張麗嬌，楊雁鴻，周文文，王小玉，王真真，趙子舒

CA-724最早在80年代初被描述為是一種新穎的抗原，以鼠抗體與人轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞發(fā)生免疫反應(yīng)而產(chǎn)生，現(xiàn)是用于檢測(cè)胃癌的最特異和敏感的標(biāo)記物之一［1-3］。有研究表示約29.9%的胃癌患者體內(nèi)CA-724水平升高，且隨著疾病的進(jìn)展而升高，但在健康人群中，其對(duì)胃癌的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值非常低（0.18%）［4-5］。熱休克蛋白（HSP）可在人類(lèi)多種腫瘤細(xì)胞中過(guò)度表達(dá)，與惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移、不良預(yù)后，以及化療、放療的耐藥性顯著相關(guān)［6-9］。HSP90α作為一種新型腫瘤指標(biāo)，被檢測(cè)出在胃癌細(xì)胞中大量表達(dá)，且與其疾病進(jìn)展及預(yù)后密切相關(guān)［10-11］。故兩者聯(lián)合檢測(cè)預(yù)期胃癌有一定的診斷效能，且可能與其預(yù)后相關(guān)。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)胃癌患者血清HSP90α、CA-724水平，探討HSP90α聯(lián)合CA-724對(duì)胃癌診斷中的價(jià)值研究。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選取2018年06月~2020年03月秦皇島市第一醫(yī)院腫瘤科收治的胃癌患者80例（胃癌組）和同期健康體檢者73例（健康對(duì)照組），所有胃癌患者均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為胃癌，腺癌72例，腺鱗癌7例，類(lèi)癌1例；年齡47~80歲，平均年齡（59±10）歲；男57例，女23例；胃癌TNM分期Ⅰ期6例，Ⅱ期10例，Ⅲ期29例，Ⅳ期例35。健康對(duì)照組年齡46~76歲，平均年齡（54±12）歲；男51例，女22例。兩組性別和年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過(guò)，所有入組患者均簽署知情同意書(shū)。

納入標(biāo)準(zhǔn)（1）經(jīng)病理學(xué)檢查和或細(xì)胞學(xué)檢查明確確診為胃癌，且未接受過(guò)任何治療的首診患者；（2）病歷資料完整，有準(zhǔn)確的醫(yī)療記錄；（3）無(wú)其他惡性腫瘤的既往治療史；（4）卡氏評(píng)分≥70分，能耐受2周期化療。排除標(biāo)準(zhǔn)（1）伴心、腦、腎、肝等重要臟器衰竭患者；（2）化療后出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥或不愿配合診療者；（3）患者自愿中途退出者；（4）中途死亡者。

1.2 方法 選取卡氏評(píng)分≥70分的Ⅳ期胃癌患者20例，給予姑息性化療，均選用XELOX方案化療（奧沙利鉑130 mg/m2，靜脈滴注第1天；卡培他濱1 000 mg/m2口服bid第1~14天；21 d/周期），HER-2陽(yáng)性的患者加用赫塞?。ㄊ状? mg/kg，之后6 mg/kg，21 d/周期），經(jīng)影像學(xué)評(píng)估該20例患者治療效果，監(jiān)測(cè)患者化療2周期前后血漿HSP90α、CA-724水平變化。所有胃癌患者在化療前、健康人群在同時(shí)期抽取靜脈血2 ml，檢測(cè)HSP90α、CA-724（使用煙臺(tái)普羅吉生物科技發(fā)展有限公司定量檢測(cè)試劑盒，采用ELASA雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法），2周期化療結(jié)束后復(fù)查HSP90α，對(duì)比化療前后HSP90α水平變化。血漿HSP90α試劑盒檢測(cè)值范圍為0~200 ng/ml，敏感度為0.1 ng/ml；血清CA-724試劑盒檢測(cè)范圍為0.200~300 U/ml，利用受試者工作特征曲線 （receiver operating characteristic curve，ROC），依據(jù)曲線下面積評(píng)估腫瘤標(biāo)志物診斷效能，同時(shí)找出最佳臨床診斷臨界點(diǎn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（）表示，比較采用t檢驗(yàn)。采用ROC曲線對(duì)比HSP90α、CA-724指標(biāo)分別單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)胃癌的診斷價(jià)值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 健康對(duì)照組和胃癌組患者血清HSP90α、CA-724水平的比較 與健康對(duì)照組比較，胃癌組患者血清HSP90α、CA-724水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患者血清HSP90α、CA-724水平比較（）

表1 兩組患者血清HSP90α、CA-724水平比較（）

組別 例數(shù) HSP90α CA-724健康對(duì)照組 73 69.29±22.27 5.76±3.54胃癌組 80 83.98±18.26 7.23±3.59 t值 4.43 2.62 P值 0.000 0.01

2.2 血清HSP90α、CA-724水平與化療療效的相關(guān)性 依據(jù)RECIST 1.1評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估患者化療療效，入組的20例胃癌患者均為疾病穩(wěn)定或部分緩解，見(jiàn)表2?；熐昂笱迥[瘤標(biāo)志物HSP90α、CA-724水平比較發(fā)現(xiàn)，指標(biāo)大多數(shù)有不同程度的下降，見(jiàn)表3。HSP90α的陽(yáng)性率從化療前的85%下降到25%；CA-724的陽(yáng)性率從化療前90%下降到35%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明化療后HSP90α、CA-724結(jié)果下降明顯，見(jiàn)表4。

表2 胃癌組化療前后CT下病灶最長(zhǎng)直徑的比較

表3 胃癌組化療前后CA-724、Hsp90α水平變化的比較（）

表3 胃癌組化療前后CA-724、Hsp90α水平變化的比較（）

組別 例數(shù)化療前 80化療后 80 t值P值HSP90α CA-724 86.46±15.92 9.08±2.76 70.97±22.16 6.82±3.24 2.451 2.653 0.024 0.016

表4 胃癌組化療前后CA-724、Hsp90α陽(yáng)性率的比較

2.3 血清HSP90α聯(lián)合CA-724在胃癌診斷中的價(jià)值 ROC曲線分析中，血清HSP90α曲線下面積（AUC）為0.712，血清CA-724 AUC為0.620，聯(lián)合HSP90α聯(lián)合CA-724診斷AUC為0.729，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。根據(jù)該ROC曲線下坐標(biāo)計(jì)算約登指數(shù)，選取最大值所對(duì)應(yīng)的分界點(diǎn)為臨床臨界值，其橫縱坐標(biāo)值即為此時(shí)的靈敏度和特異度，結(jié)果表明，當(dāng)血清HSP90α＞82.25 ng/ml、血清CA-724＞7.02 U/ml時(shí)，具有臨床診斷意義（靈敏度71.3%，特異性71.2%）。見(jiàn)圖1、表5。

圖1 血清HSP90α聯(lián)合CA-724表達(dá)的ROC曲線

表5 胃癌患者血清HSP90α、CA-724的ROC曲線下面積

3 討論

近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，熱休克蛋白在癌癥患者身體中通常以高水平表達(dá)［13-14］。Lee等［12］研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Hsp90α高水平表達(dá)與腫瘤大小、腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、淋巴管浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期顯著相關(guān)，且與胃癌患者的疾病進(jìn)展和較差的生存率有關(guān)，可作為預(yù)測(cè)胃癌預(yù)后的生物學(xué)標(biāo)志物。本研究的結(jié)果表明，與健康對(duì)照組比較，胃癌組患者血清HSP90α水平明顯升高（P＜0.05），提示HSP90α過(guò)度表達(dá)可能是胃癌患者生存的不良預(yù)后因素。這些發(fā)現(xiàn)與早期研究的結(jié)果一致，后者表明HSP90過(guò)度表達(dá)在不同類(lèi)型的癌癥中均是不良的預(yù)后因素［15-16］。

HSP可以調(diào)節(jié)許多關(guān)鍵的凋亡因子，有研究指出在多種癌癥組織中HSP90α含量水平較高，可能是因其參與了腫瘤細(xì)胞新生血管生成、癌細(xì)胞的增殖、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和死亡相關(guān)［17］。此外，還有研究指出，缺氧時(shí)細(xì)胞內(nèi)的Hsp90含量水平表達(dá)增強(qiáng)，缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）作為Hsp90的底物可參與多種基因轉(zhuǎn)錄激活，促進(jìn)血管的再生成并誘導(dǎo)細(xì)胞對(duì)缺氧的適應(yīng)，使腫瘤細(xì)胞適應(yīng)存活，增加腫瘤細(xì)胞對(duì)組織的侵襲性，容易發(fā)生轉(zhuǎn)移［18］。近期國(guó)內(nèi)開(kāi)展了許多療效監(jiān)測(cè)試驗(yàn)研究，其結(jié)果均表示對(duì)各種癌癥患者血HSP90α含量進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，可分析出其濃度變化與疾病病情變化的相關(guān)性，HSP的抑制可促進(jìn)癌癥的成功治療的結(jié)局［17，19-21］。本研究結(jié)果表示與治療前相比，癌癥組患者治療后血清HSP90α含量水平下降，提示本研究的化療方案可有效降低HSP90α含量水平，其原因可能是因?yàn)樵摶煼桨缚山档虷SP90α水平，抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管的再生，抑制腫瘤細(xì)胞的生成。此外，還可能因?yàn)镠SP90介導(dǎo)了許多條腫瘤信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，尤其是HSP90的減少可抑制表皮生長(zhǎng)因子受體通路，對(duì)多種癌癥的治療中有十分重要的價(jià)值［22］。

本研究結(jié)果表示胃癌患者血清HSP90α含量水平顯著高于健康人群，且ROC曲線結(jié)果顯示，血清HSP90α區(qū)別健康人群和胃癌患者的曲線下面積0.712，表明血清HSP90α具有中等胃癌診斷價(jià)值。之前報(bào)道也認(rèn)為，HSP90α在化療前后檢測(cè)值呈現(xiàn)顯著變化，證明HSP90α對(duì)胃癌化療后動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)具有一定的價(jià)值［19-21］。過(guò)去研究已證實(shí)，CA-724含量水平的升高也與腫瘤分期，腫瘤深度，淋巴結(jié)受累情況和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。但是本研究結(jié)果顯示血清CA-724曲線下面積是0.620，HSP90α在胃癌ROC曲線下的面積高于CA-724，則可認(rèn)為HSP90α單獨(dú)檢測(cè)時(shí)的診斷效力優(yōu)于CA-724。近期Hu等［5］研究納入了健康受試者（n=757），發(fā)現(xiàn)普通人群中CA-724的陽(yáng)性率較低（7.2%）；同時(shí)相比于早期胃癌患者而言，晚期患者體內(nèi)CA-724含量水平檢測(cè)的靈敏度和特異性會(huì)更高［2］。這是因?yàn)榘┘?xì)胞中的CA-724抗原不會(huì)在早期釋放到循環(huán)中，而可能會(huì)隨著淋巴管或靜脈被癌細(xì)胞侵襲而進(jìn)入循環(huán)。因此，CA-724用于評(píng)估癌細(xì)胞侵襲程度方面很有價(jià)值，但是它不適合作為健康人群中癌癥的篩查工具。隨著胃癌的早期篩查及輔助診斷工作的開(kāi)展，過(guò)去很多研究均表示單一腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的靈敏度較低，臨床預(yù)期往往較低，從而提出更多地采用聯(lián)合檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物的方法來(lái)提高早期胃癌的檢出率［22-25］。本研究結(jié)果顯示了HSP90α與CA-724聯(lián)合檢測(cè)曲線下面積最大，優(yōu)于二者分別單項(xiàng)檢測(cè)，因此可推薦聯(lián)合HSP90α和CA-724用于胃癌在高危人群中的篩查，對(duì)胃癌進(jìn)行早期診斷具有明確臨床價(jià)值。

綜上所述，血清HSP90α表達(dá)與胃癌診斷、胃癌患者化療效果評(píng)價(jià)相關(guān)性較大，且胃癌患者血清HSP90α、CA-724含量水平呈高表達(dá)狀態(tài)，血清HSP90α單獨(dú)檢測(cè)與兩者聯(lián)合檢測(cè)均有一定診斷效能。