劉漢起，譚艷玲，高淑平，陳桂茹，周欣瀅，袁衛(wèi)維，林善群

陽春市人民醫(yī)院檢驗中心1、病理科2、婦科3，廣東 陽春 529600

宮頸癌的病死率較高，盡早診斷對于患者預(yù)后改善有積極作用。液基薄層細胞學(xué)(TCT)檢查取樣方便，可定期復(fù)查，圖像較傳統(tǒng)抹片更清晰，能夠早期診斷宮頸癌和其癌前病變，降低宮頸癌發(fā)生率及死亡率，現(xiàn)已廣泛用于宮頸癌的篩查[1]。但有研究發(fā)現(xiàn)，TCT檢查容易受到主觀判定的影響，有一定漏診率[2]。既往研究認(rèn)為，高危型人乳頭瘤病毒病毒(HPV)持續(xù)感染和宮頸癌的發(fā)病有關(guān)[3]。HPV感染能夠刺激HPVE6、E7的表達，E6/E7 mRNA能夠引起細胞周圍紊亂，增加惡性腫瘤發(fā)生風(fēng)險[4]。E6/E7 mRNA的轉(zhuǎn)錄水平能夠反映癌基因E6、E7情況，以評價機體HPV感染情況[5]。本研究旨在分析E6/E7 mRNA聯(lián)合TCT檢查在宮頸癌早期診斷中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年6月至2020年12月廣東省陽春市人民醫(yī)院婦科收治的300例高危型HPV DNA陽性患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：性生活史大于3年；無盆腔相關(guān)治療史；高危型HPV DNA陽性，均接受E6/E7 mRNA及TCT及陰道鏡病理組織活檢；生殖道無急慢性炎癥；非妊娠、哺乳或經(jīng)期婦女；排除傳染性疾病和其他惡性腫瘤者。300例患者年齡30～55歲，平均(44.38±3.56)歲；孕次0～6次，平均(3.57±0.34)次；產(chǎn)次0～4次，平均(2.16±0.25)次；經(jīng)陰道鏡宮頸病理組織活檢確診慢性宮頸炎患者192例，CΙNⅠ級46例，CΙNⅡ級30例，CΙNⅢ級17例，宮頸癌15例。

1.2 方法

1.2.1 HPVE6/E7 mRNA檢測 患者取膀胱結(jié)石位，暴露宮頸，用宮頸脫落細胞專用采樣刷采集細胞并放置在取樣瓶內(nèi)。檢測HPV E6/E7 mRNA表達情況，依據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行HPVE6/E7 mRNA陰性及陽性判定[6]。

1.2.2 TCT檢測 患者取膀胱結(jié)石位，暴露宮頸，用宮頸脫落細胞專用采樣刷采集細胞并放置在含有保存液的新柏氏細胞學(xué)測試瓶內(nèi)，并進行相關(guān)檢測。按照貝塞斯達系統(tǒng)分類法[6]對檢測結(jié)果進行分類，其中低度鱗狀上皮內(nèi)病變、高度鱗狀上皮內(nèi)病變、鱗狀細胞癌(SCC)為TCT檢測陽性。

1.2.3 病理活檢 用陰道鏡采集可疑病灶組織，送至病理科活檢。診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)制定的分類標(biāo)準(zhǔn)[6]，其中宮頸上皮內(nèi)瘤變CΙNⅠ、CΙNⅡ、CΙNⅢ、SCC為病理活檢陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

HPV E6/E7 mRNA診斷宮頸癌的特異度高于TCT，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；TCT診斷的靈敏度高于HPV E6/E7 mRNA，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，HPV E6/E7 mRNA與TCT診斷的準(zhǔn)確率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；HPV E6/E7 mRNA聯(lián)合TCT診斷的特異度、靈敏度及準(zhǔn)確率明顯高于HPV E6/E7 mRNA、TCT單獨檢查，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 HPV E6/E7 mRNA、TCT單獨與聯(lián)合檢測診斷宮頸癌的特異度、靈敏度及準(zhǔn)確率比較(%)

3 討論

流行病學(xué)報道，臨床分期和宮頸癌患者預(yù)后有直接關(guān)系[7]，早期宮頸癌的生存率顯著高于中晚期，盡早診治是改善此類患者預(yù)后的關(guān)鍵[8]。

宮頸細胞學(xué)涂片檢查在宮頸癌及癌前診斷中有重要作用，傳統(tǒng)巴氏涂片的質(zhì)量較差，細胞丟失率和假陰性率高，臨床開展受到限制。TCT檢查為目前最常用的宮頸癌細胞學(xué)檢查，可減少涂片中黏液、炎癥細胞及紅細胞等影響，增加閱片視野清晰度，減少誤診及漏診可能性[9]。TCT較傳統(tǒng)巴氏涂片更為標(biāo)準(zhǔn)及嚴(yán)格，可提高診斷準(zhǔn)確性。但有研究發(fā)現(xiàn)，CΙN及宮頸癌多為局灶性、多中心的病理變化，TCT的取材存在局限性，采集細胞量不足，從而影響TCT檢查的準(zhǔn)確性[10]。另有研究認(rèn)為，TCT為人工閱片，有較強的主觀性[11]。

目前研究已表明持續(xù)高危型HPV感染為宮頸癌前病變和宮頸癌發(fā)生的危險因素，但研究指出，大部分女性新發(fā)HPV感染能夠在兩年內(nèi)自行消退，和宮頸癌的發(fā)生無密切聯(lián)系[12]。HPV DNA分型檢測的特異度相對較低，假陽性率高，導(dǎo)致過度治療及不必要的隨訪。E6、E7蛋白能夠參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展，E6、E7蛋白可加快細胞分裂，影響細胞凋亡，導(dǎo)致細胞永生化，從而發(fā)生宮頸癌前病變及宮頸癌[13]。E6、E7蛋白又可引起HPV發(fā)生免疫逃逸，促進細胞增殖，誘導(dǎo)宮頸細胞發(fā)生惡性病變。HPV E6/E7 mRNA為癌基因E6、E7轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，其可評價癌基因活性，有研究認(rèn)為，HPV E6/E7 mRNA能夠作為評價宮頸癌風(fēng)險的有效指標(biāo)[14]。舒小芳等[15]研究也表明，HPV E6/E7 mRNA和宮頸病變的相關(guān)性較HPV DNA更強，能夠預(yù)測宮頸病變進展情況。有文獻報道，HPV E6、E7能夠降低機體免疫功能[16]。HPV E6/E7 mRNA陰性提示機體未HPV感染，或者HPV為初始感染，進展可能性較低。HPV E6/E7 mRNA陽性提示機體存在HPV感染，且為活躍期，HPV病毒癌基因已經(jīng)發(fā)生整合，并出現(xiàn)轉(zhuǎn)錄翻譯，且拷貝數(shù)越高，癌基因活性更強，宮頸癌發(fā)生風(fēng)險越高[17]。本研究以陰道下活檢為金標(biāo)準(zhǔn)，觀察發(fā)現(xiàn)，TCT及HPV E6/E7mRNA單獨檢查的準(zhǔn)確率與病理結(jié)果比較相對較低，和有關(guān)文獻報道相符[18]。

近年來有研究報道，HPV E6/E7 mRNA聯(lián)合TCT檢查能夠提高宮頸癌的檢出率[19]。陳瑛瑛等[20]研究也發(fā)現(xiàn)，HPV E6/E7 mRNA聯(lián)合TCT檢查能夠反映細胞形態(tài)改變，起到互補作用，降低宮頸病變的漏診率，并可預(yù)測宮頸病變進展情況。本研究中，HPV E6/E7 mRNA在早期宮頸癌診斷中的特異度較TCT高，靈敏度較TCT檢測低，HPV E6/E7 mRNA聯(lián)合TCT檢測的特異度、靈敏度及準(zhǔn)確率顯著高于單獨HPV E6/E7 mRNA、TCT檢測，進一步表明兩種方式聯(lián)合檢測能夠彌補單項檢測存在的不足，提高宮頸癌診斷的特異度及靈敏度，為早期宮頸癌的診斷提供參考依據(jù)，并可避免假陽性所致的過度治療。但二者聯(lián)合檢測的準(zhǔn)確率與病理組織活檢比較仍有差異，表明二者聯(lián)合仍無法取代病理組織活檢，但可作為早期宮頸癌篩查的有效手段。另有研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后E6/E7mRNA聯(lián)合TCT檢測在隨訪宮頸癌前病變和宮頸癌復(fù)發(fā)中有重要作用，對預(yù)后監(jiān)測及臨床隨診有較高的指導(dǎo)價值[21]。但本研究未對患者進行隨訪監(jiān)測，E6/E7 mRNA、TCT在宮頸病變預(yù)后中的作用有待進一步研究。

綜上所述，HPV E6/E7 mRNA聯(lián)合TCT檢查能夠提高早期宮頸癌診斷的靈敏度和特異度。