楊文軍 牟春堂 劉笑梅 崔 喬 白齊昌 郝小燕 張建新

(山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，太谷030801)

近年來(lái)，隨著育肥羊產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，為追求生產(chǎn)效率的提高，養(yǎng)殖方式由散養(yǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)榧s化飼養(yǎng)，育肥羊的生存空間變的單調(diào)、狹窄。此外，為了追求生長(zhǎng)性能的提高，飼糧中的精料比例偏高，導(dǎo)致瘤胃pH下降，瘤胃中酶活性下降，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝降低，增加了亞急性瘤胃酸中毒發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。因此，研究如何在高精料、集約化飼養(yǎng)模式下，改善反芻動(dòng)物瘤胃發(fā)酵、提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝具有重要意義。

葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins，GSPs)是具有活性功能的一類(lèi)多酚化合物的總稱(chēng)，在葡萄枝葉、果皮、果肉以及葡萄籽中都有存在。解玲娜等[1]研究表明，飼糧中添加葡萄籽原花青素可提高斷奶仔豬腸道胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性，有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。郭長(zhǎng)征[2]研究表明，高精料飼糧中添加多羥基黃酮類(lèi)化合物(槲皮素)可以提高山羊瘤胃pH，緩解高精料導(dǎo)致的瘤胃異常發(fā)酵。已有研究發(fā)現(xiàn)，縮合單寧的介入可使瘤胃內(nèi)琥珀酸弧菌屬(特異性將琥珀酸鹽發(fā)酵成丙酸)的相對(duì)豐度增加100%，且能使作用于碳水化合物的普雷沃氏菌屬的相對(duì)豐度降低5.4%。也有研究表明，飼糧中添加縮合單寧會(huì)增加綿羊十二指腸中總氮和非氨態(tài)氮的流量[3-4]。

目前，關(guān)于葡萄籽原花青素對(duì)反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝方面的內(nèi)容較少。因此，本試驗(yàn)以杜泊×小尾寒羊雜一代公羔為研究對(duì)象，旨在研究葡萄籽原花青素對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝的影響，以期為開(kāi)發(fā)羔羊功能性飼料提供理論基礎(chǔ)，為育肥羊健康、高效生產(chǎn)提供新思路。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

葡萄籽原花青素購(gòu)自南京某生物科技有限公司，為粉狀制劑，其主要成分為原花青素(96.400%)、兒茶素(0.533%)、表兒茶素(0.239%)、兒茶素沒(méi)食子酸酯(0.225%)和表兒茶素沒(méi)食子酸酯(0.171%)。

試驗(yàn)于2019年6月在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家肉羊體系飼料資源崗位試驗(yàn)基地展開(kāi)，于2019年8月結(jié)束。選取48只4月齡、體重[(22.75±1.20) kg]相近的杜泊×小尾寒羊雜交一代公羔，采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分為4組，每組12只羊，單欄飼養(yǎng)。各組飼喂精粗比為70∶30的基礎(chǔ)飼糧的同時(shí)分別補(bǔ)飼0(對(duì)照組)、10(10GSPs組)、20(20GSPs組)、40 mg/kg BW(40GSPs組)的葡萄籽原花青素，添加劑量參考牟春堂等[5]的體外發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果。試驗(yàn)全期60 d，其中預(yù)試期15 d，正試期45 d。試驗(yàn)飼糧參照NRC(2007)羔羊營(yíng)養(yǎng)需要中體重20 kg、日增重300 g/d的營(yíng)養(yǎng)需要量設(shè)計(jì)，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開(kāi)始前對(duì)羊舍進(jìn)行全面的清洗、消毒。試驗(yàn)羊進(jìn)行羊痘、口蹄疫和小反芻獸疫疫苗免疫。試驗(yàn)進(jìn)行期間定期消毒打掃，確保試驗(yàn)場(chǎng)所干凈。預(yù)試期對(duì)試驗(yàn)羊進(jìn)行分組、編號(hào)和驅(qū)蟲(chóng)，逐漸過(guò)渡到試驗(yàn)飼糧。正試期試驗(yàn)羊每日飼喂2次，自由采食、飲水，每日記錄采食量。

1.3 樣品采集

正試期結(jié)束后，每組隨機(jī)挑選6只試驗(yàn)羊置于代謝籠中，采用全收糞收尿法進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)。預(yù)試期4 d，正試期3 d。

糞樣的采集與處理：待晨飼前所有羊排糞完畢后，進(jìn)行稱(chēng)重，記錄數(shù)據(jù)。按排糞量的10%收集取樣，連續(xù)收集3 d，并記錄重量。一部分糞樣中加入10%的硫酸(每100 g糞樣加10 mL 10%的硫酸)固氮，充分混合后置于-20 ℃保存，用以測(cè)定粗蛋白質(zhì)含量；另一部分不做處理直接置于-20 ℃保存，用以測(cè)定粗灰分、水分等常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量和糞能。

尿樣的采集與處理：每次采樣的前1天加入100 mL 10%的硫酸于收尿桶中進(jìn)行固氮，于晨飼前收集尿樣，連續(xù)收集3 d。收集時(shí)使用量筒量取尿液體積，記錄數(shù)據(jù)。將尿樣搖勻后，經(jīng)過(guò)4層紗布過(guò)濾，取一部分進(jìn)行分裝，置于-20 ℃保存，用以測(cè)定尿酸、尿囊素、黃嘌呤、次黃嘌呤含量和尿能。

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定

于正試期第1天08:00對(duì)所有試驗(yàn)羊進(jìn)行空腹稱(chēng)重，作為初始體重，之后每隔15 d進(jìn)行1次稱(chēng)重，記錄數(shù)據(jù)。正試期結(jié)束當(dāng)天08:00空腹稱(chēng)重，作為終末體重。飼喂期間記錄每只羊的日采食量、剩料量，于正試期結(jié)束后計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。

1.4.2 飼糧常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定

按照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[6]方法測(cè)定飼糧中的粗脂肪、粗蛋白質(zhì)、粗灰分含量。參考Van Soest等[7]的方法測(cè)定飼糧中的中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量。代謝能按照以下公式計(jì)算：

代謝能=0.046+0.820×(19.509-0.170×中性 洗滌纖維-0.006×有機(jī)物-0.097×粗蛋白質(zhì))

(R2=0.972，P<0.001)。

1.4.3 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的測(cè)定

糞樣中的中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、水分、粗灰分、粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法同1.4.2。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、氮的表觀消化率、沉積氮和氮沉積率的計(jì)算公式如下：

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100×(食入 該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量-糞中該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量)/ 食入該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量； 氮表觀消化率(%)=100×(攝入氮- 糞氮)/攝入氮； 沉積氮(g/d)=攝入氮-糞氮-尿氮； 氮沉積率(%)=100×沉積氮/攝入氮。

1.4.4 能量的測(cè)定

使用絕熱式量熱儀(IKA-c200，Staufen公司，德國(guó))測(cè)定飼糧、糞樣和尿樣的能量。使用聚碳酸酯頭箱測(cè)量氣體交換，通過(guò)MA-10甲烷分析儀(Sable Systems International公司，美國(guó))測(cè)定甲烷(CH4)含量。

總能(GE，MJ/d)=食入飼料的總能量； 表觀消化能(ADE，MJ/d)=總能-糞能(FE)； 表觀代謝能(AME，MJ/d)=表觀消化能- 尿能(UE)-甲烷能(Eg)； 總能表觀消化率(%)=100×表觀消化能/總能； 消化能代謝率(%)=100×表觀代謝能/ 表觀消化能。

1.4.5 微生物蛋白(microbial crude protein，MCP)含量測(cè)定

使用尿酸檢測(cè)試劑盒(購(gòu)自南京建成生物工程研究所)通過(guò)酶比色法測(cè)定尿中尿酸含量。使用分光光度計(jì)(UV-1800PC，上海美譜達(dá)儀器有限公司)測(cè)定尿中黃嘌呤+次黃嘌呤和尿囊素含量。根據(jù)尿嘌呤衍生物(urinary purine derivatives，PD)(黃嘌呤、次黃嘌呤、尿囊素和尿酸)含量計(jì)算MCP含量。

MCP(g/d)=(尿囊素+尿酸+黃嘌呤+次黃嘌呤)× 70×6.25/(0.116×0.83×1 000)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2013軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)初步整理，應(yīng)用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P≤0.05為差異顯著，0.05

2 結(jié) 果

2.1 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，各組初始體重差異不顯著(P>0.05)。10GSPs、20GSPs和40GSPs組的終末體重均高于對(duì)照組，分別提高了5.48%、4.67%和2.57%，其中10GSPs和20GSPs組的終末體重與對(duì)照組差異顯著(P≤0.05)。10GSPs和20GSPs組的平均日增重和平均日采食量均顯著高于對(duì)照組和40GSPs組(P≤0.05)；10GSPs和20GSPs組的平均日增重較對(duì)照組分別提高了12.01%和12.67%，平均日采食量較對(duì)照組分別提高了6.66%和5.77%；40GSPs組的平均日增重和平均日采食量與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)料重比無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表2 飼料中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表3可知，飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)酸性洗滌纖維表觀消化率無(wú)顯著影響(P>0.05)。20GSPs組的粗蛋白質(zhì)表觀消化率顯著高于對(duì)照組(P≤0.05)，提高了8.94%。40GSPs組的中性洗滌纖維表觀消化率顯著低于對(duì)照組和10GSPs、20GSPs組(P≤0.05)，分別下降了12.60%、13.43%和14.19%。20GSPs組的干物質(zhì)和有機(jī)物表觀消化率顯著高于對(duì)照組和40GSPs組(P≤0.05)；其中，20GSPs組的干物質(zhì)表觀消化率較對(duì)照組和40GSPs組分別提高了11.47%和10.33%，有機(jī)物表觀消化率較對(duì)照組和40GSPs組分別提高了10.12%和11.46%。

表3 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

2.3 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊氮消化代謝的影響

由表4可知，飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)糞氮、尿氮無(wú)顯著影響(P>0.05)。20GSPs組的攝入氮和氮沉積率顯著高于對(duì)照組和40GSPs組(P≤0.05)，攝入氮分別提高了9.84%和15.43%，氮沉積率分別提高了18.24%和21.77%。20GSPs組的氮表觀消化率顯著高于對(duì)照組(P≤0.05)，提高了8.94%。20GSPs組的沉積氮顯著高于10GSPs組(P≤0.05)，提高了15.84%；10GSPs組的沉積氮顯著高于40GSPs組(P≤0.05)，提高了21.08%。

表4 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊氮消化代謝的影響

2.4 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊尿中嘌呤衍生物和MCP含量的影響

由表5可知，飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)尿中尿酸、黃嘌呤+次黃嘌呤含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。40GSPs組的尿中尿囊素、總嘌呤衍生物和MCP含量顯著低于對(duì)照組和10GSPs、20GSPs組(P≤0.05)；其中，40GSPs組的尿中尿囊素含量較對(duì)照組和10GSPs、20GSPs組分別下降了11.39%、15.87%和15.57%，尿中總嘌呤衍生物含量分別下降了11.42%、15.59%和14.83%，尿中MCP含量分別下降了13.44%、18.97%和17.41%。10GSPs和20GSPs組尿中MCP含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表5 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊尿中嘌呤衍生物和MCP含量的影響

2.5 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊能量代謝的影響

由表6可知，飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)糞能無(wú)顯著影響(P>0.05)。10GSPs和20GSPs組的攝入總能、表觀消化能和表觀代謝能顯著高于對(duì)照組和40GSPs組(P≤0.05)；其中，10GSPs組的攝入總能、表觀消化能和表觀代謝能較對(duì)照組分別升高了6.64%、18.93%和29.84%，10GSPs組的攝入總能、表觀消化能和表觀代謝能較40GSPs組分別升高了7.26%、17.89%和24.98%，20GSPs組的攝入總能、表觀消化能和表觀代謝能較對(duì)照組分別升高了6.25%、12.53%和20.57%，20GSPs組的攝入總能、表觀消化能和表觀代謝能較40GSPs組分別升高了6.87%、11.54%和16.05%。10GSPs和20GSPs組的尿能顯著低于對(duì)照組和40GSPs組(P≤0.05)；其中，10GSPs組的尿能較對(duì)照組和40GSPs組分別下降了20.00%和23.23%，20GSPs組的尿能較對(duì)照組和40GSPs組分別下降了17.89%和21.21%。20GSPs和40GSPs組的甲烷能顯著低于對(duì)照組(P≤0.05)，均下降了10.26%。10GSPs組的總能表觀消化率顯著高于20GSPs和40GSPs組(P≤0.05)，分別提高了5.38%和9.87%。20GSPs組的總能表觀消化率顯著高于對(duì)照組(P≤0.05)，提高了5.83%。10GSPs組的消化能代謝率顯著高于對(duì)照組和40GSPs組(P≤0.05)，分別提高了21.84%和16.51%。20GSPs組的消化能代謝率顯著高于對(duì)照組(P≤0.05)，提高了13.42%。

表6 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊能量代謝的影響

續(xù)表6項(xiàng)目Items組別 Groups對(duì)照 Control10GSPs20GSPs40GSPsP值P-value甲烷能 Eg/(MJ/d)3.80±0.29a3.50±0.18ab3.41±0.36b3.41±0.14b0.046表觀消化能 ADE/(MJ/d)18.12±1.13b21.55±1.00a20.39±1.40a18.28±1.06b<0.001表觀代謝能 AME/(MJ/d)13.37±1.15b17.36±1.10a16.12±1.45a13.89±1.24b<0.001總能表觀消化率Apparent digestibility of GE/%58.10±1.94c64.80±2.03a61.49±2.90b58.98±3.39bc0.001消化能代謝率Metabolizability of DE/%42.85±2.74c52.21±2.95a48.60±3.34ab44.81±3.93bc<0.001

3 討 論

3.1 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能的影響

酚類(lèi)物質(zhì)作為天然植物提取物添加劑的一種，在提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能、免疫功能、抗氧化能力等方面發(fā)揮著重要作用，但高濃度的植物多酚可能會(huì)抑制動(dòng)物采食量，擾亂消化生理，抑制營(yíng)養(yǎng)消化和生長(zhǎng)。徐坤等[8]研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，飼糧中添加茶多酚復(fù)合添加劑能顯著提高生長(zhǎng)育肥豬的平均日增重。王凱等[9]等研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中分別添加苜蓿和紅車(chē)軸草黃酮提取物均能顯著提高肉羊的平均日增重，降低料重比。金亞倩等[10]在綿羊飼糧中添加10%葡萄渣，結(jié)果表明10%葡萄渣添加組的肉羊平均日增重較對(duì)照組顯著提高，可能是葡萄皮渣中的主要活性物質(zhì)——葡萄籽原花青素發(fā)揮了主要作用，這與本試驗(yàn)得到的結(jié)果一致。張鵬等[11]研究發(fā)現(xiàn)，利用葡萄籽粉替代一定比例的玉米能提高成年母羊的總增重和平均日增重。此外，何英霞等[12]以歐洲鰻鱺為研究對(duì)象，結(jié)果發(fā)現(xiàn)飼料中添加600 mg/kg的葡萄籽原花青素可顯著提高歐洲鰻鱺增重率和特定生長(zhǎng)率。本試驗(yàn)中，10GSPs和20GSPs組平均日增重和平均日采食量均顯著高于對(duì)照組，一方面原因可能是葡萄籽原花青素作為天然的抗氧化物質(zhì)能清除體內(nèi)自由基，降低羔羊飼養(yǎng)過(guò)程中受到的應(yīng)激反應(yīng)，提高生長(zhǎng)性能；另一方面原因可能是因?yàn)閱螌庮?lèi)物質(zhì)可以降低飼糧蛋白質(zhì)在瘤胃中的降解比例，增加小腸中可吸收飼糧蛋白質(zhì)的比例[13]，從而提高了代謝蛋白質(zhì)的供應(yīng)量和氮的利用率。研究表明，高濃度的植物多酚會(huì)抑制瘤胃微生物尤其是纖維分解菌的生長(zhǎng)，降低飼料消化率[14-15]。此外，繆冰旋[16]通過(guò)葡萄酒對(duì)不同細(xì)菌的抗性研究發(fā)現(xiàn)，葡萄酒酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)四聯(lián)球菌、枯草桿菌和金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽(yáng)性菌表現(xiàn)出較強(qiáng)抗性。付麗等[17]從番荔枝提取到酚類(lèi)物質(zhì)，通過(guò)抗菌研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌和白色念珠菌等革蘭氏陽(yáng)性菌有抑菌作用。因此，本試驗(yàn)中，40GSPs組的平均日增重較10GSPs和20GSPs組低的原因可能是葡萄籽原花青素影響了羔羊瘤胃微生物區(qū)系、降低了飼料消化率所致，葡萄籽原花青素對(duì)羔羊瘤胃發(fā)酵及微生物區(qū)系的影響還需進(jìn)一步研究。

3.2 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

飼糧中各營(yíng)養(yǎng)成分的消化率可作為評(píng)定其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)。飼糧中營(yíng)養(yǎng)成分缺乏是限制動(dòng)物生長(zhǎng)性能發(fā)揮的重要因素，但營(yíng)養(yǎng)成分過(guò)多又造成資源浪費(fèi)。有機(jī)物和干物質(zhì)表觀消化率是直接反映飼糧利用程度的關(guān)鍵指標(biāo)，汪水平等[18]在葡萄籽提取物原花青素對(duì)肉兔消化代謝的研究中發(fā)現(xiàn)，400 mg/kg葡萄籽提取物原花青素組試驗(yàn)兔飼糧干物質(zhì)、有機(jī)物、粗纖維表觀消化率均顯著高于對(duì)照組。本試驗(yàn)中，20GSPs組的有機(jī)物表觀消化率顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明飼糧中添加葡萄籽原花青素可改善羔羊的消化道功能，提高消化能力，進(jìn)而提高飼糧的利用程度。中性洗滌纖維表觀消化率是評(píng)估動(dòng)物粗纖維利用能力的重要指標(biāo)。反芻動(dòng)物通過(guò)瘤胃微生物將粗纖維發(fā)酵為揮發(fā)性脂肪酸(VFA)從而為機(jī)體提供能量。瘤胃中纖維分解菌對(duì)pH變化比較敏感，適宜的pH為6.2～6.8，pH低于6.2將抑制纖維分解菌的活性，降低纖維素的降解率[19]。前人研究表明，多酚類(lèi)物質(zhì)可以提高瘤胃pH，抑制瘤胃液中牛鏈球菌的生長(zhǎng)和繁殖[1-2]。本試驗(yàn)中，各組采食3 h后的瘤胃pH分別為5.80±0.12、5.79±0.10、5.93±0.14、5.94±0.08，說(shuō)明飼糧中葡萄籽原花青素的添加對(duì)瘤胃pH有改善作用。周華等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在35～44日齡的青腳麻雞飼糧基礎(chǔ)上補(bǔ)飼50 mg/kg的花青素能提高粗纖維的代謝率。本試驗(yàn)中，40GSPs組的中性洗滌纖維表觀消化率顯著低于對(duì)照組，可能是多酚物質(zhì)抑制微生物對(duì)纖維物質(zhì)的黏附而導(dǎo)致的結(jié)果。另外，高劑量的多酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)瘤胃中溶纖維丁酸弧菌和黃色瘤胃球菌有明顯抑制作用，所以40GSPs組中性洗滌纖維表觀消化率降低可能與瘤胃纖維分解菌活性受到抑制有直接關(guān)系。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，20GSPs組的粗蛋白質(zhì)表觀消化率顯著升高，表明葡萄籽原花青素可以提高羔羊氮的利用率，改善氮代謝狀況，且進(jìn)一步解釋了平均日增重的提高。適量的葡萄籽原花青素可能降低飼糧蛋白質(zhì)在瘤胃中的降解率，提高小腸中瘤胃非降解蛋白質(zhì)流通量，進(jìn)一步提高蛋白質(zhì)的利用率。然而，過(guò)高水平的單寧會(huì)抑制瘤胃微生物生長(zhǎng)和繁殖，降低飼料消化率，不利于動(dòng)物生長(zhǎng)[21]。

3.3 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊MCP合成和氮代謝的影響

氮沉積和氮的表觀消化反映了機(jī)體氮的代謝狀況，其中氮沉積可反映反芻動(dòng)物蛋白質(zhì)的吸收。飼糧中的含氮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)采食后在體內(nèi)進(jìn)行消化代謝，其中一部分被機(jī)體利用合成體蛋白，另一部分未被瘤胃微生物降解進(jìn)入小腸，與MCP共同構(gòu)成機(jī)體的代謝蛋白[22]。金亞倩等[23]在釀酒葡萄皮渣對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵的研究中發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加釀酒葡萄皮渣后，瘤胃氨態(tài)氮含量降低，導(dǎo)致肝臟合成的尿素含量減少，從而導(dǎo)致進(jìn)入瘤胃的尿素含量下降，瘤胃尿素氮含量隨之降低。田華勤[24]研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，在湖羊羔羊飼糧中添加0.36%的葡萄提取物顯著提高糧氮的沉積量和沉積率。本試驗(yàn)中，20GSPs組的攝入氮顯著高于對(duì)照組。這是因?yàn)檫m量的葡萄籽原花青素能提高動(dòng)物的采食量，提高氮的攝入。20GSPs組氮的表觀消化率、沉積氮和氮沉積率顯著高于對(duì)照組，原因可能是進(jìn)入小腸的代謝蛋白質(zhì)供應(yīng)量提高，機(jī)體對(duì)代謝蛋白質(zhì)的利用率提高，進(jìn)而使氮沉積量和沉積率增加。

MCP含量與瘤胃中氨態(tài)氮含量密切相關(guān)，氨態(tài)氮含量降低可能會(huì)導(dǎo)致MCP合成減少。此外，飼糧中的縮合單寧也會(huì)減低MCP的合成。Ahnert等[25]報(bào)道，單寧類(lèi)物質(zhì)可以降低碳水化合物在瘤胃中的降解，導(dǎo)致供給瘤胃微生物的能量水平降低，十二指腸MCP流量相應(yīng)減少。彭婉婉等[26]研究發(fā)現(xiàn)，添加過(guò)高比例的葡萄籽抑制瘤胃菌群活性，間接降低了瘤胃微生物利用氨態(tài)氮合成瘤胃MCP的速率，最終降低了瘤胃MCP含量。本試驗(yàn)中，10GSPs和20GSPs組的MCP含量與對(duì)照組差異不顯著，然而40GSPs組的MCP含量減少，可能是由于過(guò)高水平的葡萄籽原花青素降低瘤胃中氨態(tài)氮含量的同時(shí)抑制了微生物活性，抑制纖維性物質(zhì)降解提供碳源，瘤胃MCP合成效率降低。

3.4 飼糧中添加葡萄籽原花青素對(duì)羔羊能量代謝的影響

能量是動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)和生產(chǎn)的重要因素，其中大部分用于保證動(dòng)物機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)需求、繁殖、妊娠和生產(chǎn)等活動(dòng)，另一部分以糞、尿和CH4等形式排出。損失的能量中糞能約占33%，甲烷能占2%～15%[27-28]。本試驗(yàn)中，各組的糞能無(wú)顯著差異，10GSPs和20GSPs組的尿能顯著低于對(duì)照組，說(shuō)明飼糧中添加葡萄籽原花青素可以減少動(dòng)物機(jī)體的能量損耗。

童津津等[29]研究發(fā)現(xiàn)，奶牛飼糧中添加葡萄籽原花青素能影響產(chǎn)甲烷菌的生長(zhǎng)環(huán)境，抑制產(chǎn)甲烷菌的生長(zhǎng)，并降低產(chǎn)甲烷菌對(duì)其生長(zhǎng)代謝原料的利用能力，從而降低各產(chǎn)甲烷菌的相對(duì)豐度。Bueno等[30]研究發(fā)現(xiàn)，隨著單寧的分子質(zhì)量增大，其抑制發(fā)酵過(guò)程降低CH4產(chǎn)量的效果越明顯。這種抑制作用與原蟲(chóng)數(shù)量的減少密切相關(guān)，因?yàn)樵x(chóng)與產(chǎn)甲烷菌是互利共生關(guān)系，附著在原蟲(chóng)表面的甲烷菌隨原蟲(chóng)數(shù)量的降低而降低，因此CH4產(chǎn)量顯著降低[31]。本試驗(yàn)中，隨著飼糧中添加葡萄籽原花青素的增加，甲烷能降低，無(wú)論在提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和降低溫室效應(yīng)等方面都起到積極作用。推測(cè)甲烷能降低的原因可能是葡萄籽原花青素的添加降低了產(chǎn)甲烷菌的相對(duì)豐度和原蟲(chóng)數(shù)量。也有研究報(bào)道，原花青素可以通過(guò)抗組胺作用來(lái)降低氧化應(yīng)激引起的胃腸道黏膜損傷，對(duì)動(dòng)物腸道有一定的保護(hù)作用[32]，長(zhǎng)期食用原花青素能夠緩解內(nèi)毒素對(duì)腸道屏障完整性的損傷[33]。本試驗(yàn)中，添加適量的葡萄籽原花青素可以提高攝入總能、表觀消化能、表觀代謝能、總能表觀消化率和消化能代謝率，推測(cè)原因可能是葡萄籽原花青素通過(guò)保護(hù)羔羊腸道健康提高羔羊?qū)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

4 結(jié) 論

飼糧中添加葡萄籽原花青素可以改善高精料育肥模式下羔羊的生長(zhǎng)性能，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率，提高攝入總能、表觀消化能、表觀代謝能、總能表觀消化率和消化能代謝率，以20 mg/kg BW添加量為宜。