何義

山東省曹縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東菏澤 274400

肺炎鏈球菌感染是全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題，據(jù)世界衛(wèi)生組統(tǒng)計(jì)，全球每年約有120萬(wàn)人因肺炎鏈球菌感染性疾病而死亡。肺炎鏈球菌感染通常會(huì)引起肺炎、腦膜炎、菌血癥等，臨床致死率較高，尤其是對(duì)于學(xué)齡前兒童及老年人[1]。1965年，美國(guó)首次提出青霉素耐藥肺炎鏈球菌（PRSP），后期全球各地不斷出現(xiàn)PRSO感染病例，以兒童群體居多，這為臨床治療帶來(lái)較大困難。1980年，美國(guó)肺炎鏈球菌青霉素耐藥性均屬于低水平耐藥，耐藥率小于5.00%。1990年時(shí)，青霉素耐藥率升高到17.00%，如今已高于30.00%。由此可見(jiàn)，準(zhǔn)確掌握肺炎鏈球菌臨床特點(diǎn)、血清分型與耐藥性，對(duì)肺炎鏈球菌感染后期防治具有重要作用。鑒于此，該文對(duì)該院2019年4月—2020年4月收治的120例患者展開(kāi)探討?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院收治的120例患者作為該次研究對(duì)象，其中男72例，女58例；年齡5～80歲，平均（42.16±3.47）歲。該次研究經(jīng)該院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),所選患者、家屬均了解且認(rèn)同該次研究,并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 研究材料、試劑 左氧氟沙星（國(guó)藥準(zhǔn)字H33021415）、萬(wàn)古霉素（國(guó)藥準(zhǔn)字H30222295）、四環(huán)素（國(guó)藥準(zhǔn)字H51020049）、紅霉素（國(guó)藥準(zhǔn)字H50021705）、克林霉素 （國(guó)藥準(zhǔn)字H20067875）、苯唑西林 （國(guó)藥準(zhǔn)字H20067209）、利福平（國(guó)藥準(zhǔn)字H44022114）、復(fù)方新諾明 （國(guó)藥準(zhǔn)字H41023726）、奎奴普汀 （國(guó)藥準(zhǔn)字J20040031）、利奈唑胺（國(guó)藥準(zhǔn)字H20150035），青霉素G藥敏試片；肺炎鏈球菌分離培養(yǎng)基選用血瓊脂平板，5%脫纖維綿羊血選用水解酪蛋白瓊脂平板，膽鹽溶菌，菊糖微量生化管。

1.2.2 標(biāo)本收集、細(xì)菌鑒定 依據(jù)臨床相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施樣本收集、處理及運(yùn)送。結(jié)合菌落特點(diǎn)，挑出可疑菌落，實(shí)施革蘭染色、膽鹽溶菌試驗(yàn)、糖發(fā)酵試驗(yàn)、Optochin試驗(yàn)、。

1.2.3 血清分型 以莢膜腫脹分型方法開(kāi)展肺炎鏈球菌血清分型，油鏡下查看試驗(yàn)結(jié)果。陽(yáng)性判定結(jié)果：莢膜漲起，菌體周邊薄厚不一，邊界清晰，存在無(wú)色環(huán)狀物。

1.2.4 藥敏試驗(yàn) 選用含有5%脫纖維綿羊血M-H平板，以0.5麥?zhǔn)蠁挝蛔鳛榫簼舛瓤刂茦?biāo)準(zhǔn)；在5%二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)（35℃）孵育24 h，參照美國(guó)臨床與實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）修訂的M100-S24標(biāo)準(zhǔn)對(duì)藥敏試驗(yàn)結(jié)果敏感性進(jìn)行判斷，以1μg苯唑西林檢測(cè)其青霉素敏感性，對(duì)青霉素低于19 mm菌株施用E-test檢測(cè)，明確青霉素最低抑菌水平，而后判斷其對(duì)青霉素敏感度。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察120例患者分離株臨床特點(diǎn)、血清分型結(jié)果、對(duì)不同藥物敏感性及耐藥性情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料的表達(dá)方式為[n(%)]，采用 χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 120株肺炎鏈球菌臨床特點(diǎn)分析

120株肺炎鏈球菌大多為呼吸道標(biāo)本，其中，咽與痰試子標(biāo)本分離共104株菌株，占總體86.67%，血培養(yǎng)分離10株，占8.33%，膿液標(biāo)本6株，占5.00%。120株肺炎鏈球菌中92株 （76.67%）為兒科，28株（23.33%）為非兒科；其中，8歲以下患兒81例（67.50%），9～60歲患者12例（10.00%），60歲以上患者27例（22.50%）。

2.2 120株肺炎鏈球菌血清分型結(jié)果分析

120株肺炎鏈球菌以23F、19F血清型居多，分別占31.67%、20.83%。見(jiàn)表1。

表1 120株肺炎鏈球菌血清分型結(jié)果

2.3 120株肺炎鏈球菌對(duì)不同藥物敏感性分析

萬(wàn)古霉素、利奈唑胺及左氧氟沙星對(duì)肺炎鏈球菌敏感性最高，分別占100.00%、100.00%、98.33%。見(jiàn)表2。

表2 120株肺炎鏈球菌對(duì)不同抗菌藥物敏感性分析（%）

2.4 不同科室肺炎鏈球菌耐藥率分析

兒科青霉素耐藥率和非兒科相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。除青霉素外，兒科、非兒科肺炎鏈球菌對(duì)其他藥物耐藥率相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。 見(jiàn)表3。

表3 不同科室肺炎鏈球菌耐藥率比較[n(%)]

3 討論

肺炎鏈球菌最初是在1881年于狂犬病患兒唾液內(nèi)提取而出，30.00%兒童與10.00%正常健康成人上呼吸道內(nèi)均可提取到該種病菌。該病通常分布于鼻咽部，一般條件下不致病。當(dāng)免疫能力降低時(shí)，可在局部發(fā)生感染，如急性鼻竇炎、急性中耳炎、扁桃體炎、肺炎等非侵入性疾病，也有一些菌經(jīng)黏膜抵達(dá)血液引起最初無(wú)感染位置感染，譬如骨髓炎、腦膜炎、菌血癥等侵入性疾病，其致死率能達(dá)到20.00%。肺炎鏈球菌感染性疾病多見(jiàn)于兒童、老年人與體弱者。

該研究中，經(jīng)對(duì)120例患者菌體分離發(fā)現(xiàn)，肺炎鏈球菌多為呼吸道感染，其中，咽與痰試子標(biāo)本檢出率為86.67%，血培養(yǎng)檢出8.33%；感染者多為兒童，以8歲以下群體為主，占67.50%。由此可見(jiàn)，肺炎鏈球菌感染以呼吸道感染居多，好發(fā)于兒童群體。

目前，臨床上用于肺炎鏈球菌血清分型的方法較多，該研究應(yīng)用的為常規(guī)血清分型，即依照莢膜成分提出不同抗血清。研究中，120株肺炎鏈球菌以23F與19F居多，分別占31.67%、20.83%。王樂(lè)雨等[2]對(duì)河北省肺炎鏈球菌血清型情況展開(kāi)研討，結(jié)果顯示：血清型主要有19F（9.3%）、14（18.2%）、6A/6B（11.4%）、19A（10.2%），而23F僅占5.7%。陳素菜等[3]研究中報(bào)道，肺炎鏈球菌血清分型以19A（32.56%）、19F（23.26%）、23F（13.95%）居多。 可見(jiàn)肺炎鏈球菌血清分型存在一定地域差異性。27株無(wú)法進(jìn)行分型，出現(xiàn)該種現(xiàn)象的原因可能和菌株無(wú)莢膜存在關(guān)聯(lián)。另外，由于肺炎鏈球菌接種率的增高，也可能會(huì)出現(xiàn)新的血清型。

對(duì)青霉素而言，肺炎鏈球菌耐藥性發(fā)生機(jī)制為細(xì)菌細(xì)胞壁上青霉素融合蛋白基因出現(xiàn)變異，進(jìn)而致使肺炎鏈球菌抗生素親和力下降，最終發(fā)生耐藥性[4-5]。國(guó)內(nèi)肺炎鏈球菌分離有較強(qiáng)地域性和實(shí)踐性，再加之我國(guó)肺炎鏈球菌分離率較低，并因各醫(yī)院各地區(qū)應(yīng)用抗菌藥方式不同，近幾年來(lái)臨床對(duì)肺炎鏈球菌的青霉素耐藥性相關(guān)報(bào)道也有著明顯差異。該研究中，肺炎鏈球菌的青霉素耐藥率為63.33%。目前，臨床上借助青霉素防治肺炎鏈球菌感染已超過(guò)于50年，而對(duì)青霉素治療失敗案例的相關(guān)報(bào)道也隨之增多。故而，臨床上對(duì)肺炎鏈球菌的青霉素敏感性判斷標(biāo)準(zhǔn)做出相應(yīng)改進(jìn)[6-7]。

當(dāng)前，國(guó)內(nèi)肺炎鏈球菌首要耐藥問(wèn)題為高度耐大環(huán)內(nèi)酯藥物，從目前被監(jiān)控的10種常見(jiàn)抗菌藥物而言，還未發(fā)現(xiàn)對(duì)利奈唑胺、萬(wàn)古霉素耐藥菌株。另外，肺炎鏈球菌對(duì)奎奴普汀、左氧氟沙星耐藥性也較低，分別為2.50%、1.67%，這提示以上藥物均可當(dāng)作臨床肺炎鏈球菌治療常規(guī)藥物[8-10]。

因兒童組織器官尚未發(fā)育程度，抗生素的不合理應(yīng)用易造成其體內(nèi)正常菌落破壞，特別對(duì)于新生兒而言。故而，兒童所用抗菌藥物方式和成人存在顯著差別。該研究中，除青霉素之外，兒科與非兒科常用抗菌藥物耐藥率相似，這表示患者抗菌藥物應(yīng)用方式不會(huì)明顯影響到肺炎鏈球菌耐藥性。但在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，還應(yīng)結(jié)合患者和具體情況，合理選擇給藥方案[11-12]。

綜上所述，面對(duì)當(dāng)今肺炎鏈球菌耐藥日益突出的問(wèn)題，臨床上應(yīng)不斷增強(qiáng)肺炎鏈球菌分離能力，注意監(jiān)測(cè)其耐藥性抗原變化，并施以其耐藥機(jī)制研究，以發(fā)現(xiàn)、控制耐藥菌株。