尹小波 趙靖 劉菲菲 羅坤 牛春密 王曉杰 田祺 石珊珊 宋麗英 徐淑鳳

秦皇島市第一醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)一科 066000

Periostin又稱(chēng)為成骨細(xì)胞特異性因子2，是一種細(xì)胞外基質(zhì)分泌性蛋白，其在骨組織中呈高表達(dá)，并與心臟發(fā)育和心臟疾病密切相關(guān)[1]。研究發(fā)現(xiàn)，Periostin在多種腫瘤實(shí)體或細(xì)胞系中呈高表達(dá)，如肺癌、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌等[2-3]。Periostin通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活、遷移、侵襲及血管生成，從而增強(qiáng)腫瘤轉(zhuǎn)移能力，提示其可能成為腫瘤診斷及治療新的靶點(diǎn)[4]。研究發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者血清Periostin水平增高，有可能作為腫瘤轉(zhuǎn)移和術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)指標(biāo)[5]。本研究通過(guò)檢測(cè)NSCLC患者血清Periostin的表達(dá)水平，分析其與肺癌臨床病理特征的關(guān)系，進(jìn)一步探討其在肺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 一般資料 前瞻性研究。選取2018年4月至2019年11月在秦皇島市第一醫(yī)院收治的50例NSCLC患者作為肺癌組。其中，男38例，女12例；年齡(61.4±10.3)歲，年齡范圍為45～74歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有患者經(jīng)影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，最終病理學(xué)確診為NSCLC；(2)術(shù)前未行放化療或其他生物免疫治療；(3)經(jīng)秦皇島市第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(2020B021)，患者知情同意，自愿參加。50例NSCLC患者中，鱗癌21例，腺癌29例；根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟2009年修訂的肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)(第七版)進(jìn)行分期：Ⅰ～Ⅱ期13例，Ⅲ～Ⅳ期37例；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移11例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移39例。

肺部良性病變患者20例，其中男13例，女7例；年齡(58.6±8.2)歲，年齡范圍為31～67歲；肺炎球菌性肺炎8例，肺炎克雷伯菌肺炎6例，支氣管擴(kuò)張5例，支原體肺炎1例。

另選取同期健康體檢者20名作為正常對(duì)照組，其中男13名，女7名；年齡(57.3±12.4)歲，年齡范圍為32～68歲。3組性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集受試者空腹靜脈血3 ml，500×g離心15 min，取上清液并標(biāo)記，在-80℃冰箱保存，集中待測(cè)。

1.2.2 血清Periostin檢測(cè) 人Periostin酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒購(gòu)自北京易科攀搏生物科技有限公司。采用酶聯(lián)免疫吸附法，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以x-±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)法；繪制受試者工作特征曲 線(receiver operating characteristic curve，ROC)，計(jì)算出曲線下面積(area under the curve，AUC)，以約登指數(shù)最大值對(duì)應(yīng)的檢測(cè)值作為截?cái)嘀?，?jì)算敏感度和特異度。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清Periostin水平比較 3組血清Periostin水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=21.157，P＜0.01)；進(jìn)一步兩兩比較，肺癌組血清Periostin水平高于肺部良性病變組(P＜0.01)和正常對(duì)照組(P＜0.01)，肺部良性病變組略高于正常對(duì)照組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)圖1。

圖1 3組血清Periostin水平比較

2.2 血清Periostin與NSCLC臨床病理特征的關(guān)系 肺癌組血清Periostin水平與腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P值均＜0.05)，與性別、年齡、分化程度、病理類(lèi)型無(wú)關(guān)(P值均＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 血清Periostin水平與NSCLC臨床病理特征的關(guān)系(±s)

表1 血清Periostin水平與NSCLC臨床病理特征的關(guān)系(±s)

項(xiàng)目 例數(shù) Periostin水平(mg/L) t值 P值年 齡 0.379 0.706≥60歲 27 35.45±10.50＜60歲 23 34.34±10.02性 別 0.560 0.248男31 33.63±10.93女19 37.08±8.72病理類(lèi)型 0.701 0.487鱗癌 21 36.13±11.94腺癌 29 34.08±8.84分化程度 0.844 0.403高分化 20 36.43±12.07中低分化 30 33.94±8.81 TNM分 期 2.095 0.042Ⅰ～Ⅱ期 13 30.01±9.96Ⅲ～Ⅳ期 37 36.67±9.82淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 3.340 0.002無(wú)11 26.69±4.85有39 37.27±10.12腫瘤大小 2.968 0.005≥3 cm 34 37.66±10.08＜3 cm 16 29.15±7.94

2.3 血清Periostin診斷肺癌的效能 血清Periostin診 斷 肺 癌 的AUC為0.880(95%CI：0.812～0.949，P＜0.001)，當(dāng) 截 斷 值 為27.84 mg/L時(shí)，敏感度和特異度分別為78%和85%。見(jiàn)圖2。

圖2 血清Periostin診斷肺癌的受試者工作特征曲線

3 討論

肺癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率高[6]。肺癌主要分為小細(xì)胞肺癌與NSCLC兩大類(lèi)型，85%新診斷肺癌為NSCLC，15%為小細(xì)胞肺癌[7]。由于大部分肺癌患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬晚期，因此喪失了手術(shù)切除的機(jī)會(huì)，而只能接受放化療等治療[8]。盡管醫(yī)療技術(shù)不斷發(fā)展，但NSCLC患者的5年生存率仍不到15%[6]。由于NSCLC患者預(yù)后不良，因此，尋找新的血清生物標(biāo)志物或治療靶點(diǎn)，從而早期發(fā)現(xiàn)診斷、及時(shí)治療，對(duì)于改善患者預(yù)后具有重要的意義。

研究顯示，Periostin在炎癥微環(huán)境如哮喘、動(dòng)脈粥樣硬化、肺間質(zhì)纖維化，以及腫瘤的發(fā)展中起著重要的作用，在炎癥及腫瘤中表達(dá)水平增高[9-10]。研究證實(shí)，Periostin與整合蛋白相結(jié)合，激活A(yù)kt/PKB和FAK介導(dǎo)的信號(hào)通路，延長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞生存時(shí)間，促進(jìn)血管生成，腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移[11]。提示Periostin可能與腫瘤的惡性程度、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。Periostin參與腫瘤的發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚。研究發(fā)現(xiàn)，Periostin基因沉默的人類(lèi)肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞表現(xiàn)出細(xì)胞增殖減少，對(duì)順鉑化療敏感性升高，同時(shí)降低了細(xì)胞侵襲能力[12]。Periostin通過(guò)激活Stat3和Akt，上調(diào)存活素表達(dá)，增強(qiáng)了A549細(xì)胞的順鉑耐藥性[13]。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化是腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制，研究證實(shí)，Periostin可通過(guò)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)A549細(xì)胞增殖和遷移，Periostin是上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的標(biāo)志，同時(shí)也是高致瘤性細(xì)胞促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的一個(gè)特征[14]。

早期的研究證實(shí)，正常健康的肺組織存在Periostin表達(dá)，而在肺癌組織其表達(dá)水平增高[15-16]。有研究報(bào)道，通過(guò)質(zhì)譜分析在肺腺癌惡性胸腔積液中有Periostin表達(dá)，并且在NSCLC中血清Periostin表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照，為闡明NSCLC發(fā)病機(jī)制、篩選其早期診斷標(biāo)志物提供有益的思路[17]。本研究發(fā)現(xiàn)，肺癌組血清Periostin水平明顯高于肺部良性病變組和正常對(duì)照組，肺部良性病變組略高于正常對(duì)照組(P值均＜0.05)，與蔡三立和劉剛[5]研究報(bào)道相一致。說(shuō)明，Periostin在腫瘤環(huán)境下表達(dá)水平增高。因此，Periostin可能參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。

目前已有的研究對(duì)血清Periostin水平與NSCLC臨床病理特征的關(guān)系尚無(wú)一致的結(jié)論。Murakami等[18]研究發(fā)現(xiàn)，血清Periostin水平在NSCLC與正常對(duì)照之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且與性別、腫瘤分期、骨轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)，但術(shù)后4周血清Periostin水平明顯降低，血清Periostin水平是NSCLC患者獨(dú)立的預(yù)后因素。蔡三立和劉剛[5]研究顯示，NSCLC患者血清Periostin水平與年齡、性別、病理類(lèi)型及病理分級(jí)無(wú)關(guān)，與TNM分期、腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)，術(shù)后復(fù)發(fā)患者血清Periostin水平明顯高于未復(fù)發(fā)患者。Soltermann等[16]研 究 發(fā) 現(xiàn)，Periostin水 平 是NSCLC無(wú)進(jìn)展生存率的預(yù)后因子，與組織學(xué)類(lèi)型、TNM分期、腫瘤大小、血管浸潤(rùn)及性別有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，肺癌組血清Periostin水平與腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P值均＜0.05)。以上研 究表明，血清Periostin水 平 與NSCLC患者的惡性程度、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)，在肺癌的發(fā)生、發(fā)展中起到重要的作用。Xu等[17]研究報(bào)道，NSCLC患者的血清Periostin水平高于健康對(duì)照組和肺部良性病變患者，當(dāng)截?cái)嘀禐?0.87 mg/L，區(qū)分NSCLC和肺部良性病變的敏感度和特異度為48.6%和91.7%，區(qū)分NSCLC患者和健康對(duì)照組的敏感度和特異度為97.5%和51.4%。Kaplan-Meier分析顯示，高血清Periostin水平組無(wú)進(jìn)展生存期和總生存期更低。Cox回歸分析表明，血清Periostin是NSCLC患者預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果顯示，血清Periostin診 斷肺癌的AUC為0.880，截?cái)?值 為27.84 mg/L時(shí)，敏感度和特異度分別為78%和85%，具有良好的診斷價(jià)值。推測(cè)，血清Periostin可被視為NSCLC患者的診斷和預(yù)后標(biāo)志物。

綜上所述，NSCLC患者血清Periostin水平增高，與NSCLC腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。血清Periostin作為新的腫瘤標(biāo)志物對(duì)于肺癌具有良好的診斷價(jià)值，可用于判斷肺癌惡性程度、轉(zhuǎn)移傾向和預(yù)后。本研究不足之處在于單中心研究，且樣本量偏小，不可避免對(duì)結(jié)果產(chǎn)生一定的偏倚，對(duì)于部分肺癌手術(shù)患者未能進(jìn)行手術(shù)前后血清Periostin的比較。未來(lái)的研究工作將進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，分析其對(duì)肺癌的診斷價(jià)值，并進(jìn)行隨訪，比較復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者血清Periostin的差異，并分析對(duì)生存時(shí)間的影響，從而闡明其在預(yù)后判斷的價(jià)值。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突