李元鳳，王亞超，范明東，敖 翔，申小云*，何 健*

（1.西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，四川綿陽(yáng) 621000；2.四川鐵騎力士集團(tuán)馮光德實(shí)驗(yàn)室，四川綿陽(yáng) 621000）

雞蛋是人們的日用食品，但由于膽固醇含量高，消費(fèi)者對(duì)蛋及蛋制品消費(fèi)產(chǎn)生了一定心里障礙[1]。辣木和諾麗果富含多種活性成分，可以提高機(jī)體抗氧化能力、降低膽固醇。辣木廣泛種植于熱帶和亞熱帶國(guó)家和地區(qū)，風(fēng)干辣木葉中富含粗蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、多糖以及鈣、磷等多種營(yíng)養(yǎng)成分，還含有較高的總黃酮[2]。諾麗果化學(xué)成分主要包括蒽醌類、黃酮類、糖苷類等物質(zhì)，具有抗菌、抗氧化、抗炎等功能[4]。辣諾提取物從辣木和諾麗果中提取，主要含有總黃酮（0.92%）、總皂苷（0.87%）和植物多糖（1.84%）等成分[3]，具有抗菌、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫等功能[4-6]。研究表明，產(chǎn)蛋高峰期蛋雞飼糧中添加辣諾提取物可以一定程度地改善料蛋比和蛋殼強(qiáng)度，還可以顯著降低蛋黃膽固醇，改善蛋黃顏色[3]，但對(duì)蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、哈氏單位等無(wú)影響[3]。辣諾提取物在蛋雞[3]、奶牛[7]和豬[8-9]上已取得了良好的應(yīng)用效果，但有關(guān)產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞添加辣木和諾麗果的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在研究產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加辣諾提取物對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、血清抗氧化及生化指標(biāo)的影響，為產(chǎn)蛋后期蛋雞健康養(yǎng)殖和蛋品質(zhì)提升提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 辣諾提取物（商品名：辣諾素，四川偉康生物科技有限公司）由25% 的辣木葉水提物、15%的諾麗果水提物和60% 的麥芽糊精組成[3]，其有效成分為總黃酮0.92%，總皂苷0.87%和植物多糖1.84%[3]。羅曼粉蛋雞由圣迪樂(lè)村梓潼養(yǎng)殖基地提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取產(chǎn)蛋率相近、健康的60 周齡羅曼粉蛋雞300 只，隨機(jī)分為2 個(gè)組，每組10 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15 只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，辣諾提取物組在基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg 辣諾提取物。預(yù)試期2 周，正試期8 周。飼糧組成和營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 動(dòng)物試驗(yàn)于2020 年3 月—5 月在四川鐵騎力士集團(tuán)馮光德實(shí)驗(yàn)室花荄試驗(yàn)基地開(kāi)展。試驗(yàn)蛋雞飼養(yǎng)于2 層階梯式籠養(yǎng)設(shè)施中，1 個(gè)籠位飼養(yǎng)3 只蛋雞。自由采食和飲水，采用自然光照，不足16 h 時(shí)用人工光照補(bǔ)充。自然通風(fēng)結(jié)合縱向負(fù)壓通風(fēng)，雞舍日常飼養(yǎng)管理（如環(huán)控、消毒、飼喂、清糞以及免疫程序等）參照馮光德實(shí)驗(yàn)室花荄試驗(yàn)基地規(guī)定執(zhí)行。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 試驗(yàn)期間每天以重復(fù)為單位收集雞蛋，稱重，統(tǒng)計(jì)產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、破蛋和異常蛋（畸形蛋、重量低于45 g 的小蛋等），計(jì)算產(chǎn)蛋量和平均蛋重。每周統(tǒng)計(jì)每個(gè)重復(fù)的采食量，計(jì)算平均日采食量，統(tǒng)計(jì)產(chǎn)蛋率和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì)和貨架期 試驗(yàn)第14、28、42、56 天，每個(gè)處理隨機(jī)收集雞蛋15 枚，測(cè)定蛋白高度、哈氏單位、蛋形指數(shù)、蛋黃顏色、蛋殼強(qiáng)度以及蛋殼厚度等，取其平均值。蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色采用多功能蛋品質(zhì)分析儀（EMT-7300ΙΙ，日本TOUHOKU RHYTHM 公司）測(cè)定。蛋的縱徑、橫徑采用電子數(shù)顯卡尺（0.01 mm，桂林廣陸數(shù)字測(cè)控股份有限公司）測(cè)定，計(jì)算蛋形指數(shù)。蛋殼鈍端、中部和銳端的厚度采用電子游標(biāo)卡尺分別測(cè)量，取其平均值。蛋殼強(qiáng)度采用蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀（RHDQ200 型，廣州潤(rùn)湖儀器有限公司）測(cè)定。在正試期第28 天，每個(gè)處理隨機(jī)抽取15 枚雞蛋常溫儲(chǔ)藏7 d 后進(jìn)行蛋品質(zhì)測(cè)定。

1.4.3 血清抗氧化和生化指標(biāo) 試驗(yàn)第28 和56 天早上，產(chǎn)蛋雞禁食12 h 后，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取1 只體重相近的蛋雞，翅靜脈采血，3 600 r/min 離心10 min，用移液槍吸取上層血清，存于無(wú)菌的1.5 mL EP 管中，-80℃凍存。采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測(cè)定血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）以及總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）含量。血清樣品送到成都揚(yáng)克斯生物有限公司進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定方法按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用Excel 2010 初步處理原始數(shù)據(jù)，用SPSS 17.0 進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析差異顯著性。結(jié)果以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P＜0.05 表示差異顯著，0.05＜P＜0.10 表示有趨勢(shì)。

2 結(jié)果

2.1 辣諾提取物對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 從表2 可見(jiàn)，辣諾提取物組蛋雞試驗(yàn)全期的平均日采食量高于對(duì)照組（P＜0.05），平均蛋重比對(duì)照組高1.59 g（絕對(duì)值，P=0.070）。

2.2 辣諾提取物對(duì)雞蛋蛋品質(zhì)和貨架期的影響 從表3可見(jiàn)，與對(duì)照組相比，辣諾提取物組第2 周和第4 周蛋白高度分別比對(duì)照組高9.70%（P=0.074）和8.27%（P=0.052），第6 周和第8 周蛋白高度分別比對(duì)照組高11.93%和12.12%（P＜0.05）。試驗(yàn)第4 周的雞蛋儲(chǔ)藏1 周后蛋品質(zhì)下降較快，蛋白高度下降3 個(gè)百分點(diǎn)以上，哈氏單位下降25 個(gè)百分點(diǎn)以上，但2 個(gè)處理間差異不顯著。

表3 辣諾提取物對(duì)雞蛋蛋品質(zhì)和貨架期的影響

2.3 辣諾提取物對(duì)蛋雞血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表4可見(jiàn)，辣諾提取物組第4 周血清MDA 含量比對(duì)照組低17.17%（P=0.082）。試驗(yàn)第8 周，2 個(gè)處理組GSH-Px、T-AOC、SOD 和MDA 差異均不顯著。

表4 辣諾提取物對(duì)蛋雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 辣諾提取物對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響 由表5 可見(jiàn)，辣諾提取物組第4 周血清TG 和LDL 分別比對(duì)照組低28.00% 和32.18%（P＜0.05）。試驗(yàn)第8 周，2 個(gè)處理組TC、TG、LDL 和HDL 差異均不顯著。

表5 辣諾提取物對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響 mmol/L

3 討論

3.1 辣諾提取物對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 辣諾提取物主要活性成分是總黃酮、總皂苷和植物多糖。楊玉等[10]研究表明，在蛋雞飼糧中添加苜草素（主要成分為黃酮、皂苷和多糖）顯著提高了產(chǎn)蛋率，降低了料蛋比。陳志敏等[3]選用540 只22 周齡海蘭褐蛋雞，發(fā)現(xiàn)在飼糧中分別添加500、750 mg/kg 辣諾提取物有改善料蛋比的趨勢(shì)。Mansoub[11]研究發(fā)現(xiàn)，在36 周齡海蘭褐蛋雞飼糧中添加200 mg/kg 苜草素時(shí)產(chǎn)蛋率和產(chǎn)蛋量最高，而添加150 mg/kg 苜草素時(shí)料蛋比最低。謝泰華[12]分別在產(chǎn)蛋前期和產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加500 和1 000 mg/kg苜草素，發(fā)現(xiàn)蛋雞產(chǎn)蛋率有顯著提高，料蛋比則降低，但平均蛋重和日采食量不受影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加辣諾提取物不影響蛋雞的產(chǎn)蛋率和料蛋比，但平均日采食量顯著提高，與Kakengi 等[13]的研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)全期蛋雞產(chǎn)蛋率均在90%以上，遠(yuǎn)高于相同日齡蛋雞產(chǎn)蛋率水平[10]，可能是蛋雞繁殖性能受到辣諾提取物中黃酮的直接調(diào)控，從而延緩了高齡蛋雞的產(chǎn)蛋率下降。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究有較大出入，可能與蛋雞品種、飼糧營(yíng)養(yǎng)水平以及調(diào)控營(yíng)養(yǎng)成分的利用率[14]等有關(guān)。

3.2 辣諾提取物對(duì)雞蛋蛋品質(zhì)和貨架期的影響 蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度、蛋白高度和哈氏單位等是衡量蛋品質(zhì)好壞主要常用指標(biāo)[10]。哈氏單位可直接反映雞蛋的新鮮程度與蛋白品質(zhì)[15]。研究發(fā)現(xiàn)，苜草素可以一定程度增強(qiáng)蛋殼強(qiáng)度[10]，辣諾提取物不影響高峰期蛋雞蛋殼強(qiáng)度和蛋殼厚度[3]。侯永剛[16]研究發(fā)現(xiàn)，在400 日齡海蘭褐蛋雞飼糧中添加60 mg/kg 苜蓿皂苷，蛋黃和全蛋膽固醇含量降低，蛋殼厚度顯著提高。本試驗(yàn)研究表明，在60 周齡的蛋雞飼糧中添加500 mg/kg辣諾提取物，雖然哈氏單位無(wú)顯著變化，但試驗(yàn)第2 周雞蛋蛋白高度有所提高，第6 周達(dá)到顯著水平，說(shuō)明辣諾提取物中的活性物質(zhì)增強(qiáng)了雞蛋蛋白質(zhì)代謝，從而使雞蛋中蛋白質(zhì)的沉積提高[17]。但儲(chǔ)藏7 d 后蛋品質(zhì)（蛋白高度和哈氏單位）下降很快，說(shuō)明辣諾提取物雖然能改善鮮蛋蛋品質(zhì)，但不能延長(zhǎng)雞蛋貨架期。

3.3 辣諾提取物對(duì)蛋雞血清抗氧化和生化指標(biāo)的影響產(chǎn)蛋后期蛋雞機(jī)體氧化衰老速度加快，但持續(xù)產(chǎn)蛋蛋雞代謝依舊旺盛，導(dǎo)致大量活性氧自由基產(chǎn)生。積累的自由基會(huì)引起脂質(zhì)過(guò)氧化，從而細(xì)胞功能受到損傷[18]。動(dòng)物健康極容易影響機(jī)體抗氧化能力，而GSH-Px、T-SOD、T-AOC 和MDA 是體內(nèi)反映機(jī)體抗氧化能力的主要指標(biāo)[10]。研究表明，辣諾提取物中的活性物質(zhì)可以調(diào)節(jié)免疫、增強(qiáng)抗氧化能力[4-6]。在蛋雞飼糧中添加1 000 mg/kg 苜草素，血漿GSH-Px、T-SOD 和T-AOC活性顯著提高，血漿MDA 含量降低[10]。本研究結(jié)果表明，產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加500 mg/kg 辣諾提取物對(duì)血清GSH-Px、T-AOC、SOD 均無(wú)顯著影響；血清第4 周MDA 含量有一定程度降低，TG 含量顯著降低，表明辣諾提取物可能通過(guò)調(diào)控血清脂質(zhì)代謝相關(guān)因子提高了蛋雞的脂質(zhì)代謝能力，從而減少了其在體內(nèi)的沉積，改善了動(dòng)物健康。LDL 是一種脂蛋白顆粒，在體內(nèi)運(yùn)載膽固醇進(jìn)入外周組織細(xì)胞后被氧化成氧化低密度脂蛋白。過(guò)量的氧化低密度脂蛋白攜帶的膽固醇積存在動(dòng)脈壁上，長(zhǎng)期積累后容易引起動(dòng)脈硬化。本研究發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加500 mg/kg 辣諾提取物顯著降低了第4 周蛋雞血清的LDL，減少了血脂沉積，提高了蛋雞的健康水平；但試驗(yàn)第8 周血清TG 和LDL差異均不顯著，說(shuō)明辣諾提取物調(diào)控產(chǎn)蛋后期蛋雞脂質(zhì)代謝可能具有短期效應(yīng)，還需進(jìn)一步深入研究。

黃酮是一種很強(qiáng)的抗氧化劑，可以有效清除體內(nèi)的氧自由基，改善血液循環(huán)，降低膽固醇。皂苷具有抗腫瘤、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性。多糖具有免疫抑制作用，它能減少細(xì)胞毒性、機(jī)體抗感染能力下降、對(duì)骨髓造血細(xì)胞的繁殖抑制等副作用，還可以通過(guò)抑制病毒對(duì)細(xì)胞的吸附從而起到抗病毒作用，也能降低血糖。雖然黃酮、皂苷和多糖都具有獨(dú)特的生理功能，但因其來(lái)源及提取工藝差異，導(dǎo)致不同產(chǎn)品有效成分差異大，而且缺乏從辣諾提取物中單獨(dú)提純的研究報(bào)道，推測(cè)本研究效果是由辣諾提取物中總黃酮、總皂苷和多糖協(xié)同作用的結(jié)果，但還需進(jìn)一步驗(yàn)證。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)表明，在產(chǎn)蛋高峰后期蛋雞飼糧中添加辣諾提取物不影響蛋雞生產(chǎn)性能，但可以提高4 周內(nèi)雞蛋部分蛋品質(zhì)，改善蛋雞健康狀況。