文/王宏 王慶龍

為更好地保護(hù)瀕危魚(yú)類厚唇裸重唇魚(yú)，本文作者開(kāi)展人工催產(chǎn)、孵化和苗種培育關(guān)鍵技術(shù)的研究。結(jié)果表明，采用兩次注射法進(jìn)行人工激素注射能夠使雌魚(yú)催產(chǎn)效率達(dá)到76.5%，受精卵經(jīng)過(guò)210h開(kāi)始破膜，孵化所需積溫2310℃·h，在苗種培育方面采用肥水發(fā)塘方法培育開(kāi)口餌料能夠取得較好效果。

厚唇裸重唇魚(yú)（Gymnodiptychus pachycheilus）又稱“石花魚(yú)”，屬鯉形目，鯉科，裂腹魚(yú)亞科，裸重唇魚(yú)屬，分布在長(zhǎng)江和黃河上游干流及其附屬支流中。厚唇裸重唇魚(yú)肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美，是黃河上游土著魚(yú)類中的珍品，曾是黃河上游瑪曲段主要的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類。

近年來(lái)，由于棲息地環(huán)境變化和過(guò)度捕撈等原因，導(dǎo)致厚唇裸重唇魚(yú)資源遭到破壞，資源量急劇減少，加上其自身生長(zhǎng)緩慢、性成熟晚等特性，現(xiàn)有分布區(qū)域已經(jīng)逐漸縮小到人煙罕至的高原草甸深處。2007年，厚唇裸重唇魚(yú)被列入甘肅省重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物名錄，2021年被列入國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物名錄，保護(hù)級(jí)別為二級(jí)。

為了更好地保護(hù)厚唇裸重唇魚(yú)這一瀕危魚(yú)類，有必要開(kāi)展相關(guān)人工繁殖試驗(yàn)。本文探討了厚唇裸重唇魚(yú)的人工繁殖和苗種培育等環(huán)節(jié)的技術(shù)難點(diǎn)，為厚唇裸重唇魚(yú)資源保護(hù)提供技術(shù)支持。

一、材料與方法

（一）親本培育與挑選

于2010年在黃河上游支流洮河采集200多尾厚唇裸重唇魚(yú)作為后備親魚(yú)，在虹鱒成魚(yú)養(yǎng)殖池中進(jìn)行人工馴化，經(jīng)過(guò)多年馴化，基本能夠食用人工配合顆粒飼料。2020年5月開(kāi)始挑選親魚(yú)，選擇體質(zhì)強(qiáng)健、魚(yú)體光滑、完整無(wú)傷、性腺已充分成熟、體重在1.5kg以上的個(gè)體作為親本。雌魚(yú)選擇腹部膨大柔軟，生殖孔紅潤(rùn)的個(gè)體，雄魚(yú)選擇臀鰭有追星，輕壓腹部有精液流出的個(gè)體。共挑選出親魚(yú)28尾，其中雌魚(yú)17尾，雄魚(yú)11尾。雌雄親魚(yú)暫養(yǎng)在不同的培育缸中，水深保持70cm，水溫為12℃，進(jìn)水口流量為0.02m3/s。暫養(yǎng)期間不投喂飼料。

（二）人工催產(chǎn)

在暫養(yǎng)第三日上午10:00開(kāi)始人工催產(chǎn)工作。催產(chǎn)激素選用地歐酮（DOM）和絨毛膜促性腺激素（HCG），雌魚(yú)分兩次注射，第一次注射劑量按每千克魚(yú)體重5mg DOM+600IU HCG，第二次注射劑量按10mg DOM+200IU HCG，兩次間隔24h。雄魚(yú)注射劑量按照每千克魚(yú)體重5mg DOM +200 IU HCG，注射時(shí)間與雌魚(yú)第二次注射時(shí)間相同。將激素用0.9%的生理鹽水稀釋后采用胸腔注射。每隔2d檢查一次親魚(yú)排卵排精情況。

（三）人工授精與孵化

采用人工干法授精。首先用浸水?dāng)Q干后的毛巾將雌雄親魚(yú)的泄殖孔周圍和臀鰭擦干，用手由前向后輕輕擠壓腹部，將精子和卵子同時(shí)擠入盆中，用軟毛刷攪拌均勻后，加入少量清水再輕輕攪拌1min。接著再加入清水進(jìn)行緩慢攪拌和漂洗，清洗掉多余精液和雜質(zhì)。靜置20min后，將其移入套有40目篩絹的虹鱒孵化槽進(jìn)行孵化。在孵化槽中保持受精卵呈單層排列，保持微流水，受精卵不隨水流移動(dòng)，孵化水溫在11℃左右，孵化室保持遮光狀態(tài)，防止陽(yáng)光直射到受精卵上。每隔2d采用聚維酮碘消毒，及時(shí)挑出死卵，防止滋生水霉，降低出苗率。在孵化過(guò)程中定期觀察胚胎發(fā)育狀況，并記錄受精卵的死亡數(shù)等。

（四）苗種培育

厚唇裸重唇魚(yú)受精卵從受精到破膜共需210h，在破膜后7d左右，卵黃囊基本吸收完畢，能平穩(wěn)游動(dòng)。將虹鱒成魚(yú)池改建為微流水池，面積為60m2，進(jìn)水量為0.05L/s，底質(zhì)為塊石泥沙，水源為溪流水，進(jìn)水采用80目篩絹過(guò)濾，保持水深約80cm。放苗前一周采用發(fā)酵雞糞肥水。將第一批約9萬(wàn)尾仔魚(yú)放入培育池中，每池投放3萬(wàn)尾，采用豆?jié){化水連續(xù)潑灑3d，每天上午和下午各投喂一次。之后視水質(zhì)情況潑灑豆?jié){。2個(gè)月后輔助投喂虹鱒微粒子飼料。定期加水、排水，使水質(zhì)保持相對(duì)穩(wěn)定。每日觀察記錄魚(yú)苗的吃食情況和生長(zhǎng)情況。將第二批約5萬(wàn)尾上浮仔魚(yú)移入圓形培育缸中，培育缸直徑1.5m，水深70cm，每個(gè)缸放養(yǎng)約5000尾，采用人工孵化的鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體做為魚(yú)苗開(kāi)口餌料，每天投喂5次，統(tǒng)計(jì)魚(yú)苗的成活率。

二、結(jié)果與分析

（一）人工催產(chǎn)效果

厚唇裸重唇魚(yú)雄魚(yú)在繁殖季節(jié)具有明顯的第二性征，臀鰭末端有倒鉤，在臀鰭條上出現(xiàn)珠星，尾鰭末端變成暗紅色，輕壓腹部有白色精液流出。雌魚(yú)腹部變軟，明顯突出體側(cè)。在注射催產(chǎn)激素后，第3d檢查共有10尾雌魚(yú)能夠產(chǎn)卵，7尾雄魚(yú)都能夠擠出精液，但是只有4尾精液較多。第5d檢查出3尾雌魚(yú)可產(chǎn)卵，并挑選出2尾雄魚(yú)。第7d之后再未挑出產(chǎn)卵雌親魚(yú)，但有1尾雄魚(yú)精液數(shù)量較多。剩余4條雌魚(yú)盡管腹部柔軟，但是未能產(chǎn)卵，此次雌魚(yú)的催產(chǎn)率為76.5%。催產(chǎn)的雄魚(yú)都能排出精液，但是由于在未注射催產(chǎn)激素前挑選雄魚(yú)時(shí)，全部雄魚(yú)已經(jīng)能夠擠出精液，只是精液數(shù)量較少，因此只統(tǒng)計(jì)排出精液較多的7尾雄魚(yú)，雄魚(yú)的催產(chǎn)率為63.6%。親魚(yú)催產(chǎn)情況如表1所示。

表1 厚唇裸重唇魚(yú)親魚(yú)催產(chǎn)情況

（二）人工授精與孵化

受精卵呈淡黃色，吸水膨脹后直徑約3.8mm。兩批次獲得魚(yú)卵29萬(wàn)粒，在原腸胚期檢驗(yàn)兩批魚(yú)卵的受精率分別為75%和80%，第二批的受精率要高于第一批。受精卵經(jīng)過(guò)210h開(kāi)始破膜，孵化所需積溫2310℃·h，初孵仔魚(yú)全長(zhǎng)約9mm。破膜后約15d，仔魚(yú)開(kāi)始上浮。第一批上浮仔魚(yú)約9萬(wàn)尾，第二批上浮仔魚(yú)約5萬(wàn)尾，兩個(gè)批次的孵化率分別為45%和55.6%，見(jiàn)表2。

表2 厚唇裸重唇魚(yú)苗種培育情況

（三）苗種培育

6月15日將第一批9萬(wàn)尾水花平均分入3個(gè)池塘，至9月1日拉網(wǎng)計(jì)數(shù)，歷經(jīng)75d的培育，3個(gè)池塘共培養(yǎng)厚唇裸重唇魚(yú)夏花魚(yú)種3.5萬(wàn)尾，魚(yú)苗平均體長(zhǎng)3.6cm，體重為0.49g，苗種平均成活率38.9%。苗種成活率較低，主要是因?yàn)?號(hào)池排水口篩絹網(wǎng)堵塞，水體不交換，造成水質(zhì)過(guò)肥，魚(yú)苗暴發(fā)氣泡病導(dǎo)致死亡，2號(hào)池收獲夏花苗種0.3萬(wàn)尾。第二批5萬(wàn)尾水花平均分入5個(gè)培育缸中，投喂鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體2個(gè)月后，繼續(xù)分池到8個(gè)培育缸中。受雨季的影響，水源容易變渾濁，導(dǎo)致暴發(fā)纖毛蟲(chóng)病，纖毛蟲(chóng)主要寄生在鰓絲上。需及時(shí)采用濃度為250ppm～300ppm甲醛進(jìn)行藥浴，連續(xù)3d可控制。同樣在9月1日進(jìn)行打樣稱重，第二批成活苗種數(shù)量為2.1萬(wàn)尾，平均體長(zhǎng)3.5mm，平均體重為0.33g。

三、討論

（一）催產(chǎn)激素種類和催產(chǎn)方式對(duì)人工繁殖的影響

根據(jù)親魚(yú)的外部表現(xiàn)挑選親魚(yú)，不同年齡個(gè)體的性腺發(fā)育程度有差別。在人工催產(chǎn)過(guò)程中，首先要促進(jìn)卵的發(fā)育，使成熟卵發(fā)育到排卵階段。注射DOM和HCG的主要作用是促進(jìn)卵的發(fā)育，DOM能促進(jìn)處于第IV期初的性腺，快速達(dá)到IV期末，能極大改善親魚(yú)早期催產(chǎn)的效果，尤其是在早期水溫偏低時(shí)的人工催產(chǎn)活動(dòng)中更適用。注射第一針DOM和HCG激素并經(jīng)過(guò)一段效應(yīng)期后，注射第二針加強(qiáng)催產(chǎn)，結(jié)果顯示取得了良好效果，雌魚(yú)催產(chǎn)效率達(dá)到76.5%。厚唇裸重唇魚(yú)作為一種冷水性魚(yú)類，注射激素后的效應(yīng)期較長(zhǎng)，達(dá)到48h，有必要就其催產(chǎn)素劑量配比、效應(yīng)時(shí)間等開(kāi)展進(jìn)一步的研究工作。雄魚(yú)在繁殖期多數(shù)能夠達(dá)到性成熟，排出精液，但大部分個(gè)體排出的精液數(shù)量較少。經(jīng)過(guò)催產(chǎn)后，多數(shù)個(gè)體能夠排出精液，并且能夠多次參與繁殖活動(dòng)，并使受精率達(dá)到75%以上。未受精卵主要受催產(chǎn)后排出卵發(fā)育程度不足或精液質(zhì)量影響。

（二）孵化期間科學(xué)管理對(duì)孵化率的影響

本試驗(yàn)的第一批受精卵孵化率為45%，推測(cè)是水質(zhì)和水霉病降低了孵化率。孵化期間為雨季，孵化用水混濁，加上孵化水流較緩，部分泥沙堵塞了孵化槽的過(guò)水孔，造成孵化用水在孵化槽中流動(dòng)不均勻，或者部分泥沙黏附在受精卵表面，導(dǎo)致受精卵缺氧死亡。冷水性魚(yú)類的孵化時(shí)間較長(zhǎng)，孵化水溫低，適宜水霉菌生長(zhǎng)，如果在孵化過(guò)程中，不及時(shí)挑出死卵，水霉菌就會(huì)大量滋生，影響健康卵的成活。為提高厚唇裸重唇魚(yú)的孵化率，應(yīng)加強(qiáng)孵化期間的管理。

（三）魚(yú)苗開(kāi)口技術(shù)

破膜仔魚(yú)的卵黃囊將要耗盡時(shí)，開(kāi)始由內(nèi)源營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)為外源營(yíng)養(yǎng)，此時(shí)需要及時(shí)投喂。絕大多個(gè)體開(kāi)始上浮游動(dòng)時(shí)就要進(jìn)行開(kāi)口餌料的投喂。本試驗(yàn)采用了兩種培育方法。一種是采用肥水發(fā)塘技術(shù)培育浮游生物進(jìn)行開(kāi)口。水花投放后，水體中適宜開(kāi)口餌料是浮游生物中的輪蟲(chóng)，通過(guò)前3d的水體調(diào)控來(lái)培育輪蟲(chóng)是水花培育的關(guān)鍵。由于采用了虹鱒成魚(yú)池改建的培育池，水溫低，水中的藻類和輪蟲(chóng)出現(xiàn)高峰期較慢，而在后期培育過(guò)程中，池壁青苔生長(zhǎng)旺盛，水面漂浮物較多，影響了魚(yú)苗的生存和生長(zhǎng)。要及時(shí)采用人工撈取的方法來(lái)控制青苔，減少其對(duì)魚(yú)苗的影響。在水花培育期間，要保持微流水，及時(shí)清除進(jìn)排水口篩絹上的污物，減少因管理不當(dāng)造成的魚(yú)苗死亡。第二種方式是采用人工投喂鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體。前1d將鹵蟲(chóng)卵在合適的水溫下進(jìn)行孵化，期間采用充氣石充氧，24h～48h后利用鹵蟲(chóng)的趨光性收集無(wú)節(jié)幼體，然后采用虹吸法投喂厚唇裸重唇魚(yú)仔魚(yú)，每天投喂5次～6次，每次持續(xù)1h。這期間能清楚地看到仔魚(yú)在餌料投喂口附近聚集。采用鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體進(jìn)行開(kāi)口，能很好地解決厚唇裸重唇魚(yú)仔魚(yú)開(kāi)口問(wèn)題，成活率較高。在后期打樣過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，培育缸中的仔魚(yú)體重低于培育池中的仔魚(yú)，這可能因魚(yú)苗還未完全適應(yīng)人工配合飼料。比較這兩種方法，采用鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體作為開(kāi)口餌料，人工耗費(fèi)比較大，培育缸缸底要及時(shí)進(jìn)行清理，但是成活率較高；采用肥水發(fā)塘的方法培育開(kāi)口餌料比較省時(shí)省力，但是日常管理比較重要。