毛愛國,黎立光,李 銳
(1.公安部昆明警犬基地,警犬技術公安部重點實驗室,云南昆明 650204;2.昆明市動物疫病預防控制中心,云南昆明 650106)
腸道菌群組指棲息于胃腸道中的所有微生物(即細菌、病毒、真菌、原生動物、古細菌)的基因組。其中細菌含量最多,并且每只健康的動物的細菌成分都有個體差異。厚壁菌門、擬桿菌門、變形菌門和梭桿菌門是最豐富的細菌門,在犬腸道微生物中所占比例高達99%。腸道微生物組是重要的代謝器官,對宿主的健康至關重要,它參與機體的各種生理過程,作用包括調節(jié)免疫系統(tǒng)、抵抗病原體以及將飲食成分代謝為營養(yǎng)成分(例如維生素、短鏈脂肪酸)。腸道微生物菌群由1013~1014個細胞構成,有超過1000多種細菌;這些細菌所包含的基因和其他微生物細胞共同組成的細菌群落(即腸道菌群),不僅不會危害犬的健康,反而能幫助犬進行消化、生長和免疫。犬的腸道菌群并不是與生俱來的,都是在犬與周圍環(huán)境接觸過程中逐漸形成的。當新生犬通過產道時,母體內的共生細菌,就會轉移到幼崽身上并開始繁殖。隨著與其它犬、居住的犬窩等接觸,幼犬體內的細菌會變得越來越多,到長大成為成犬前,犬體內已經形成了最復雜的微生物群落。
犬腸道內聚集著數(shù)量龐大、結構復雜的微生物菌群,比人的消化道微生物更豐富,是一個多樣復雜的生態(tài)系統(tǒng)。對宿主營養(yǎng)物質的消化吸收、疾病預防起著重要作用。微生物種類在不同品種的犬存在明顯差異;不同地區(qū)之間及同一品種犬的各腸段也存在很大差異。機體腸道內的菌群會在相應的環(huán)境下產生相應的菌群調整,從而適應自身的生存和繁殖。犬的腸道微生物在不同腸段分布不同,例如梭菌(Clostridiales)的分布主要集中于十二指腸和空腸中,在犬消化道后段的結腸和糞便中主要的菌類是厚壁菌門、變形菌門、擬桿菌和梭桿菌門,而乳酸桿菌(Lactobacillales)在腸道內的各個部分中分布較為均勻。Suchodolski等通過16S rRNA基因測序分析,在比對得到OTU后發(fā)現(xiàn)基因序列中優(yōu)勢菌門主要為:梭桿菌門(Fusobacteria),厚壁菌門(Firmicutas),變形菌門(Pmteobacteria)以及擬桿菌門(Bactemidetes),并發(fā)現(xiàn)犬腸道內優(yōu)勢菌群主要為梭菌屬,乳桿菌目出現(xiàn)于犬的各個腸段中,但是腸球菌主要存在于小腸中,在結腸中數(shù)量較為稀少。
目前認為腸道正常菌群至少具有的功能有:(1)營養(yǎng)作用:腸道菌群能夠促進營養(yǎng)物質的消化吸收,如腸球菌可將蛋白質分解為氨基酸;雙歧桿菌能產生各種酶,將不溶性蛋白、脂肪和糖等變?yōu)榭扇苄?,將纖維素分解為酸和醇類,為體內合成蛋白質、脂類提供原料;乳酸菌能提高乳糖酶活性,緩解乳糖消化不良,合成B族維生素。(2)免疫抗病作用:腸道是機體最大的免疫器官。優(yōu)勢菌群可激活巨噬細胞吞噬能力;原籍菌可以刺激機體產生體液免疫、細胞免疫,特別是黏膜免疫等的免疫增強作用。有益菌可間接或直接排斥有害菌在腸道內的繁殖和生存的對致病菌的競爭排斥作用。(3)生物拮抗作用:“菌膜屏障”是機體胃腸消化道中重要的預防屏障,它附著于腸壁上,產生細胞外糖苷酶,降解致病菌及內毒素結合受體的復雜多糖,抑制腸道內、外源性潛在致病菌對腸上皮細胞的黏附及定植,起到阻斷細菌的作用。(4)其它作用:腸道正常菌群可以產生超氧化物歧化酶,使機體內的自由基歧化反應加速,具有一定的抗衰老作用。近幾年研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群對情緒也有影響,還可通過腸-腦軸影響宿主的行為。
菌群失調是指腸道內微生物組成或多樣性發(fā)生變化,正常情況下,犬腸道內的益生菌和致病菌群處于動態(tài)平衡之中。腸道菌群失調與飲食結構、過敏、應激、炎癥性腸病和腹瀉等疾病有關;當腸道菌群的正常耐受性被破壞時,腸道免疫系統(tǒng)可能會發(fā)生一種改變的反應,可能引發(fā)和維持炎癥性腸病或觸發(fā)過敏反應的發(fā)生。抗生素的廣泛使用會導致腸道菌群受到干擾,當犬腸道菌群平衡被打破時也會導致疾病的產生。腸道菌群失調的關鍵特征不僅是特定細菌的減少或增加,還包括微生物群功能的降低。某些病例中,菌群失調是導致犬類腹瀉的重要原因之一。Bell等研究發(fā)現(xiàn)犬類腹瀉會引起胃腸消化道產氣莢膜梭菌、糞腸球菌的豐度增加。Suchodolski等發(fā)現(xiàn)犬急性出血性腹瀉在影響沙門氏菌和產氣莢膜梭菌豐度增加的同時,引起布勞特氏菌屬細菌以及糞便桿菌、螺旋桿菌屬在內的瘤胃菌科細菌水平降低。大多數(shù)患胃腸道疾病的動物都有菌群失調,可能是整個胃腸道都菌群失調或局限在小腸或大腸,不同動物的臨床癥狀也各不相同。
不論是細菌、病毒,還是寄生蟲引起的犬類機體胃腸消化道感染都是一個長期、變化的過程。被感染嚴重程度及感染前胃腸道菌群被破壞的程度決定了犬類胃腸消化道微生態(tài)平衡恢復時間的長短。宿主和微生物間的生物平衡關系被破壞后,宿主機體通過重新調整平衡最終達到康復或轉為病原攜帶者。如果被打亂的胃腸道微生態(tài)平衡沒有及時恢復,那么病原微生物就會創(chuàng)造出一套有利于進一步引發(fā)感染的環(huán)境,從而導致宿主病情進一步加重,甚至最后導致宿主死亡??傊拗?、病原微生物和胃腸道菌群三者相互作用,在感染的進程中不斷地共同進化,形成一個動態(tài)的、有利于機體健康的平衡關系。
一是要均衡的營養(yǎng)。要根據(jù)犬的不同品種、不同年齡段、不同體型大小的發(fā)育特點,提供合理均衡的飲食,才能促進犬只健康成長。二是加強飼養(yǎng)管理,做到定時、定量、少食、多餐。定時飼喂可培養(yǎng)犬只定時分泌胃液等消化酶,有規(guī)律的刺激犬只胃腸蠕動,增強其饑餓感,對犬只采食及食物營養(yǎng)的消化吸收大有益處。幼犬處在機體各項功能發(fā)育的重要階段,喂食時要少食多餐,避免突然增加幼犬胃的負擔,造成消化不良。同時,給犬只營造一個輕松愉快的進餐氛圍,盡量減少犬只在饑餓勞頓、環(huán)境應激下進食,這對犬只胃腸消化道健康也十分重要。三是要加強運動鍛煉。犬好動、靈活,喜歡奔跑,具有較強的運動動力和游戲欲望。加強犬的戶外運動,以增強犬的體質,提高犬的抗病能力。四是要適當?shù)难a充改善犬只胃腸消化道功能的物質。例如膳食纖維、益生菌、酶制劑等物質。益生菌可以促進犬只消化酶的分泌、促進犬只胃腸道菌群的微生態(tài)平衡等,如酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌、糞鏈球菌等。五是要合理使用抗生素。對于生病的犬只,要根據(jù)病情及犬只機能狀態(tài)進行合理給藥,不能超量、長期使用抗生(菌)素,以免增加犬只機體對病毒、細菌的耐藥性,破壞犬只胃腸消化道菌群微生態(tài)平衡,引起犬只胃腸消化道功能紊亂,最終導致犬只難以痊愈??傊?,科學的飼養(yǎng)和管理,是犬只健康成長的重要保障。