于秀敏，彭 飛，于淑玉，高笑鐸，王秀平*

(1 河北科技師范學院 a農(nóng)學與生物科技學院，b 河北省板栗產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，河北 秦皇島, 066000；2 河北明德立達農(nóng)業(yè)科技有限公司)

長柄鏈格孢菌(Alternarialongipes)和膠孢炭疽菌(GlomerellacingulataSpauld.& H.Schrenk)是引起板栗內(nèi)腐病的主要致病菌[1～3]。苯醚甲環(huán)唑、咪鮮胺、唑醚戊唑醇、精甲噁霉靈、嘧霉異菌脲、異菌氟啶胺是目前農(nóng)業(yè)上常用的殺菌劑，具有高效、安全、低毒、較強廣譜性的特點，本試驗選擇上述6種殺菌劑采用菌絲生長速率法對長柄鏈格孢菌和膠孢炭疽菌進行室內(nèi)毒力測定。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1供試病原菌 長柄鏈格孢菌(Alternarialongipes)和膠孢炭疽菌(GlomerellacingulataSpauld.&H.Schrenk)購于北納創(chuàng)聯(lián)生物技術有限公司，并將病菌于馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)上培養(yǎng)，用于菌絲生長速率測定試驗。

1.1.2供試藥劑 供試6種殺菌劑，藥劑名稱、生產(chǎn)廠家及試驗質(zhì)量濃度(藥劑濃度均為有效成分含量)見表1。

表1 6種殺菌劑生產(chǎn)廠家及試驗濃度

1.2 測定方法

采用菌絲生長速率法[4]進行毒力測定。根據(jù)預試驗結果，將藥品配制成試驗母液，按照系列稀釋的方法，通過濃度初篩試驗確定適宜的濃度比范圍(表 1)，并以此濃度加入到熔化好的PDA培養(yǎng)基中，充分混勻后將其倒入9 cm直徑的一次性培養(yǎng)皿中，制成含系列濃度藥劑的 PDA平板(以加入等量無菌水的處理作為對照)。將活化好的供試菌株在無毒PDA培養(yǎng)基上25 ℃培養(yǎng)7 d后，在菌落邊緣取直徑為1 cm的菌餅，接種于不同處理的含藥和空白平板中央，在25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中光照培養(yǎng)6 d，每個處理5皿，3次重復。采用十字交叉法，測量菌落直徑做好記錄并計算抑菌率。

菌絲生長抑制率=[(對照菌落直徑-菌餅直徑)-(處理菌落直徑-菌餅直徑)]/(對照直徑-菌餅直徑)×100%

用DPSv 7.05和Excel 2003進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，計算出有效抑制中濃度EC50值，以此值來表示供試殺菌劑對兩種病菌的抑制作用強弱。

2 結果與分析

2.1 6種殺菌劑對長柄鏈格孢菌菌絲生長速率的影響

6種殺菌劑對長柄鏈格孢菌分別表現(xiàn)出不同的抑制作用，且抑制效果差異較大。其中25%咪鮮胺和40%異菌·氟啶胺對長柄鏈格孢菌菌絲生長具有較強的抑制作用，EC50分別為0.963 5 mg·L-1和1.599 0 mg·L-1。且25%咪鮮胺的抑菌效果最佳，是最優(yōu)的農(nóng)藥制劑選擇。其他4種殺菌劑抑菌效果由高到低依次為30%唑醚·戊唑醇、40%嘧霉·異菌脲、10%苯醚甲環(huán)唑、32%精甲·惡霉靈(表2)。

表2 6種殺菌劑對長柄鏈格孢菌菌絲生長的抑制效果

2.2 6種殺菌劑對膠孢炭疽菌菌絲生長速率的影響

6種殺菌劑對膠孢炭疽菌菌絲生長均有不同的抑制作用，6種殺菌劑中25%咪鮮胺和40%異菌·氟啶胺對膠孢炭疽菌的抑制效果明顯，EC50分別為0.117 5 mg·L-1和0.511 5 mg·L-1，30%唑醚·戊唑醇懸浮劑的抑制作用也較明顯，EC50值為2.328 5 mg·L-1，32%精甲·惡霉靈水分散粒劑抑菌作用最差，它們的EC50值是95.936 8 mg·L-1，表3。

表3 6種殺菌劑對膠孢炭疽菌菌絲生長的抑制效果

3 結論與討論

本次試驗應用 6 種殺菌劑，分別測定了不同濃度的藥劑對長柄鏈格孢菌和膠孢炭疽菌菌絲的抑制作用。從結果可以看出：6種殺菌劑中25%咪鮮胺和40%異菌·氟啶胺對兩種病菌的抑制效果最好，30%唑醚·戊唑醇和10%苯醚甲環(huán)唑效果較好，而32%精甲·惡霉靈和40%嘧霉·異菌脲對兩種病菌效果較差。

據(jù)報道，板栗內(nèi)腐病病菌從6月中旬栗花授粉期開始侵入板栗花柱和栗苞，8月中旬以后侵入的病菌數(shù)量逐漸增多，但在近成熟期病菌才侵入種仁[5]。因此，可在板栗授粉前(5月底～6月上旬)和授粉之后(6月下旬～7月上旬)，利用以上效果較好的4種殺菌劑進行噴霧處理，并注意輪換交替使用，可做到有效的抑制引起板栗內(nèi)腐病的長柄鏈格孢菌和膠孢炭疽菌的生長，起到預防板栗內(nèi)腐病的發(fā)生及延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生。在6種藥劑中，咪鮮胺通常作為果品保鮮劑，在板栗儲存于運輸過程中，還可將咪鮮胺用于板栗保鮮劑，用于板栗儲存期間內(nèi)腐病的防治。依據(jù)本次試驗結果，下一步可開展田間藥效試驗，為板栗生產(chǎn)篩選有效藥劑，預防板栗內(nèi)腐病的發(fā)生。