王晨昱 劉永輝 李 響 胡 鮮 何流琴,3 李鐵軍* 印遇龍
(1.中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所,動(dòng)物營養(yǎng)生理與代謝過程湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,長沙410125;2.中國科學(xué)院大學(xué) 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)學(xué)院,北京100049;3.湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,動(dòng)物腸道功能湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,長沙410081)
天冬氨酸(Asp)作為一種功能性氨基酸[1],在糖代謝、尿素循環(huán)、線粒體功能等代謝方面發(fā)揮著重要的生物學(xué)作用[2],可改善動(dòng)物機(jī)體免疫和抗氧化功能以及促進(jìn)生長發(fā)育[3]。而作為L-天冬氨酸(L-Asp)的同分異構(gòu)體D-天冬氨酸(D-Asp)則很少被關(guān)注。研究表明,經(jīng)堿性、高pH和長期加熱等加工技術(shù)處理的食品含有包括D-Asp在內(nèi)的大量D-氨基酸[4],體內(nèi)也可通過D-天冬氨酸氧化酶和天冬氨酸消旋酶轉(zhuǎn)化或者合成獲得[4-6]。
D-Asp大多分布于腦(包括海馬和前額葉皮層)和內(nèi)分泌器官(腎上腺、垂體和睪丸)中,對維持動(dòng)物正常的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和神經(jīng)元功能以及調(diào)控激素水平等方面發(fā)揮重要作用[7]。添加D-Asp可調(diào)節(jié)小鼠生長激素的釋放,促進(jìn)小鼠的生長發(fā)育[8],在熱應(yīng)激條件下,飼糧添加適量D-Asp或添加可產(chǎn)生D-Asp的活菌,可通過調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)有效降低直腸溫度,產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用,從而改善雛雞的采食量以及生長性能[9]。除了在緩解雛雞熱應(yīng)激方面有很大潛力,D-Asp也可以通過改變腸道微生物菌群區(qū)系影響斷奶仔豬的生長性能[10]。目前關(guān)于D-Asp功能研究大多集中于醫(yī)學(xué)和藥學(xué)領(lǐng)域,在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中關(guān)于D-Asp對生豬機(jī)體健康和生長性能的影響研究鮮少報(bào)道。因此,本研究擬通過在飼糧中添加不同水平的D-Asp,探討其對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標(biāo)、游離氨基酸含量以及營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響,為改善仔豬生長性能和提高營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率提供理論依據(jù),同時(shí)為畜禽功能性氨基酸營養(yǎng)需要與飼養(yǎng)管理提供新的調(diào)控策略。
D-Asp(純度≥98%)購自湖南某生物科技有限公司?;A(chǔ)飼糧購自長沙某飼料科技有限公司。三元雜交(杜×長×大)斷奶仔豬購于湖南某農(nóng)牧發(fā)展有限公司。
選擇44頭體況相近的45日齡健康三元雜交(杜×長×大)斷奶仔豬,平均體重為(10.74±0.25) kg,隨機(jī)分為4組,每組11個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1頭豬,公母各占1/2,其中對照組飼喂粗蛋白質(zhì)(CP)含量為17%的玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧,D-Asp添加量根據(jù)Li等[10]和前期預(yù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)置,試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加50、500和5 000 mg/kgD-Asp的試驗(yàn)飼糧?;A(chǔ)飼糧的配制參照NRC(2012)中10~30 kg體重?cái)嗄套胸i營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn),其組成及營養(yǎng)水平見表1,飼糧中氨基酸含量見表2。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
表2 飼糧中氨基酸含量
本試驗(yàn)在中科院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所動(dòng)物飼養(yǎng)室進(jìn)行,全封閉式豬舍,漏縫金屬材質(zhì)地板,不銹鋼可調(diào)式料槽,乳頭式飲水器。仔豬單籠飼養(yǎng),并按照豬場標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)管理程序?qū)υ囼?yàn)豬進(jìn)行驅(qū)蟲與免疫處理。預(yù)試期5 d,正試期28 d。每天飼喂粉料3次,時(shí)間為07:30、12:00和18:30,自由飲水和采食,以食槽無剩料為原則。整個(gè)圈舍采取自然通風(fēng),在養(yǎng)殖期內(nèi)對所有圈舍進(jìn)行不定期消毒和清掃。
1.4.1 生長性能的測定
于試驗(yàn)第14、21和28天,分別對斷奶仔豬進(jìn)行稱重,記錄每天的采食量和健康狀況,根據(jù)采食量和體重計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.4.2 臟器指數(shù)的測定
飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后,每組隨機(jī)選取6頭豬,共24頭豬,禁食12 h,麻醉后屠宰解剖,屠宰后取出心臟、肝臟、脾臟和腎臟,將表面水分吸干后進(jìn)行稱重,并計(jì)算臟器指數(shù)。
臟器指數(shù)(%)=[臟器重量(kg)/ 宰前活重(kg)]×100。
1.4.3 血清生化指標(biāo)的和游離氨基酸含量的測定
飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后,斷奶仔豬禁食12 h,進(jìn)行空腹采血,取前腔靜脈血液10 mL,3 000 r/min、4 ℃離心10 min,取上層血清于1.5 mL離心管中,-20 ℃凍存。待測時(shí),將血清解凍,取300 μL用CX4型全自動(dòng)生化分析儀(美國Backman公司)測定,測定總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、葡萄糖(GLU)、氨的含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)的活性。測定方法按羅氏(Roche)生化試劑盒操作說明進(jìn)行。
取700 μL血清,加入8%磺基水楊酸700 μL,充分混勻,靜置1 h,4 ℃,10 000 r/min離心20 min,離心過后取下層水相,過0.22 μm濾膜后裝入上樣瓶存于4 ℃,用氨基酸分析儀(L8900,日本)測定血清游離氨基酸的含量。
1.4.4 糞便的收集處理和營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的測定
1.4.4.1 糞便的采集、處理及測定
在試驗(yàn)結(jié)束前3天對糞樣進(jìn)行采集,混勻后將收集的糞樣分為2份,其中一份使用10% HCl進(jìn)行固氮,以10 g/mL的濃度進(jìn)行,用于測定糞便中的粗蛋白質(zhì)含量。另一份糞樣置于105 ℃烘箱中處理,待到恒重后取出稱重,用于測定糞便中的絕干干物質(zhì)含量。將烘干的樣品粉碎過40目篩保存待測。
1.4.4.2 營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的測定
飼糧和糞便樣品中的干物質(zhì)含量根據(jù)GB/T 6435—2006測定;粗蛋白質(zhì)含量根據(jù)GB/T 6432—1994測定;粗脂肪(EE)含量根據(jù)GB/T 6433—2006測定;粗灰分(Ash)含量根據(jù)GB/T 6438—2007測定;粗纖維(CF)含量根據(jù)GB/T 6434—2006測定。
本試驗(yàn)采用內(nèi)源指示劑-鹽酸不溶灰分(AIA)法進(jìn)行表觀消化率的測定,計(jì)算公式如下:
營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100-[(飼糧中 AIA含量/糞中AIA含量)×(糞中 營養(yǎng)物質(zhì)含量/飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)含量)×100]。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)先用Excel 2018軟件進(jìn)行整理和分析,數(shù)據(jù)以平均值(mean)±標(biāo)準(zhǔn)誤(standard error, SE)表示,然后使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)。單因素方差分析顯著時(shí),采用Duncan氏法對數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,以P<0.05作為顯著性判斷依據(jù),0.05≤P<0.10為有差異趨勢。
由表3可知,試驗(yàn)第14天,試驗(yàn)Ⅰ組的平均體重、ADFI和ADG顯著高于其他3組(P<0.05),且比對照組分別提高19.6%、8.8%和35.6%。而試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組F/G均顯著低于對照組(P<0.05),分別降低16.4%、10.6%和12.8%,其中試驗(yàn)Ⅰ組F/G最低。
表3 D-Asp對斷奶仔豬生長性能的影響
試驗(yàn)第21天,試驗(yàn)Ⅰ組平均體重最高,較對照組提高13.5%,并且較試驗(yàn)Ⅱ和Ⅲ組分別提高12.1%和9.2%,但是各組之間差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)Ⅰ組的ADFI最高,試驗(yàn)Ⅱ組的ADFI最低。試驗(yàn)Ⅰ組的ADG顯著高于其他3組(P<0.05),與對照組相比,顯著提高了16.4%。試驗(yàn)Ⅰ組的F/G也顯著低于其他3組(P<0.05),較對照組降低20.2%。
試驗(yàn)第28天,試驗(yàn)Ⅰ組平均體重最高,較對照組提高10.2%,并且相較試驗(yàn)Ⅱ和Ⅲ組分別提高11.3%和8.4%,但是各組之間差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比,試驗(yàn)Ⅱ組的ADFI顯著降低(P<0.05);試驗(yàn)Ⅰ組ADFI最高,且顯著高于試驗(yàn)Ⅲ組(P<0.05)。試驗(yàn)Ⅰ組的ADG顯著高于其他3組(P<0.05),與對照組相比,顯著提高了23.5%。試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組F/G均顯著低于對照組(P<0.05),分別降低16.3%、11.0%和15.8%,其中試驗(yàn)Ⅰ組F/G最低。
由表4可知,飼糧添加不同水平D-Asp對斷奶仔豬臟器指數(shù)無顯著影響(P>0.05)。
表4 D-Asp對斷奶仔豬臟器指數(shù)的影響
由表5可知,隨著D-Asp添加水平的增加,血清TP和ALB含量也隨之增加,呈現(xiàn)劑量效應(yīng),且試驗(yàn)組的血清ALB含量均顯著高于對照組(P<0.05)。試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組血清TP含量顯著高于對照組(P<0.05)。與對照組相比,添加不同水平D-Asp均可顯著提高血清ALP活性(P<0.05),且試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組間無顯著差異(P>0.05)。各組之間血清GLU、氨含量及ALT和AST活性無顯著差異(P>0.05)。
表5 D-Asp對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響
由表6可知,對于必需氨基酸,隨著飼糧中D-Asp添加水平的增加,斷奶仔豬血清中的游離異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)和纈氨酸(Val)含量呈線性降低趨勢,對照組中所含Ile、Leu和Val含量顯著高于其他試驗(yàn)組(P<0.05);與對照組相比,添加不同水平的D-Asp可顯著提高斷奶仔豬血清中賴氨酸(Lys)含量,同時(shí)不同程度降低苯丙氨酸(Phe)的含量;飼糧中添加不同水平D-Asp對血清中蛋氨酸(Met)和蘇氨酸(Thr)含量無顯著影響(P>0.05)。對于非必需氨基酸,飼糧中添加不同水平D-Asp對血清絲氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、酪氨酸(Tyr)和脯氨酸(Pro)含量均無顯著影響(P>0.05);隨著飼糧中D-Asp添加水平的增加,血清組氨酸(His)的含量降低,對照組的含量最高且顯著高于試驗(yàn)組(P<0.05);與對照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組血清甘氨酸(Gly)和半胱氨酸(Cys)含量顯著升高(P<0.05),且顯著高于其他2組試驗(yàn)組(P<0.05),試驗(yàn)Ⅲ組血清Asp含量顯著高于其他3組(P<0.05)。試驗(yàn)Ⅲ組血清精氨酸(Arg)含量也顯著高于試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組(P<0.05),與對照組差異不顯著(P>0.05)。
表6 D-Asp對斷奶仔豬血清游離氨基酸含量的影響
由表7可知,與對照組相比,試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組的粗脂肪表觀消化率顯著提高(P<0.05),分別提高了7.8%、10.3%和10.5%,但粗灰分表觀消化率顯著降低(P<0.05),分別降低了14.5%、11.6%和11.1%。與對照組相比,試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組粗蛋白質(zhì)和粗纖維表觀消化率顯著降低(P<0.05),試驗(yàn)Ⅲ組與對照組間無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,試驗(yàn)Ⅰ組總能表觀消化率顯著降低了3.1%(P<0.05),其他試驗(yàn)組與對照組間無顯著差異(P>0.05)。不同水平D-Asp對干物質(zhì)表觀消化率無顯著影響(P>0.05)。
表7 D-Asp對斷奶仔豬營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響
在養(yǎng)豬生產(chǎn)過程中,斷奶仔豬階段生長性能的好壞直接關(guān)系生豬后期育肥階段的生長和肉品質(zhì)安全,是影響經(jīng)濟(jì)效益的關(guān)鍵指標(biāo)[11]。在動(dòng)物體內(nèi),L-Asp是腸上皮細(xì)胞的主要能量來源,與谷氨酸同是合成Pro、Arg、丙氨酸(Ala)等氨基酸的底物,可通過改善肝臟代謝來緩解仔豬氧化應(yīng)激[12]。而D-Asp則主要分布于神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)中,可有效調(diào)控動(dòng)物激素水平進(jìn)而影響動(dòng)物的生理活動(dòng)[13]。本研究結(jié)果表明,飼糧中添加不同水平D-Asp可以不同程度地改善斷奶仔豬ADFI、ADG和降低F/G。尤其是添加50 mg/kgD-Asp時(shí),可顯著提高斷奶仔豬的ADG和ADFI以及降低F/G。添加500和5 000 mg/kg的D-Asp在平均體重方面與對照組差異不顯著,但是仍然可以顯著降低F/G,這意味著添加不同水平D-Asp可不同程度地改善斷奶仔豬的生長性能和提高飼料轉(zhuǎn)化率。其原因可能如下:一方面D-Asp可轉(zhuǎn)化為L-氨基酸用于機(jī)體蛋白質(zhì)的合成,另一方面D-Asp也可合成N-甲基-D-天冬氨酸直接或間接刺激N-甲基D-天冬氨酸受體[14],而適量的N-甲基D-天冬氨酸能夠調(diào)控動(dòng)物生長激素等激素的水平,調(diào)控脂肪代謝,從而顯著提高仔豬的生長速度和采食量[15]。Li等[10]研究表明,飼糧添加1%L-Asp對斷奶仔豬生長性能無顯著影響,但添加1%D-Asp會(huì)抑制其生長和破壞仔豬免疫功能。也有研究表明,在飼糧中添加2%D-Asp顯著抑制雞的生長,添加6%L-Asp則不會(huì)抑制生長[16]。這些結(jié)果與本研究結(jié)果均相反,這可能是因?yàn)轱暭Z中添加過量的D-Asp不能有效地被動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的天冬氨酸消旋酶或氧化酶所降解,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)D-Asp過量積累,阻礙畜禽生長發(fā)育[4],但是適量D-Asp的添加則可促進(jìn)動(dòng)物的生長發(fā)育。
臟器指數(shù)主要是反映動(dòng)物內(nèi)臟器官是否中毒以及臟器功能強(qiáng)弱的一個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)[17],同時(shí)也可以反映動(dòng)物生長發(fā)育的狀況和營養(yǎng)物質(zhì)吸收情況[18]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加不同水平的D-Asp對斷奶仔豬的心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、肺臟指數(shù)以及腎臟指數(shù)均沒有顯著影響,這表明低水平D-Asp對斷奶仔豬內(nèi)臟器官無毒害作用。
動(dòng)物機(jī)體的原料以及消化產(chǎn)物的代謝都是通過血液的運(yùn)輸來實(shí)現(xiàn),血清生化指標(biāo)的變化能夠直接反映動(dòng)物的營養(yǎng)狀態(tài)和健康狀況,也能反映組織器官機(jī)能的變化[19]。本研究結(jié)果表明,斷奶仔豬血清TP和ALB的含量呈劑量效應(yīng),即隨著D-Asp添加水平的增加,血清TP和ALB含量顯著增加。血清TP和ALB的含量主要受飼糧類型以及營養(yǎng)水平的影響,可以反映機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝水平和免疫機(jī)能[20]。血清TP和ALB含量的提高,則說明斷奶仔豬體內(nèi)的蛋白質(zhì)合成代謝增加以及提高免疫力。動(dòng)物血清中的ALT、AST和ALP的活性可以反映動(dòng)物肝臟功能的受損程度和抗應(yīng)激能力[21]。本試驗(yàn)中,添加不同水平的D-Asp對仔豬血清中AST和ALT活性并沒有顯著影響,卻可顯著提高血清中ALP的活性,這一結(jié)果與Li等[10]研究添加1%D-Asp或DL-Asp的結(jié)果相一致。這可能是由于添加D-Asp會(huì)促進(jìn)肝臟代謝,增強(qiáng)肝臟中的D-Asp氧化酶活性,加快脂肪消化吸收和鈣磷沉積,提高機(jī)體抗應(yīng)激能力,從而改善仔豬的生長發(fā)育。
Lys是生豬生長過程中的第一限制性氨基酸,本研究發(fā)現(xiàn),添加不同水平D-Asp可顯著提高血清游離Lys含量,這表明體內(nèi)蛋白質(zhì)合成速度加快,提高產(chǎn)肉效率,促進(jìn)肌肉的生長發(fā)育[22]。支鏈氨基酸(Val、Leu、Ile)參與機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)和能量的代謝,可以通過哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路調(diào)節(jié)機(jī)體能量和蛋白質(zhì)的代謝,促進(jìn)動(dòng)物生長和健康[23],而添加不同水平的D-Asp則顯著降低血清支鏈氨基酸含量,這是否預(yù)示著添加D-Asp干擾了支鏈氨基酸的代謝,有待進(jìn)一步研究。本研究表明,添加不同水平的D-Asp顯著降低血清Phe含量,而Phe與Tyr具有協(xié)同作用,Phe與Tyr的比值可以作為衡量Phe在體內(nèi)的累積情況,在本試驗(yàn)中各組Phe與Tyr的比值分別為0.80、0.72、0.88和0.73,表明不添加或添加中劑量的D-Asp可有Phe累積的現(xiàn)象[24],從而抑制了仔豬生長發(fā)育,這也進(jìn)一步證實(shí)了500 mg/kgD-Asp添加量的仔豬表現(xiàn)出比其他組生長發(fā)育遲緩和采食量低的現(xiàn)象。當(dāng)飼糧提供的非必需氨基酸不能滿足動(dòng)物機(jī)體需求時(shí),動(dòng)物機(jī)體能通過一系列轉(zhuǎn)氨反應(yīng)合成非必需氨基酸以滿足動(dòng)物的需求[25]。本研究發(fā)現(xiàn),添加不同水平的D-Asp可顯著影響血清非必需氨基酸Asp、Gly、Cys、His和Arg的含量,但對Ser、Glu、Ala、Tyr和Pro含量無顯著影響。添加低水平和中水平的D-Asp可降低血清Arg和His含量,這可能是因?yàn)樘砑由倭康腄-Asp可有效提高精氨酸酶和組氨酸酶的活性,從而加速Arg和His的分解[26]。血清中Gly和Cys主要是參與機(jī)體的脂肪代謝和解毒作用[27-28],添加50 mg/kg的D-Asp可顯著增加血清中的Gly和Cys的含量,從而調(diào)控機(jī)體的脂肪代謝,促進(jìn)斷奶仔豬生長發(fā)育和蛋白質(zhì)的合成。
目前國內(nèi)外尚無對D-Asp影響斷奶仔豬表觀消化率的影響研究,因此,本試驗(yàn)探討了飼糧添加不同水平D-Asp對斷奶仔豬營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響,以期說明具有旋光性的D-氨基酸對斷奶仔豬營養(yǎng)需求的作用。本研究發(fā)現(xiàn),添加不同水平D-Asp可有效提高斷奶仔豬粗脂肪表觀消化率。飼糧中的脂肪通常是在腸道脂肪酶的作用下,將其分解為游離脂肪酸和甘油,以乳糜微粒的形式進(jìn)入血液循環(huán)[29]??诜﨑-Asp會(huì)引起新生雛雞體溫的抑制,同時(shí)也可以影響血漿代謝產(chǎn)物中的甘油三酯含量[9],這進(jìn)一步證明D-Asp與機(jī)體脂質(zhì)代謝有關(guān),可以影響小腸對脂質(zhì)的吸收。有研究報(bào)道,D-氨基酸的添加會(huì)導(dǎo)致消化道蠕動(dòng)能力降低,進(jìn)而降低動(dòng)物營養(yǎng)物質(zhì)消化率[30]。這與本試驗(yàn)結(jié)果一致,本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)添加不同水平D-Asp可降低斷奶仔豬粗蛋白質(zhì)和總能表觀消化率,且添加50 mg/kgD-Asp時(shí),其粗蛋白質(zhì)和總能表觀消化率最低,這主要是因?yàn)镈-Asp會(huì)降低腸道蠕動(dòng)能力,同時(shí)此處理增加了斷奶仔豬的采食量,在這雙重因素的作用下降低了飼糧的消化率。營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的變化一定程度上也與腸道微生物有關(guān),D-氨基酸可阻止各種細(xì)菌生物膜的形成和促進(jìn)已形成的生物膜分解,從而影響腸道微生物有益菌和有害菌的分布[31]。D-Asp作為D-氨基酸的一種,也可影響動(dòng)物腸道微生物種群區(qū)系,從而影響了粗纖維及其他營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率,但具體的作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。
飼糧中添加不同水平的D-Asp,尤其是添加50 mg/kg的D-Asp時(shí),可有效提高斷奶仔豬的生長性能和飼料轉(zhuǎn)化率,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,影響體內(nèi)氨基酸代謝。因此,50 mg/kgD-Asp有潛力作為一種新型的功能性添加劑應(yīng)用于斷奶仔豬飼糧中。
動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)2021年6期