宋為娟，楊瑞霞(南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)學(xué)部，南京 210029)

克羅恩病(Crohn disease，CD)是一種病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確的慢性特發(fā)性腸道炎癥疾病，其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢[1-4]，具有病程長、病情難控制、緩解期和活動(dòng)期反復(fù)交替等特點(diǎn)[5-6]。及時(shí)評(píng)估患者疾病的活動(dòng)度，有助于緩解病情，改善預(yù)后。腸鏡檢查和病理活檢是評(píng)估病情較準(zhǔn)確的方法，但屬于有創(chuàng)檢查，患者依從性差，不利于病情監(jiān)測。因此,尋找一種非侵入性、可靠的分子標(biāo)志物來動(dòng)態(tài)監(jiān)測CD的活動(dòng)度十分重要。

鈣衛(wèi)蛋白是一種鈣、鋅結(jié)合蛋白，來源于中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，其表達(dá)具有組織或細(xì)胞特異性，可作為急性炎性細(xì)胞活化的標(biāo)志物[7]。近年來，有研究報(bào)道糞鈣衛(wèi)蛋白(feces calprotection, FC)在炎癥性腸病中的應(yīng)用價(jià)值[8-9]。但FC與疾病活動(dòng)性、病變部位關(guān)系的研究較少見。本研究回顧性分析了FC與CD患者腸道黏膜炎癥程度、病變部位的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1臨床資料 選取2018年3月至2020年4月南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院CD確診患者128例，中位年齡29.0歲，男性87人，女性41人。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)臨床病理學(xué)和內(nèi)鏡檢查，均符合2010年世界胃腸病學(xué)組關(guān)于炎癥性腸病診斷和治療的實(shí)踐指南中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[10]。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)無FC檢測記錄和臨床資料不完整者；(2)結(jié)直腸癌、息肉患者；(3)感染性腸炎和診斷不明確的非典型腸炎；(4)有結(jié)腸切除病史和近期服用阿司匹林或非甾體抗炎藥的患者；(5)原發(fā)性免疫缺陷病等其他慢性病患者；(6)合并其他感染性疾病或全身感染、合并免疫功能障礙、糖尿病、嚴(yán)重心臟疾病或肝臟疾病患者；(7)妊娠患者。128例克羅恩患者中，回腸病變者68例，結(jié)腸病變者15例，回結(jié)腸病變者45例。用簡化克羅恩病活動(dòng)指數(shù)(CDAI)評(píng)估疾病活動(dòng)性[11]，分為緩解期87例，輕度活動(dòng)期34例，中度活動(dòng)期7例。用簡化克羅恩病內(nèi)鏡嚴(yán)重程度指數(shù)(CDEIS)評(píng)估腸壁炎癥病變嚴(yán)重程度[12]，分為輕度炎癥24例、中度炎癥59例和重度炎癥45例。本病歷資料回顧性研究已獲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)免知情同意。

1.2觀察指標(biāo) 記錄入院后首次檢查數(shù)據(jù)，包括結(jié)腸鏡檢查、FC、WBC計(jì)數(shù)、血紅蛋白(Hb)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血沉(ESR)、清蛋白(Alb)水平。

1.3試劑和儀器 糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法，瑞士Buhlmann公司)，CRP檢測試劑(美國Beckman Coulter公司)；酶聯(lián)儀(美國Thermo公司)，IMMAGE 800特定蛋白分析儀、全自動(dòng)血液分析儀及配套試劑、AU5800全自動(dòng)生化分析儀及配套Alb檢測試劑(美國Beckman Coulter公司)，TEST1全自動(dòng)快速血沉分析儀(意大利ALIFAX公司)。

1.4方法 患者于腸鏡檢查前一天，采集糞便樣本，按試劑盒說明書處理標(biāo)本并檢測FC。同步進(jìn)行血液樣本的采集和各種指標(biāo)的測定。用酶聯(lián)免疫法檢測FC，在IMMAGE 800特定蛋白分析儀上檢測CRP，用全自動(dòng)血液分析儀及配套試劑測定血常規(guī)，用全自動(dòng)快速血沉分析儀測定ESR，用AU5800全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑測定Alb。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS 20.0軟件進(jìn)行。計(jì)量資料以中位數(shù)(25分位數(shù)，75分位數(shù))[M(P25，P75)]表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，多組間比較采用Kruskal-WallisH檢驗(yàn)。采用Spearman檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1CD患者FC水平與炎癥程度的關(guān)系 不同炎癥程度克羅恩病患者隨著腸內(nèi)炎癥程度的升高，F(xiàn)C水平逐漸升高。重度炎癥組、中度炎癥組FC水平均高于輕度炎癥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.364、-2.441，P均<0.05)，重度炎癥組FC水平高于中度炎癥組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.420，P=0.155)。見表1。

表1 不同炎癥程度克羅恩病患者糞鈣衛(wèi)蛋白水平

2.2不同病變部位CD患者FC水平的變化 回結(jié)腸病變組FC水平顯著高于回腸病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.261，P=0.001)。結(jié)腸病變組FC水平高于回腸病變組，回結(jié)腸病變組FC水平高于結(jié)腸病變組，但差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同病變部位克羅恩病患者糞鈣衛(wèi)蛋白水平

2.3不同疾病活動(dòng)程度各指標(biāo)水平比較 隨著疾病活動(dòng)程度的加重，F(xiàn)C、PLT、CRP、ESR逐漸增加(P<0.05)，Hb、Alb逐漸減少(P<0.05)。中度活動(dòng)期患者的FC水平顯著高于緩解期(Z=-2.772，P=0.006)，輕度活動(dòng)期PLT水平顯著高于緩解期(Z=2.762，P=0.006)，中度活動(dòng)期PLT水平顯著高于緩解期(Z=3.514，P=0.000)和輕度活動(dòng)期(Z=-2.183，P=0.029)，中度活動(dòng)期CRP水平顯著高于緩解期(Z=2.184，P=0.029)，中度活動(dòng)期ESR顯著高于緩解期(Z=3.760，P=0.000)和輕度活動(dòng)期(Z=3.431，P=0.001)，輕度活動(dòng)期的Alb顯著低于緩解期(Z=3.896，P=0.000)，中度活動(dòng)期的Alb顯著低于緩解期(Z=3.486，P=0.000)和輕度活動(dòng)期(Z=2.027，P=0.043)。見表3。

表3 不同疾病活動(dòng)程度患者各指標(biāo)水平[M(P25，P75)]

2.4FC與血清學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性研究 Spearman相關(guān)分析顯示，F(xiàn)C與CRP(r=0.481)、ESR(r=0.428)、PLT(r=0.480)呈正相關(guān)，與WBC呈弱正相關(guān)(r=0.231)，相關(guān)性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；FC與Alb(r=-0.485)、Hb(r=-0.389)呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。

3 討論

鈣衛(wèi)蛋白是一種炎性蛋白，且鈣衛(wèi)蛋白在糞便中穩(wěn)定存在，可作為反映腸道炎癥的一個(gè)指標(biāo)，多項(xiàng)研究表明FC在CD診療中的價(jià)值[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著炎癥程度的升高，F(xiàn)C水平也隨之升高。因此，F(xiàn)C可作為反映克羅恩病患者腸道黏膜炎癥程度的無創(chuàng)指標(biāo)。CD患者在病程監(jiān)測過程中，如FC持續(xù)升高，可提示臨床該患者病情發(fā)生變化，需及時(shí)進(jìn)行治療。此外，結(jié)腸病變的患者FC水平顯著高于回腸病變者，F(xiàn)C也可提示CD患者的病變部位。FC水平和CD患者的病變部位、腸道黏膜的炎癥程度密切相關(guān)，其作為一個(gè)無創(chuàng)的指標(biāo)，在CD患者的整個(gè)病程中發(fā)揮重要作用，有望減少患者腸鏡檢查的次數(shù)，減輕患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

同時(shí)，本研究分析了FC與血清學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性，克羅恩病患者FC與CRP呈正相關(guān)。CRP是一種急性時(shí)相蛋白，可介導(dǎo)和促進(jìn)炎癥反應(yīng)，為炎癥的診斷和活動(dòng)性評(píng)價(jià)提供有價(jià)值的信息。一些研究表明，CD患者治療前CRP水平往往較高，這可能與炎癥活動(dòng)有關(guān)[14-15]。這在一定程度上說明FC水平也反映了克羅恩病患者炎癥的嚴(yán)重程度。此外，F(xiàn)C作為腸道炎癥指標(biāo)，與PLT計(jì)數(shù)、ESR呈正相關(guān)，與WBC計(jì)數(shù)呈弱相關(guān)，與Alb、Hb呈負(fù)相關(guān)。WBC計(jì)數(shù)和ESR也是炎癥指標(biāo)，在CD的診斷和治療過程中，F(xiàn)C、WBC和ESR可以聯(lián)合評(píng)價(jià)克羅恩病患者的炎癥程度。隨著CD患者炎癥程度的增加，腸道的營養(yǎng)吸收功能變差，CD患者血清Alb水平降低，膿液和血便增多，導(dǎo)致Hb的損失。炎癥程度引起PLT計(jì)數(shù)增多的機(jī)制尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。

在納入本研究的樣本中，F(xiàn)C與CD的疾病活動(dòng)程度有關(guān)。中度活動(dòng)期的FC、PLT、CRP、ESR顯著高于輕度活動(dòng)期和緩解期，輕度活動(dòng)期的FC、PLT、CRP、ESR水平高于緩解期,證明FC在判斷疾病活動(dòng)程度中具有重要作用。

總之，F(xiàn)C是客觀反映克羅恩病患者局部腸道炎癥的理想指標(biāo)，可用于疾病活動(dòng)性的輔助評(píng)估,有利于克羅恩病療效的提高。