王承功

羊小反芻獸疫也稱羊瘟、小反芻獸疫，是由小反芻獸疫病毒誘發(fā)的山羊與綿羊等小反芻獸的高致病性傳染病，高熱、口炎、腹瀉與肺炎等是本病的主要特征。隨養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)規(guī)模擴(kuò)大，羊小反芻獸疫的患病率有逐年上升的趨勢(shì)，對(duì)養(yǎng)殖戶經(jīng)濟(jì)利潤(rùn)造成嚴(yán)重?fù)p失。加強(qiáng)羊小反芻獸疫防治被提上日程。

1 材料與方法

1.1 羊拭子樣品

本疫控中心2019及2020年度采集11個(gè)縣區(qū)級(jí)羊規(guī)模場(chǎng)及散養(yǎng)戶4批次，273養(yǎng)殖戶，共1280份拭子樣品，使用友康恒業(yè)生物科技（北京）有限公司病毒保存管保存。

1.2 試劑

診斷標(biāo)準(zhǔn)：GB/T27982-2011。診斷試劑，小反芻獸疫病毒熒光RT-PCR盒（批號(hào)：CP18070501）中山達(dá)安基因股份有限公司。小反芻獸疫病毒（PPRV）核酸檢測(cè)（批號(hào)：040172005）青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心。提取試劑，長(zhǎng)春市志昂生物科技有限公司生產(chǎn)的病毒DNA/RNA磁珠法提取試劑盒（T005型），批號(hào)為20200814。上海拜諾生物科技有限公司（批號(hào)：20180503）。

1.3 主要儀器

核酸提取儀（型號(hào)King Fisher Flex）：美國(guó)Thermo，高速冷凍離心機(jī)（型號(hào)3K-15）;德國(guó)SIGMA;PCR儀（型號(hào)Q5）：美國(guó)Thermo Fisher。

1.4 實(shí)驗(yàn)過程

檢查樣品密封，將試劑置于室溫解凍。按照核酸提取試劑中的說明書進(jìn)行提取操作。配置試劑加入sample板中或?qū)?yīng)的列中，取拭子樣品對(duì)應(yīng)加入，使用核酸提取儀進(jìn)行核酸提取。最后取出核酸樣品。將核酸板中提取的核酸按照相應(yīng)的小反芻獸疫病毒核酸檢測(cè)試劑盒中要求進(jìn)行核酸檢測(cè)。依照不同的試劑盒的試驗(yàn)成立標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果讀取。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)果

4批次共1280份樣品檢測(cè)結(jié)果，1280份樣品中小反芻獸疫檢測(cè)結(jié)果皆為陰性，無陽性樣品（詳見表1）。