸液人參

        陳紅映 孫建輝 于澤玥

        摘要 目的:探討瑪咖-人參水煎液對小鼠免疫功能的影響。方法:通過碳廓清試驗、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗、綿羊紅細胞誘導的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應試驗、ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉化試驗(MTT法)、Jerne改良玻片法測定抗體生成細胞數(shù)試驗、小鼠血清溶血素的測定,研究瑪咖-人參水煎液對小鼠免疫功能的影響。結果:與空白組比較,瑪咖-人參水煎液低、中、高劑量組均可明顯提高小鼠吞噬指數(shù)(P<0.05或P<0.01),瑪咖-人參水煎液低、中、高劑量組均可明顯提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率(P<0.05或P<0.01)和吞噬指數(shù)(P<0.01),瑪咖-人參水煎液中、高劑量組可明顯提高小鼠足趾腫脹度(P<0.05),瑪咖-人參水煎液高劑量組可明顯提高小鼠溶血空斑數(shù)(P<0.01)。結論:瑪咖-人參水煎液能提高小鼠單核-巨噬細胞功能、細胞免疫功能和體液免疫功能。

        關鍵詞 瑪咖;人參;配伍;水煎液;免疫;單核-巨噬細胞;細胞免疫;體液免疫

        Abstract Objective:To investigate the effects of Maka Renshend Decoction on immune function of mice.Methods:Antibody production was measured by carbon clearance test,mouse peritoneal macrophage phagocytic chicken red blood cell test,sheep red blood cell-induced delayed-type allergy test in mice,ConA-induced mouse lymphocyte transformation test (MTT method),and Jerne modified slide method Cell number test,determination of mouse serum hemolysin,and the effect of Maka Renshen Decoction on the immune function.Results:Compared with the blank control group, the low, middle and high dose Maka Renshen Decoction groups could significantly increase the phagocytic index of mice (P<0.05 or P<0.01). The low, medium and high dose groups of Maka Renshen Decoction can significantly increase the phagocytosis rate of mouse macrophages and chicken red blood cells (P<0.05 or P<0.01) and phagocytic index (P<0.01). The medium and high-dose groups of Maka Renshen Decoction can significantly increase the swelling of the toes of mice (P<0.05), and the high-dose group of Maka Renshen Decoction can obviously increase the number of hemolytic plaques in mice (P<0.01).Conclusion:Maka Renshen Decoction can improve the function of monocyte-macrophage,cellular immunity and humoral immunity in mice.

        Keywords Lepidium meyenii Walp; Radix Ginseng; Compatibility; Decoction; Immunity; Monocyte-macrophage; Cellular immune; Humoral immunity

        中圖分類號:R285.5;R392.5文獻標識碼:Adoi:10.3969/j.issn.1673-7202.2021.07.005

        瑪咖(Lepidium meyenii Walper,Maca),又稱為“秘魯人參”[1],屬于十字花科獨行菜屬一年生或兩年生植物[2],是南美洲安第斯山地區(qū)常用的藥食兩用植物之一。瑪咖的營養(yǎng)成分和次生代謝產(chǎn)物較為豐富,具有提高免疫力、改善性功能、調節(jié)性激素、抗疲勞、抗氧化、抗腫瘤、抗骨質疏松、降血糖及神經(jīng)保護等功效[3-4]。近些年來,瑪咖產(chǎn)品風靡全球市場,成為暢銷的保健食品之一。我國有利用瑪咖進行開發(fā)利用的食品,如瑪咖飲品和瑪咖酒,也有與其他藥材配伍而成的保健品,如瑪咖枸杞膠囊、瑪咖黃芪西洋參片等[5-7]。研究表明,瑪咖性平微溫,味甘、辛,歸腎、肝、脾經(jīng),具有補腎益精,強筋壯骨,疏肝解郁的功效[8]。藥理研究表明,瑪咖可增強小鼠體液免疫功能和單核-巨噬細胞功能[9],增加免疫器官重量[10],對大鼠機體免疫功能具有雙向調節(jié)作用[11],增加能量代謝[12]。人參味甘、微苦,性微溫,入脾、肺、心、腎經(jīng),有大補元氣,復脈固脫,補脾益肺,生津養(yǎng)血,安神益智等功效[13]。賈執(zhí)瑛等[14]研究表明,人參的有效成分(人參總皂苷、二醇皂苷、三醇皂苷和人參多糖)對增強免疫力有不同程度的功效,其中人參二醇皂苷和人參多糖增強免疫力作用較為明顯。

        “正氣存內,邪不可干。”提高人體免疫力,可增強機體的抗病能力,提高人體正氣多以補脾健胃、補腎為主[15]?,斂Ш腿藚⒎謩e在2011、2012年被批準為我國的新資源食品[16-17]。二者配伍,可協(xié)同增效,補腎益精、補脾益肺,本研究從細胞免疫、體液免疫和單核-巨噬細胞功能角度探討瑪咖、人參配伍后對機體免疫功能的影響。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 動物 KM種小鼠,SPF級,雌性,體質量16~20 g,由北京華阜康生物科技股份有限公司提供,動物許可證號SYXK(京)2017-0038,飼養(yǎng)于屏障環(huán)境。

        1.1.2 藥物 瑪咖12 g、人參3 g,藥材粉碎成粗粉,加8倍量水,煎煮2次,1 h/次,過濾,濾液合并,濃縮,得棕色液體,冷藏保存。

        1.1.3 試劑與儀器 1)試劑:印度墨汁(國藥集團化學試劑有限公司,批號:180320);Na2CO3,(分析純,國藥集團化學試劑有限公司,批號:20180323);姬姆氏色素(生物染色劑,國藥集團化學試劑有限公司,批號:20151214);甲醇(分析純,北京化工廠,批號:20171031);Hb稀釋液(南京建成生物工程研究所,批號:20180905);刀豆蛋白A(ConA,Sigma公司,美國,批號:006K8411);RPMI1640(Gibco公司,美國,批號:1830908);MTT(Amresco公司,美國,批號:2174c194);異丙醇(分析純,北京化工廠,批號:20180524)。2)儀器:紫外可見分光光度計[島津企業(yè)管理(中國)有限公司,型號:UV2600];電子天平(常熟市雙杰測試儀器廠,型號:T1000);電子天平(賽多利斯,型號:BS223S);Thermo CO2培養(yǎng)箱(美國熱電公司,美國,型號:371型);LEICA生物顯微鏡(上海萊卡顯微系統(tǒng)有限公司,型號:13395H2X);游標卡尺(桂林山牌Ⅲ型游標卡尺,型號:游標卡尺);離心機(上海安亭科學儀器廠,型號:TDL-5-A);電熱恒溫水浴鍋(北京市長風儀器儀表公司,型號:SHH.W21.600C);酶標儀(美國伯騰儀器有限公司,美國,型號:Elx808)。

        1.2 方法

        1.2.1 給藥方法 人體推薦日用量為15 g,小鼠實驗分別設人體推薦量的5倍、10倍、30倍,小鼠給藥劑量1.25、2.50、7.50 g/kg體質量,設為低、中、高劑量。

        1.2.2 小鼠碳廓清實驗

        選取KM種雌性小鼠48只,按體質量隨機分為空白對照組和瑪咖-人參水煎液高、中、低劑量組,每組12只。各受試組給予相應劑量瑪咖-人參水煎液,空白對照組給予等體積蒸餾水(10 mL/kg)灌胃,1次/d,連續(xù)42 d。指標檢測:按照體質量從小鼠尾靜脈注射稀釋后的印度墨汁(0.05 mL/10 g體質量)。注入墨汁后的2 min、10 min,分別從小鼠內眥靜脈叢取血20 μL,并將血液置于2.0 mL 0.1% Na2CO3溶液中。用UV2600紫外分光光度計在600 nm波長處測光密度值(OD),以0.1% Na2CO3溶液作為空白對照。將小鼠處死,取肝臟和脾臟稱重。按公式計算吞噬指數(shù)(α),表示小鼠碳廓清的能力。式中OD1、OD2分別為2 min、10 min時采血所得血液的光密度值,t1、t2為注射印度墨汁后的取血時間。K=(lgOD1-lgOD2)/(t2-t1);a=體質量/(肝重+脾重)×K1/3。

        1.2.3 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗(半體內法)

        分組、給藥同“1.2.2”項。指標檢測:小鼠經(jīng)腹腔注射20%雞紅細胞懸液1 mL,30 min后,處死小鼠,腹腔注射生理鹽水2 mL,按揉小鼠腹部20次。取小鼠腹腔巨噬細胞洗液1 mL,分別滴在2片載玻片上,置37 ℃溫育30 min。生理鹽水漂洗,晾干,用1∶1丙酮甲醇溶液固定,以吉姆沙-磷酸緩沖液染色,并用蒸餾水漂洗,晾干。在油鏡條件下計數(shù),每片計數(shù)100個巨噬細胞,按以下公式計算吞噬率和吞噬指數(shù),得出的吞噬百分率按以下公式進行數(shù)據(jù)轉換,X=sin-1P,P代表吞噬百分率,用小數(shù)表示。吞噬百分率(%)=吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)/計數(shù)的巨噬細胞數(shù)×100%;吞噬指數(shù)=被吞噬的雞紅細胞總數(shù)/計數(shù)的巨噬細胞數(shù)。

        1.2.4 遲發(fā)型變態(tài)反應(DTH)實驗(足跖增厚法) ?分組、給藥同“1.2.2”項。指標檢測:取羊血,生理鹽水洗滌3次,小鼠腹腔注射0.2 mL 2% SRBC懸液,致敏后4 d,測量小鼠左后足跖部的厚度。在測量部位經(jīng)皮下注射20 μL 20% SRBC懸液,在注射后24 h測量小鼠的左后足跖部厚度。以上2次測量均在同一部位,且測量3次,取其平均值。以前后足跖厚度的差值來表示遲發(fā)型變態(tài)反應的程度。

        1.2.5 ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉化實驗(MTT法)

        分組、給藥同“1.2.2”項。指標檢測:在無菌條件下,取小鼠脾臟,置于盛有無菌Hank′s液的平皿中,制成單個細胞懸液。篩網(wǎng)過濾制成脾細胞懸液。Hank′s液洗并離心,重復2次。將脾細胞懸浮于1 mL的培養(yǎng)液中,鏡檢計數(shù),然后將細胞濃度調整為3×106個/mL。將脾細胞懸液分兩孔加入培養(yǎng)板中,每孔1.0 mL,一孔加入75 μL ConA液,另一孔作為對照,置CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結束4 h前,每孔吸去上清0.7 mL,并加入相同體積的RPMI1640培養(yǎng)液,同時加入MTT 50 μL/孔,繼續(xù)培養(yǎng)4 h。每孔分別加入1 mL酸性異丙醇,溶解紫色結晶。然后用紫外分光光度計在570 nm波長處測定。用加ConA孔的光密度值減去不加ConA孔的光密度值差值來表示淋巴細胞的增殖能力。

        1.2.6 抗體生成細胞數(shù)的測定(Jerne改良玻片法)

        分組、給藥同“1.2.2”項。指標檢測:取羊血,用生理鹽水洗3次,小鼠腹腔注射0.2 mL 2% SRBC懸液。將SRBC免疫5 d后的小鼠處死,取脾臟,將脾臟磨碎,制成細胞懸液。離心后,分別用Hank′s液洗2遍,將細胞懸浮在8.0 mL Hank′s液中。瓊脂糖溶解后,與等量雙倍Hank′s液混合,用小試管分裝,每管加入0.5 mL,并向管內加入50 μL 10% SRBC懸液和8 μL脾細胞懸液,迅速混勻,倒于具有瓊脂糖薄層的玻片上,待瓊脂凝固后,放入CO2培養(yǎng)箱中溫育1 h,在玻片架凹槽內加入用SA緩沖液稀釋8倍的補體,繼續(xù)溫育1.5 h,然后計數(shù)溶血空斑數(shù)。用空斑數(shù)/全脾細胞來表示抗體生成細胞數(shù)。

        1.2.7 半數(shù)溶血值(HC50)的測定

        分組、給藥同“1.2.2”項。指標檢測:取羊血,用生理鹽水洗3次,每只小鼠腹腔注射0.2 mL 2%SRBC懸液。5 d后,摘眼球取血,放置約1 h,離心,收集血清。取1.0 mL稀釋300倍的血清置試管內,分別加入0.5 mL 10%SRBC懸液,1.0 mL稀釋8倍的補體。另設對照管,以SA緩沖液代替血清。37 ℃水浴15 min后,冰浴終止反應。10 min,取l.0 mL上清,加3.0 mL Hb稀釋液。取0.25 mL 10%的SRBC懸液,加Hb稀釋液至4.0 mL于另一試管中,混勻,放置10 min后,在540 mm波長處測定各管光密度值。以半數(shù)溶血值(HC50)表示溶血素的量,按以下公式計算:樣品半數(shù)溶血值=樣品光密度值/SRBC半數(shù)溶血時的光密度值×稀釋倍數(shù)。

        1.3 統(tǒng)計學方法

        采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。采用方差分析,先進行方差齊性檢驗,方差齊,再計算F值,若F值

        2 結果

        2.1 瑪咖-人參水煎液對小鼠吞噬指數(shù)的影響 與空白對照組比較,瑪咖-人參水煎液各劑量組均可明顯提高小鼠吞噬指數(shù),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。見表1。

        2.2 瑪咖-人參水煎液對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率和吞噬指數(shù)的影響

        與空白對照組比較,瑪咖-人參水煎液各劑量組均可明顯提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率和吞噬指數(shù),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。見表2、3。

        2.3 瑪咖-人參水煎液對小鼠足跖腫脹度的影響

        與空白對照組比較,瑪咖-人參水煎液中、高劑量可明顯提高小鼠足跖腫脹度,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表4。

        2.4 瑪咖-人參水煎液對ConA誘導的小鼠淋巴細胞增殖的影響

        與空白對照組比較,瑪咖-人參水煎液各劑量組對小鼠淋巴細胞增殖的影響均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表5。

        2.5 瑪咖-人參水煎液對小鼠溶血空斑數(shù)的影響

        與空白對照組比較,瑪咖-人參水煎液高劑量組可明顯提高小鼠溶血空斑數(shù),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表6。

        2.6 瑪咖-人參水煎液對小鼠血清溶血素的影響

        與空白對照組比較,瑪咖-人參水煎液各劑量組對小鼠半數(shù)溶血值的影響均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表7。

        3 討論

        免疫力低下,即中醫(yī)所講的“虛證”。中醫(yī)通過扶正、祛邪治療“虛證”。扶正,是指調動機體抗病能力,增強免疫功能,從而提高機體的穩(wěn)定性。祛邪,是指調節(jié)機體免疫平衡和抑制免疫反應,以增強機體的抗病能力[18]。正氣通過識別“自己”和“非己”成分,清除病原微生物、突變細胞、衰老細胞等,以保障機體內環(huán)境的穩(wěn)定[19]。在現(xiàn)代醫(yī)學中,機體免疫分為特異性免疫和非特異性免疫。特異性免疫又分為細胞免疫和體液免疫。綿羊紅細胞誘導小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應試驗、ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉化實驗可用于評價細胞免疫功能,抗體生成細胞檢測、血清溶血素試驗可用于評價體液免疫功能。小鼠碳廓清實驗和小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗可用于評價單核-巨噬細胞功能(非特異性免疫)[20]。

        本實驗研究表明,經(jīng)口給予小鼠瑪咖-人參水煎液42 d后,與空白對照組比較,瑪咖-人參水煎液低、中、高劑量均可明顯提高小鼠的碳廓清能力(P<0.05或P<0.01),瑪咖-人參水煎液低、中、高劑量均可明顯提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率和吞噬指數(shù)(P<0.05或P<0.01);瑪咖-人參水煎液中、高劑量均可明顯提高小鼠足跖腫脹度(P<0.05);瑪咖-人參水煎液高劑量可明顯提高小鼠抗體生成細胞數(shù)(P<0.01)。以上結果表明,瑪咖-人參水煎液能提高小鼠單核-巨噬細胞功能、細胞免疫功能和體液免疫功能,為瑪咖和人參配伍使用提供了實驗依據(jù)。

        參考文獻

        [1]肖偉,彭勇,許利嘉,等.秘魯特產(chǎn)藥用植物瑪卡研究的新進展[J].世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2007,9(3):102-106.

        [2]肖培根,劉勇,肖偉.瑪卡——全球矚目的保健食品[J].中國食品衛(wèi)生雜志,2006,18(4):396.

        [3]朱龍波,詹志來,郝慶秀,等.瑪咖化學成分與生物活性研究進展[J].中國中藥雜志,2019,44(19):4142-4151.

        [4]許敏,王兆杰,楊少杰,等.瑪咖的化學成分和生物活性研究進展[J].食品研究與開發(fā),2017,38(1):193-199.

        [5]趙江麗,李榮喬,溫春秀,等.苦瓜瑪咖復合飲品的研制及其質量標準研究[J].食品研究與開發(fā),2017,38(11):77-81.

        [6]劉春艷,韓曉明,趙德義.瑪卡大棗保健酒的研發(fā)[J].釀酒科技,2016,37(10):85-87.

        [7]李穎,李鵬英,周修騰,等.瑪咖研究及應用進展[J].中國中藥雜志,2018,43(23):4599-4607.

        [8]王子晨.外來新資源阿薩伊、瑪咖中藥寒熱藥性探析及實驗研究[D].北京:北京中醫(yī)藥大學,2018.

        [9]佟長青,翟興月,杜影,等.瑪咖粉對小鼠免疫功能的影響研究[J].食品安全質量檢測學報,2015,6(10):4188-4192.

        [10]俞發(fā)榮,張詩爽,張振南,等.瑪咖提取物對小鼠毒性及免疫器官的影響[J].中國實驗動物學報,2016,24(3):279-282.

        [11]樂娜,周雪,費文婷,等.瑪咖對虛寒及虛熱證大鼠環(huán)核苷酸水平及神經(jīng)-內分泌-免疫網(wǎng)絡的影響[J].中國中藥雜志,2020,45(5):1004-1010.

        [12]費文婷,侯燕,王玉杰,等.瑪咖對免疫抑制-脾虛證小鼠能量代謝及免疫調節(jié)機制研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,2018,33(5):1874-1880.

        [13]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].2020版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2020:8.

        [14]賈執(zhí)瑛,謝燮,王曉艷,等.人參主要成分對大鼠免疫功能的比較研究[J].中國中藥雜志,2014,39(17):3363-3366.

        [15]宋晶,劉愛東,郭家娟,等.基于igg因子探討中藥對機體免疫的影響[J].吉林中醫(yī)藥,2020,40(5):655-658.

        [16]關于批準瑪咖粉作為新資源食品的公告[J].中國食品衛(wèi)生雜志,2011,23(4):288.

        [17]衛(wèi)生部批準人參為新資源食品[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2012,38(8):131.

        [18]劉維慶,陳書保,沙濤.中醫(yī)學與免疫學關系探析[J].遼寧中醫(yī)雜志,2005,32(12):1257-1258.

        [19]魏惠芳,張露芬.從整體觀念談中醫(yī)“正氣”的特點[J].北京中醫(yī)藥大學學報,2009,32(7):440-442.

        [20]姜艷,朱春冬,周丹英,等.人參麥冬含片增強免疫力功能的實驗研究[J].健康研究,2019,39(1):62-64.

        (2021-03-05收稿 責任編輯:徐穎)

        猜你喜歡
        水煎液懸液人參
        水中人參話鰍魚
        清爽可口的“水中人參”
        海峽姐妹(2019年8期)2019-09-03 01:01:04
        磺胺嘧啶銀混懸液在二度燒傷創(chuàng)面治療中的應用
        玉屏風散水煎液HPLC指紋圖譜的建立及9種成分測定
        中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:43
        3種補骨脂炮制品水煎液中4種成分含量的比較
        中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:41
        薯蕷皂苷元納米混懸液的制備
        中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:28
        胡蘿卜為什么被稱為“小人參”
        吃人參不如睡五更
        華人時刊(2016年13期)2016-04-05 05:50:15
        霧化吸入布地奈德混懸液治療COPD急性加重期的效果觀察
        炙甘草水煎液的HPLC-MS分析
        中成藥(2014年10期)2014-02-28 22:29:25
        蜜桃av区一区二区三| 亚洲国产成人久久一区www| 国产精品久久国产精品99gif| 久久久久麻豆v国产精华液好用吗| 中文字幕一区二区三区在线不卡| 青青青视频手机在线观看| 国产精品视频自拍在线| 国产精品美女久久久久久| 91高清国产经典在线观看 | 午夜精品一区二区久久做老熟女| 91偷拍与自偷拍亚洲精品86| 国产69精品久久久久777| 麻豆精品久久久久久久99蜜桃| 无国产精品白浆免费视| av资源吧首页在线观看| 国产av自拍视频在线观看| 亚洲性爱视频| 国产在线白丝DVD精品| 亚洲精品中文字幕二区| 国产一区二区三区精品毛片 | 久久精品国产夜色| 国产亚洲一区二区三区三州| 国产av精品麻豆网址| 激情航班h版在线观看| 亚州精品无码久久aV字幕| 久久久一本精品久久久一本| 国产精品综合一区久久| 国产av无码专区亚洲av蜜芽| 久草视频国产| 国产自产在线视频一区| 亚洲国产成人精品无码区在线播放| 欧美人与动人物姣配xxxx| 亚洲精品国产综合久久一线| 国产精品自产拍在线18禁| 一进一出一爽又粗又大| 欧美真人性做爰一二区| 日韩在线精品在线观看| 亚洲最大视频一区二区三区| 国产夫妻自拍视频在线播放 | 国产成人亚洲综合无码| 一本大道久久精品一本大道久久|