胡馨月，張 維，趙 行，李若敏，周 振，劉 冰，張夢雪，盤賽昆,2,3,4,

(1.江蘇海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，江蘇連云港 222005；2.江蘇省海洋生物技術(shù)重點(diǎn)建設(shè)實(shí)驗(yàn)室，江蘇連云港 222005；3.江蘇省海洋生物資源與環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)，江蘇連云港 222005；4.江蘇省海洋資源開發(fā)研究院，江蘇連云港 222005)

沙光魚(Synechogobius hasta)，學(xué)名“矛尾復(fù)蝦虎魚”，屬蝦虎魚科，分布于太平洋西北部、中國、日本和韓國海域[1-2]，在連云港市沿海分布廣，沙光魚肉質(zhì)細(xì)膩、口感柔潤嫩滑，營養(yǎng)豐富，深受消費(fèi)者的喜愛[3]，有“十月沙光賽羊湯”之說[4]。新鮮沙光魚的蛋白質(zhì)和水分含量高，組織蛋白酶的活性較強(qiáng)，捕獲后魚體易死亡，容易腐敗變質(zhì)，不易貯藏，保鮮難度大[5-6]。市場多以鮮售為主，多在每年的秋季和冬季，不能滿足顧客全年消費(fèi)的需求，也影響了沙光魚作為連云港特產(chǎn)的推廣和產(chǎn)業(yè)鏈的發(fā)展。因此，需要加強(qiáng)沙光魚保鮮相關(guān)技術(shù)的研究，延長貨架期。

水產(chǎn)品常用的保鮮方法為凍藏保鮮，一般采用的凍結(jié)方式有空氣凍結(jié)、鼓風(fēng)凍結(jié)、浸漬凍結(jié)等[7]。在凍結(jié)過程中，冰晶的形成會造成肌肉的機(jī)械損傷，發(fā)生一系列化學(xué)反應(yīng)，如脂肪氧化、鮮度變化、蛋白質(zhì)冷凍變性等現(xiàn)象，嚴(yán)重影響凍品的品質(zhì)和營養(yǎng)價(jià)值[5]。研究發(fā)現(xiàn)，水產(chǎn)品的凍藏品質(zhì)與凍結(jié)方式、凍結(jié)速率有關(guān)[8-9]。Cai等[10]發(fā)現(xiàn)-55 ℃凍結(jié)日本鱸的品質(zhì)優(yōu)于-18 ℃凍結(jié)；胡亞芹等[9]研究發(fā)現(xiàn)液氮速凍比傳統(tǒng)凍結(jié)方式能更好地保持帶魚的品質(zhì)；Boonsumrej等[11]比較了斑節(jié)對蝦液氮浸漬凍結(jié)和鼓風(fēng)凍結(jié)的品質(zhì)，發(fā)現(xiàn)液氮浸漬凍結(jié)能更好地維持斑節(jié)對蝦的品質(zhì)。液氮無色、無味、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定是一種理想的制冷劑[12]。具有凍結(jié)時(shí)間短、品質(zhì)好、干耗少、雜菌少、無污染等優(yōu)點(diǎn)，已變成食品領(lǐng)域環(huán)保冷凍技術(shù)研究的熱點(diǎn)[9,13]。液氮速凍能大大降低冰晶對組織結(jié)構(gòu)的破壞，解凍后較好地保持食品原有的色、香、味[14]。目前，國內(nèi)外已廣泛應(yīng)用液氮速凍于水產(chǎn)品和其他食品的保鮮[15]。研究不同凍結(jié)方式對水產(chǎn)品凍藏期間品質(zhì)的變化，有利于企業(yè)選擇合適的凍結(jié)方式，保證水產(chǎn)品的品質(zhì)。對于不同凍結(jié)方式對沙光魚凍藏品質(zhì)的影響研究還未見報(bào)道。

本文以沙光魚為原料，采用三種凍結(jié)方式(-80 ℃液氮速凍、-40 ℃送風(fēng)凍結(jié)、-50 ℃靜止空氣凍結(jié))處理樣品并于-18 ℃冰箱貯藏，以TVBN值、K值、鹽溶性蛋白含量、Ca2+-ATP酶活、TBA值、蒸煮損失率為理化指標(biāo)結(jié)合冰晶形態(tài)和感官評價(jià)，研究不同凍結(jié)方式對冷凍沙光魚品質(zhì)的影響，探索沙光魚最佳的凍結(jié)方法，為沙光魚的保鮮提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

鮮活沙光魚 體重200～250 g，體長30～35 cm，采購于連云港市海州區(qū)菜市場；三氯乙酸、氯化鉀、鉬酸銨、米吐爾等試劑 均為分析純，國藥化學(xué)試劑有限公司。

DW- 40W100醫(yī)用低溫保存箱 青島海爾股份有限公司；ZY/SDG-100液氮速凍機(jī) 無錫中亞環(huán)境試驗(yàn)設(shè)備有限公司；JJ-2B高速組織搗碎機(jī) 金壇市天瑞儀器有限公司；TGL-16G高速臺式冷凍離心機(jī)上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司；TP9008U溫度記錄儀 深圳市拓普瑞電子有限公司；XSP-8CP生物顯微鏡 上海光學(xué)儀器廠；KD-BM生物組織包埋機(jī) 浙江金華市益迪醫(yī)療設(shè)備有限公司；YD-1508B石蠟切片機(jī) 浙江金華市益迪醫(yī)療設(shè)備有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 凍結(jié)方法 將新鮮沙光魚用水沖洗干凈并瀝干，隨機(jī)分為3組。分別進(jìn)行如下凍結(jié)處理[16]，靜止空氣凍結(jié)：將沙光魚置于-50 ℃冰箱中進(jìn)行凍結(jié)；送風(fēng)凍結(jié)：將沙光魚置于-40 ℃鼓風(fēng)凍結(jié)機(jī)中進(jìn)行凍結(jié)；液氮速凍：將沙光魚置于-80 ℃液氮速凍機(jī)中進(jìn)行凍結(jié)。將溫度探頭插入沙光魚中心位置，當(dāng)樣品的中心溫度達(dá)-18 ℃時(shí)取出，將凍結(jié)好的沙光魚裝入自封袋，封口，于-18 ℃冰箱中貯藏。每隔15 d隨機(jī)取樣品測定各項(xiàng)指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)周期為180 d。

1.3 指標(biāo)測定

1.3.1 凍結(jié)曲線的測定 將自動(dòng)溫度記錄儀探頭插入沙光魚中心部位，自動(dòng)記錄凍結(jié)過程中的溫度變化，繪制沙光魚的凍結(jié)曲線[5,17]。

1.3.2 蒸煮損失率的測定 稱取10.0 g樣品，85 ℃水浴鍋中蒸煮15 min后取出，冷卻至室溫，用濾紙擦拭樣品表面的水分，再次稱量。按式(1)計(jì)算蒸煮損失率[18]。

式中，m1—蒸煮前樣品的總質(zhì)量，g；m2—蒸煮后樣品的總質(zhì)量，g。

1.3.3 TVB-N測定 TVB-N值采用GB 5009.228-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》的方法測定。

1.3.4 TBA的測定 參照金枝等[19]的方法，取5.0 g魚肉加入20 mL 5%的三氯乙酸混合，均質(zhì)2 min，雙層濾紙過濾，取5 mL上清液，加入5 mL 0.02 mol/L的TBA溶液混合均勻，沸水浴反應(yīng)25 min，冷卻至室溫。在532 nm處測定吸光值，結(jié)果以mg/kg為單位。

1.3.5 K值的測定 稱取4.0 g魚肉，加入40 mL 10%高氯酸溶液，渦旋振蕩1 min，8500 r/min離心15 min，重復(fù)操作一次，合并上清液，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～6.4，定容至50 mL，8500 r/min離心15 min，0.22 μm微孔濾膜過濾，4 ℃保存[5]。

HPLC條件：色譜柱C18，柱溫為35 ℃；流速1.0 mL/min；流動(dòng)相為0.02 mol/L磷酸二氫鉀和0.02 mol/L磷酸氫二鉀鹽1∶1(V/V)的緩沖溶液(pH 6.0)；紫外檢測器，檢測波長254 nm；進(jìn)樣量為20 μL。

式中：K—次黃嘌呤核苷和次黃嘌呤之和與三磷酸腺苷及其分解物總量之比的百分率，%；ATP—三磷酸腺苷含量，μmol/g；ADP—二磷酸腺苷含量，μmol/g；AMP—磷酸腺苷含量，μmol/g；IMP—腺苷酸含量，μmol/g；HxR—次黃嘌呤核苷含量，μmol/g；Hx—次黃嘌呤含量，μmol/g；

1.3.6 鹽溶性蛋白含量的測定 參考王鳳玉[20]、趙峰等[21]的方法，稱取4.0 g魚肉，加入10倍量的0.2 mol/L KCl-20 mmol/L Tris-HCl緩沖液，勻漿1 min，4 ℃條件8500 r/min離心10 min，棄去上清液，以洗去樣品中的水溶性蛋白，重復(fù)操作3次。在沉淀中加入10倍量的0.5 mol/L KCl-20 mmol/L Tris-HCl緩沖液，浸提2 h，9000 r/min離心15 min，取上清液即為鹽溶性蛋白溶液，用雙縮脲法測定鹽溶蛋白含量。

1.3.7 Ca2+-ATPase活性的測定 在試管中加入1 mL酶液，0.3 mL Tris-maleate緩沖液，0.1 mol/L CaCl2溶液、3.18 mL蒸餾水和0.3 mL 20 mmol/L ATP溶液，25 ℃水浴中反應(yīng)5 min，加入1 mL 15% TCA終止反應(yīng)。用雙層濾紙過濾，在所得上清液采用鉬酸銨法測定反應(yīng)中釋放出來的無機(jī)磷含量[20,22]。

式中：A、B分別為反應(yīng)管和空白管生成的磷酸量(μmol)；t為反應(yīng)時(shí)間(min)；鹽溶蛋白質(zhì)量為1 mL反應(yīng)液所含的酶量(mg)。

1.3.8 感官評定 參考胡亞芹[9]的評定方法，選取10位經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的人員(男5女5，年齡20-30歲)組成感官評定小組，采用CSAS感官評定系統(tǒng)進(jìn)行感官描述檢測。將經(jīng)過不同凍結(jié)方式處理的沙光魚解凍清洗后，放在蒸籠上清蒸10 min。按照表1進(jìn)行評分，考察色澤、氣味、組織形態(tài)、肌肉彈性，采用加權(quán)平均法，色澤、氣味、組織形態(tài)、肌肉彈性各占系數(shù)0.3、0.3、0.2、0.2，滿分為10分，沙光魚感官綜合評分低于5分時(shí)，表示沙光魚到達(dá)貨架期，不再適合食用。

表1 沙光魚感官評價(jià)表Table 1 Sensory evaluation of Synechogobius hasta

1.3.9 冰晶觀察 將刀具提前預(yù)冷，取三種凍結(jié)方式處理的沙光魚的背部肌肉，順肌纖維方向切成5 mm×5 mm×3 mm大小，放入預(yù)冷的Carnoy固定液(體積比為6∶3∶1的無水乙醇、氯仿和冰醋酸)，-18 ℃固定24 h，新鮮的樣品放入4 ℃固定24 h。固定之后經(jīng)乙醇進(jìn)行脫水、石蠟包埋、切片、脫蠟、蘇木精-伊紅染色，顯微鏡觀察[23]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用SPSS 26.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用Graph Pad Prism 8軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 凍結(jié)曲線

沙光魚的凍結(jié)曲線如圖1所示分為三個(gè)階段，第一階段是冷卻階段，放出顯熱，降溫速凍快，靜止空氣凍結(jié)、送風(fēng)凍結(jié)和液氮速凍分別用了200、25、12 min。第二階段是最大冰晶生成帶區(qū)域0 ℃～-5 ℃，在此過程中大多數(shù)的水凍結(jié)成冰[24]，30 min之內(nèi)通過為快速凍結(jié)，超過為慢速凍結(jié)[25]。靜止空氣凍結(jié)、送風(fēng)凍結(jié)和液氮速凍通過0 ～-5 ℃的時(shí)間分別為：315、95和8.5 min，液氮速凍能快速通過最大冰晶生成帶，對組織結(jié)構(gòu)的破壞較小。第三階段，主要是凍結(jié)一些殘留的水分，顯熱和潛熱同時(shí)放出，降溫較快[8]。從圖1中可以看出，靜止空氣凍結(jié)和送風(fēng)凍結(jié)屬于慢速凍結(jié)，液氮速凍為快速凍結(jié)。結(jié)果表明，液氮速凍大大縮短了凍結(jié)時(shí)間，對沙光魚的品質(zhì)影響更小。

圖1 不同凍結(jié)方式下沙光魚凍結(jié)曲線Fig.1 Freezing curve of Synechogobius hasta under different freezing methods

2.2 不同凍結(jié)方式對沙光魚蒸煮損失率的影響

蒸煮損失率是評價(jià)肉制品持水力的指標(biāo)之一。肉的持水性直接影響肉的多汁性、營養(yǎng)成分、嫩度和色澤等食用品質(zhì)[26]。由圖2可知，新鮮沙光魚的蒸煮損失率為16.83%，有良好的持水能力。隨著貯藏時(shí)間的增長，三種凍結(jié)方式的蒸煮損失率均呈現(xiàn)上升趨勢。30 d內(nèi)三組的蒸煮損失率無顯著差異(P>0.05)。從60 d開始液氮組的蒸煮損失率顯著低于其他兩組(P<0.05)，180 d時(shí)液氮速凍、送風(fēng)凍結(jié)、靜止空氣凍結(jié)的蒸煮損失率分別為29.35%、35.68%、42.35%，三組存在顯著差異(P<0.05)。經(jīng)靜止空氣凍結(jié)處理的沙光魚的蒸煮損失率最大，可能因?yàn)閮鼋Y(jié)速度慢，形成了較大的不規(guī)則的冰晶，破壞了沙光魚的組織結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致魚肉持水力下降[16]。液氮速凍對沙光魚的蒸煮損失率影響最小，說明經(jīng)液氮速凍處理的沙光魚具有良好的持水能力。Inês等[27]研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)液氮速凍的凡納濱蝦其蒸煮損失率明顯降低，與本文結(jié)果一致。

圖2 不同凍結(jié)方式對沙光魚蒸煮損失率的變化Fig.2 The changes of cooking loss rate in Synechogobius hasta by different frozen methods

2.3 不同凍結(jié)方式對沙光魚TVB-N的影響

揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)是指具有揮發(fā)性的氨、二甲胺、三甲胺等與腐敗相關(guān)的堿性含氮化合物[28]。TVB-N是用于評價(jià)魚類新鮮程度的指標(biāo)，其值越低說明越新鮮。根據(jù)GB 10136-2016規(guī)定：TVB-N值≤15 mg/100 g為一級鮮度，二級鮮度≤20 mg/100 g，合格品≤30 mg/100 g。由圖3可知，新鮮沙光魚TVB-N值為7.25 mg/100 g，在貯藏過程中，三種凍結(jié)方式處理的沙光魚的TVB-N值均呈上升趨勢，前期增長速度較緩慢，30 d內(nèi)無顯著差異(P>0.05)。后期增長速度較快[9]，靜止空氣凍結(jié)組在第105 d的TVB-N值為16.73 mg/100 g，屬于二級鮮度，液氮速凍、送風(fēng)凍結(jié)分別為10.83、14.65 mg/100 g處于一級鮮度。180 d時(shí)液氮速凍、送風(fēng)凍結(jié)、靜止空氣凍結(jié)TVB-N值分別為13.15、18.84、24.02 mg/100 g，液氮組依然保持一級鮮度，送風(fēng)凍結(jié)組為二級鮮度，靜止空氣凍結(jié)組為合格品。結(jié)果表明液氮速凍更好地抑制TVB-N值的增長，可能是因?yàn)橐旱賰龅慕禍厮俣确浅？欤瑢?xì)胞造成的破壞較小[29]，呈現(xiàn)良好的保鮮效果。

圖3 不同凍結(jié)方式對沙光魚TVB-N的變化Fig.3 The changes of TVB-N value in Synechogobius hasta by different frozen methods

2.4 不同凍結(jié)方式對沙光魚TBA的影響

TBA值是評價(jià)肉制品脂肪氧化的重要指標(biāo)，脂肪氧化程度越嚴(yán)重，TBA值會越大[29]。一般研究認(rèn)為TBA 值超出2.0 mg/kg時(shí)，表明肉制品已變質(zhì)，不能再食用[15]。如圖4所示，隨著凍藏時(shí)間的延長，三種凍結(jié)方式處理的沙光魚TBA值均呈逐漸增長的趨勢。凍藏初期TBA值增長緩慢，在30 d內(nèi)三種凍結(jié)方式處理的樣品TBA值無顯著差異(P>0.05)。凍藏后期靜止空氣凍結(jié)組的TBA值上升速率最快，可能是凍結(jié)的速度慢，形成了較大的冰晶，對細(xì)胞的機(jī)械損傷較大，暴露在空氣中的損傷面積大，導(dǎo)致脂肪氧化程度較高[13]。180 d時(shí)液氮速凍、送風(fēng)凍結(jié)、靜止空氣凍結(jié)的TBA值分別為1.15、1.65、2.13 mg/kg，靜止空氣凍結(jié)組的TBA值已超出2.0 mg/kg，不宜食用，結(jié)果表明液氮速凍可以有效抑制沙光魚的脂肪氧化。

圖4 不同凍結(jié)方式對沙光魚TBA的變化Fig.4 The changes of TBA value in Synechogobius hasta by different frozen methods

2.5 不同凍結(jié)方式對沙光魚K值的影響

K值表示魚的新鮮程度的指標(biāo)之一，K值越小，說明越新鮮。K值20%以下為一級鮮度，20%～40%為二級鮮度，60%～80%為初期腐敗魚[14]。如圖5所示，隨著凍藏時(shí)間的增長，三種不同凍結(jié)方式的沙光魚的K值均呈上升趨勢。新鮮沙光魚的K值為8.30%，凍藏初期三組無顯著性差異(P>0.05)。60 d之后靜止空氣凍結(jié)的K值上升速度明顯高于其他兩組，到180 d時(shí)液氮速凍、送風(fēng)凍結(jié)、靜止空氣凍結(jié)的K值分別為19.78%、25.08%、32.12%，三組存在顯著性差異(P<0.05)。在整個(gè)凍藏期間液氮組的沙光魚為一級鮮度，結(jié)果表明液氮速凍能有效維持沙光魚的新鮮度，可以抑制ATP的降解?？赡苁且?yàn)橐旱賰龅募?xì)胞較為完整，造成的機(jī)械損傷較小，抑制了微生物的生長，在ATP分解初期抑制反應(yīng)，降低整體反應(yīng)速率[30]。

圖5 不同凍結(jié)方式對沙光魚K值的變化Fig.5 The changes of K value in Synechogobius hasta by different frozen methods

2.6 不同凍結(jié)方式對沙光魚鹽溶性蛋白含量的影響

鹽溶蛋白是評價(jià)魚肉蛋白質(zhì)冷凍變性的主要指標(biāo)之一，其變性會對魚肉加工特性產(chǎn)生很大的影響，其含量越低，表明蛋白質(zhì)變性越嚴(yán)重。隨著凍藏時(shí)間的延長，不同凍結(jié)方式的鹽溶性蛋白含量均呈下降的趨勢[29]。如圖6所示，新鮮沙光魚的含量為70.49 mg/g，在凍藏前60 d時(shí)靜止空氣凍結(jié)、送風(fēng)凍結(jié)、液氮速凍的鹽溶性蛋白含量分別為36.79、43.75、48.72 mg/g，比新鮮的鹽溶性蛋白降低了47.81%、37.93%、30.89%，凍藏后期與前60 d相比下降速度較為平緩。180 d時(shí)液氮速凍、送風(fēng)凍結(jié)、靜止空氣凍結(jié)的鹽溶性蛋白含量為21.24、26.77、35.66 mg/g，三組鹽溶性蛋白含量存在顯著差異(P<0.05)。在整個(gè)貯藏過程中，靜止空氣凍結(jié)下降的速度最快，其次為送風(fēng)凍結(jié)組，液氮組下降最慢?？赡苁怯捎诘鞍踪|(zhì)的部分結(jié)合水形成冰晶析出，導(dǎo)致肌動(dòng)球蛋白分子之間相互形成非共價(jià)鍵進(jìn)而形成超大分子的不溶性凝集，使肌動(dòng)球蛋白溶解性下降[31]。結(jié)果表明，液氮組的鹽溶性蛋白含量顯著高于其他兩組，說明液氮速凍能抑制蛋白質(zhì)變性，這與崔珺[31]對帶魚的研究結(jié)果一致。

圖6 不同凍結(jié)方式對沙光魚鹽溶性蛋白含量的變化Fig.6 The changes of salt soluble protein content in Synechogobius hasta by different frozen methods

2.7 不同凍結(jié)方式對沙光魚Ca2+-ATPase酶活性的影響

Ca2+-ATPase酶活性用于反映肌球蛋白的完整性，活性大小可以判斷魚肉中肌球蛋白的變性程度[32]，其活性越高，說明沙光魚的品質(zhì)越好。如圖7所示，隨著凍藏時(shí)間的延長，三種凍結(jié)方式處理的沙光魚的Ca2+-ATPase酶活性均呈下降趨勢。新鮮沙光魚的Ca2+-ATPase酶活性為0.355 μmol/min/mg，凍藏前期的下降速度較快，60 d時(shí)靜止空氣凍結(jié)、送風(fēng)凍結(jié)、液氮速凍Ca2+-ATPase酶活性分別為0.177、0.215、0.267 μmol/min/mg，分別下降了50.14%、39.44%、24.79%；60 d后下降較為平緩，180 d時(shí)，三組的酶活性分別為0.055、0.099、0.187 μmol/min/mg，存在顯著性差異(P<0.05)。整個(gè)貯藏過程中，靜止空氣凍結(jié)組的酶活力的下降速度最快，這可能是因?yàn)榧∏虻鞍椎那驙铑^部的構(gòu)象發(fā)生變化以及蛋白質(zhì)的凝聚造成了Ca2+-ATPase酶活性下降[15]。Xiong等[33]研究發(fā)現(xiàn)，草魚肉蛋白-18 ℃凍藏30 d Ca2+-ATPase活性降低了71.4%。結(jié)果表明，液氮組的Ca2+-ATPase酶活性高于其他兩組，可能是因?yàn)橐旱膬鼋Y(jié)速度快，冰晶細(xì)小且分布均勻，較好的保持了肌球蛋白的完整性。

圖7 不同凍結(jié)方式對沙光魚Ca2+-ATPase酶活性的變化Fig.7 The changes of Ca2+-ATPase enzyme activity in Synechogobius hasta by different frozen methods

2.8 不同凍結(jié)方式對沙光魚感官評價(jià)的影響

感官評價(jià)能夠直觀反映食品品質(zhì)，它是根據(jù)嗅覺、味覺、視覺、觸覺等特性進(jìn)行打分。通過打分的結(jié)果判斷食品品質(zhì)的優(yōu)劣。新鮮沙光魚組織完整，香味濃郁，肌肉富有彈性，初始的感官評分為10.0分。如圖8所示，隨著凍藏時(shí)間的延長，三種凍結(jié)方式處理的沙光魚的感官評分均呈下降趨勢。凍藏初期氣味、色澤與新鮮樣品差異不大，肌肉彈性較新鮮沙光魚略差。液氮組、送風(fēng)凍結(jié)組和靜止空氣凍結(jié)組的感官評分從開始的9.84、9.72、9.67分，下降到180 d的7.18、5.52、4.46分。液氮組凍藏期間感官評分降幅最小，品質(zhì)保持地較好。靜止空氣凍結(jié)組下降的速度最快，180 d時(shí)魚肉的品質(zhì)已經(jīng)嚴(yán)重下降，固有香味消失，肌肉松散，已經(jīng)不可食用。是因?yàn)橘A藏后期水產(chǎn)品的蛋白質(zhì)變性、內(nèi)源酶和微生物的作用，導(dǎo)致魚肉變軟，失去原有的香味，很大的降低了感官品質(zhì)[34]。液氮組優(yōu)于其他兩組，可以有效延緩沙光魚在凍藏過程中感官品質(zhì)的下降。

圖8 不同凍結(jié)方式對沙光魚感官評價(jià)的變化Fig.8 The changes of sensory evaluation in Synechogobius hasta by different frozen methods

2.9 不同凍結(jié)方式對沙光魚冰晶形成的影響

圖9為不同凍結(jié)方式對沙光魚冰晶形成的影響，從圖中可以看出，新鮮沙光魚的組織完整、排列致密整齊，無明顯間隙。經(jīng)三種凍結(jié)方式處理的沙光魚在30 d時(shí)組織均出現(xiàn)間隙和不同程度的破碎變形。靜止空氣凍結(jié)組織的間隙最大，有明顯的冰晶痕跡，表明靜止空氣凍結(jié)過程中形成較大且不規(guī)則的胞外冰晶，造成嚴(yán)重的機(jī)械損傷。送風(fēng)凍結(jié)的組織間隙要比靜止空氣凍結(jié)的小，但形成了一些較大的冰晶也會對品質(zhì)產(chǎn)生損害。液氮組形成的冰晶細(xì)小且均勻，組織結(jié)構(gòu)較為完整與新鮮樣品最接近，對組織細(xì)胞的機(jī)械損傷最小，能較好地維持沙光魚的品質(zhì)。結(jié)果表明，不同的凍結(jié)方式對沙光魚肌肉組織有很大的影響，液氮速凍可以更好地保持沙光魚的組織結(jié)構(gòu)。

圖9 不同凍結(jié)方式對沙光魚冰晶形成的影響Fig.9 Effects of different freezing methods on the formation of ice crystals in Synechogobius hasta

3 結(jié)論

不同凍結(jié)方式對沙光魚的各項(xiàng)理化指標(biāo)均產(chǎn)生了顯著的影響(P<0.05)。液氮組與其他兩種凍結(jié)方式相比，大大縮短了凍結(jié)時(shí)間，細(xì)胞組織較為完整，形成的冰晶細(xì)小且分布均勻。隨著凍藏時(shí)間的增加，TVB-N值、K值、TBA值和蒸煮損失率均呈上升趨勢；Ca2+-ATPase活性、鹽溶性蛋白含量和感官評分均呈下降趨勢，在整個(gè)凍藏期間液氮組的各項(xiàng)指標(biāo)變化的幅度始終低于靜止空氣凍結(jié)和送風(fēng)凍結(jié)(P<0.05)。凍藏至180 d時(shí)，靜止空氣凍結(jié)處理的樣品已不宜食用；液氮速凍處理的沙光魚依然處于一級鮮度。說明液氮速凍能較好地保持沙光魚的新鮮度，有效延緩脂肪氧化，并抑制蛋白質(zhì)的冷凍變性。與其他兩種凍結(jié)方式相比，液氮速凍保鮮效果最好，能提高沙光魚凍藏期間的品質(zhì)，延長貨架期。