關(guān)玉峰 賀麗榮 王浩志 何嘉林 劉俊杰 張 彤

（1.廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院消化中心一區(qū)，廣東廣州 511400；2.廣東省婦幼保健院產(chǎn)科，廣東廣州 511400；3.廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院消化中心二區(qū)，廣東廣州 511400）

結(jié)直腸癌為臨床上常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，占消化道惡性腫瘤死亡前列。結(jié)直腸癌發(fā)病隱匿，多數(shù)患者就診時(shí)病情已發(fā)展至中晚期，錯(cuò)過(guò)最佳手術(shù)治療時(shí)間，因此如何提高結(jié)直腸癌早期的有效診斷率，已成為臨床研究的熱門(mén)話題[1]。結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中存在多種分子異常表達(dá)，研究其異常表達(dá)情況對(duì)了解結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制、診斷具有重要意義?；诖耍狙芯烤徒Y(jié)直腸癌患者病灶組織中白細(xì)胞介素18 （IL-18）、促肝細(xì)胞再生磷酸酶3 （PRL-3）、胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶 （PI3K）和蛋白激酶B （AKT）與臨床病理特征的關(guān)系展開(kāi)探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2020年1月廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院收治的91例結(jié)直腸癌患者為對(duì)象，回顧性分析患者臨床資料，其中男性49例，女性42例；年齡42～69歲，平均年齡 （55.61±13.49）歲。本研究獲廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn) （批號(hào)2017-15號(hào)）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)組織病理檢查初次確診為結(jié)直腸癌；②年齡＞18歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤疾病；②伴有全身感染性疾病；③伴有嚴(yán)重心、肝、腎功能性疾病。

1.2 方法 免疫組化法檢查結(jié)腸癌組織內(nèi)IL-18、PRL- 3、PI3K和AKT表達(dá)水平 所有患者入院后均在治療前行腸鏡檢查，取癌組織及癌旁正常組織各4塊，用10%福爾馬林浸泡24 h，常規(guī)石蠟包埋后制成厚3～4 μm的切片，切片脫蠟水化后參照鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)法免疫組化試劑盒染色說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，以磷酸緩沖鹽溶液作為陰性對(duì)照，于光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞染色結(jié)果。判定標(biāo)準(zhǔn)[2]：隨機(jī)選擇5個(gè)高倍鏡視野，根據(jù)細(xì)胞染色程度分為無(wú)染色 （-）、淺黃色 （+）、棕黃色 （++）、棕褐色 （+++），分別賦值0～3分；根據(jù)視野內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞占比分為≤10%、11～25%、26～50%、＞50%，分別賦值0～3分?？傇u(píng)分=染色程度評(píng)分×陽(yáng)性細(xì)胞占比評(píng)分，其中≥3分為陽(yáng)性，≤2分為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以 （）表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例 （%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較不同組織內(nèi)lL-18、PRL-3、Pl3K和AKT陽(yáng)性檢出率 癌組織內(nèi)IL-18、PRL-3、PI3K和AKT陽(yáng)性檢出率顯著高于癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P ＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 比較不同組織內(nèi)lL-18、PRL-3、Pl3K和AKT陽(yáng)性檢出率 [例（%）]

2.2 比較不同臨床病理特征結(jié)直腸癌患者lL-18、PRL-3陽(yáng)性表達(dá)率 結(jié)直腸癌患者IL-18、PRL-3陽(yáng)性表達(dá)率與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度具有相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 比較不同臨床病理特征結(jié)直腸癌患者lL-18、PRL-3陽(yáng)性表達(dá)率

2.3 比較不同臨床病理特征結(jié)直腸癌患者Pl3K和AKT陽(yáng)性表達(dá) TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度達(dá)到漿膜/漿膜外患者的PI3K和AKT陽(yáng)性檢出率較高 （P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 比較不同臨床病理特征結(jié)直腸癌患者Pl3K和AKT陽(yáng)性表達(dá)

3 討論

結(jié)直腸癌為臨床上常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，近年來(lái)在我國(guó)該病發(fā)病率及病死率正逐年升高，嚴(yán)重危害患者身心健康，并給其家庭帶來(lái)極大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，其診療工作也愈發(fā)受到臨床醫(yī)師的關(guān)注[3]。結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中有許多信號(hào)通絡(luò)參與，其中PRL-3信號(hào)通路及IL18調(diào)控的PI3K和AKT信號(hào)通路是結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展的重要通路[4]。

本研究結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌患者癌組織內(nèi)IL-18、PRL-3、PI3K和AKT陽(yáng)性檢出率明顯高于癌旁正常組織，提示結(jié)直腸癌患者癌組織內(nèi)IL-18、PRL-3、PI3K和AKT表達(dá)水平較高。馮躍等[5]的研究證實(shí)結(jié)腸癌組織中PI3K和AKT陽(yáng)性檢出率高于癌旁正常組織，與本研究結(jié)果相符。惡性腫瘤患者體內(nèi)處于高應(yīng)激狀態(tài)，伴有一定程度的炎性反應(yīng)，通過(guò)釋放IL-18激活細(xì)胞毒性體T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞而對(duì)抗腫瘤細(xì)胞；PRL-3為蛋白酪氨酸磷酸酶加圖的重要成員之一，可提高細(xì)胞內(nèi)DNA合成率，加速細(xì)胞有絲分裂進(jìn)程，而促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞增殖；PI3K和AKT通路可調(diào)控相關(guān)基因而抑制惡性腫瘤細(xì)胞凋亡，并加快腫瘤細(xì)胞糖代謝，提高其增殖速率。故結(jié)直腸癌腫瘤細(xì)胞內(nèi)IL-18、PRL- 3、PI3K和AKT陽(yáng)性檢出率較高。

本研究結(jié)果顯示，TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)程度達(dá)到漿膜/漿膜外患者的IL-18、PRL- 3、PI3K和AKT陽(yáng)性檢出率較高，提示IL-18、PRL-3、PI3K和AKT陽(yáng)性與結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。劉立等[6]的研究證實(shí)結(jié)腸癌組織中IL-18、PI3K和AKT表達(dá)水平較高，且與結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。IL-18可通過(guò)與其他受體結(jié)合激活核因子κB信號(hào)通路，誘導(dǎo)Th1細(xì)胞分泌 γ 干擾素，促進(jìn)癌細(xì)胞增殖分裂，同時(shí)IL-18可誘導(dǎo)PI3K和AKT信號(hào)通路，促進(jìn)自然殺傷細(xì)胞增殖，影響免疫系統(tǒng)。

綜上，結(jié)直腸癌患者癌組織內(nèi)IL-18、PRL-3、PI3K和AKT陽(yáng)性表達(dá)率高，均參與到結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中。