張宇航，陳琳方，劉國文

(1.吉林大學動物醫(yī)學院，吉林 長春 130062 ； 2.吉林農(nóng)業(yè)科技學院動物科技學院 , 吉林 吉林 132101)

奶牛乳腺炎亦稱奶牛乳房炎，是奶牛乳腺組織發(fā)生的炎癥性疾病，奶牛乳腺炎是一種多因素性疾病，其發(fā)生可能是病原微生物入侵因素、飼養(yǎng)管理因素、環(huán)境因素、遺傳因素以及奶牛自身因素等綜合作用的結果[1]。奶牛乳腺炎常見多發(fā)，對奶牛養(yǎng)殖業(yè)危害嚴重，可以導致奶牛生產(chǎn)能力降低、奶牛品質下降、危害公眾食品安全、治療產(chǎn)生大量費用、易產(chǎn)生耐藥性等一系列問題，嚴重者可降低奶牛使用年限，而隱性乳腺炎臨床上由于缺乏明顯癥狀易被忽視，其危害更大，已成為制約奶牛發(fā)展的瓶頸問題[2]。吉林地區(qū)是我國重要的奶牛養(yǎng)殖區(qū)域，每年由于奶牛隱性乳腺炎的危害產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟損失，本課題組系統(tǒng)調查了吉林地區(qū)2019年1—12月奶牛隱性乳腺炎發(fā)病特點與地域、胎次、泌乳階段、月份、產(chǎn)奶量、飼養(yǎng)方式、擠奶方式以及致病菌類型等因素之間的相關性，以探索吉林地區(qū)奶牛隱性乳腺炎發(fā)病的基本規(guī)律，降低該病發(fā)病率，減少經(jīng)濟損失，保護牛奶制品食品安全，促進吉林地區(qū)奶牛養(yǎng)殖業(yè)健康和諧發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 調查對象 于2019年1—12月對吉林地區(qū)多個規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖場以及散養(yǎng)戶的5 826頭奶牛的隱性乳腺炎患病情況進行調查。

1.2 主要檢測設備 奶牛隱性乳房炎測定儀(BTS-1)，購自北京倍特雙科技發(fā)展有限公司。

1.3 奶牛飼養(yǎng)管理水平分類 奶牛飼養(yǎng)管理水平分類標準參照文獻[3]。

1.4 方法

1.4.1 奶牛隱性乳腺炎的診斷 采樣操作人員手部以及待檢牛乳區(qū)消毒，采集頭奶，每次牛奶采樣量不少于15 mL，液面高于采樣杯內(nèi)壁的刻度線，奶牛隱性乳房炎測定儀開機，待屏幕出現(xiàn)2條橫線，再次按下開關鍵開始檢測，并讀數(shù)，讀數(shù)位于300～250刻度即為奶牛隱性乳腺炎。

1.4.2 奶牛隱性乳腺炎致病菌的分離鑒定 無菌條件下采集奶樣，染色鏡檢，參照文獻[4]采用生化鑒定以及動物致病性試驗方法對致病菌進行分析。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 利用SPSS 22.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行分析，經(jīng)卡方(χ2)檢驗，**表示差異極顯著(P<0.01)，*表示差異顯著(P<0.05)。

2 結果

2.1 不同區(qū)域奶牛隱性乳房炎的發(fā)病情況 對吉林地區(qū)6個區(qū)域的5 826頭奶牛乳房炎的發(fā)病情況進行調查，結果見表1。其中永吉縣奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率最低，為35.31%，其他區(qū)域差異不顯著(P>0.05)；樺甸市奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率最高，為60.32%，顯著高于其他區(qū)域，差異極顯著(P<0.01)。

表1 吉林地區(qū)6個區(qū)域 2019年1—12月奶牛隱性乳腺炎檢測結果Table 1 Results of detection of recessive mastitis in dairy cows in 6 areas of Jilin province from January to December 2019

2.2 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與胎次的相關性 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與胎次的相關性調查結果見表2。7胎 及以上總發(fā)病率達72.26%，與其他胎次相比發(fā)病率明顯增高，差異極顯著(P<0.01)；發(fā)病率最低的是2胎次，為29.40%。

表2 胎次與隱性乳腺炎發(fā)病情況關系Table 2 Relationship between parity and incidence of recessive mastitis

2.3 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與月份的相關性 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與月份相關性調查結果見表3。數(shù)據(jù)表明，奶牛隱性乳腺炎的發(fā)病率與月份關系密切，其中5—10月份以及12月份發(fā)病率較高，與其他月份差異極顯著(P<0.01)；1—2月份發(fā)病率差異不顯著(P>0.05)；發(fā)病率最高月份為9月份，發(fā)病率達61.99%；1月份發(fā)病率最低，為20.26%。

表3 月份與奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況關系Table 3 Relationship between month and incidence of recessive mastitis

2.4 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與產(chǎn)奶量的相關性 不同產(chǎn)奶量奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況統(tǒng)計結果見表4。奶牛全年產(chǎn)奶量低于5 000 kg的隱性乳腺炎發(fā)病率最低，為28.09%；發(fā)病率最高的為全年產(chǎn)奶量高于7 000 kg的奶牛，達到55.61%，與其他組別奶牛相比差異極顯著(P<0.01)。

表4 不同產(chǎn)奶量奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況統(tǒng)計結果Table 4 Statistical results of incidence of recessive mastitis in cows with different milk production

2.5 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與養(yǎng)殖方式的相關性 不同養(yǎng)殖方式奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況統(tǒng)計結果見表5。規(guī)?；B(yǎng)殖發(fā)病率為36.79%，而散養(yǎng)奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率高達64.07%，與規(guī)模化養(yǎng)殖場相比發(fā)病率明顯提高，差異極顯著(P<0.01)。

表5 不同養(yǎng)殖方式奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況統(tǒng)計結果Table 5 Statistical results of recessive mastitis in cows with different breeding methods

2.6 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與泌乳階段的相關性 奶牛隱性乳腺炎的發(fā)病與泌乳階段有一定關系，結果見表6。泌乳高峰期發(fā)病率最高，達68.15%；泌乳高峰期、泌乳中期明顯高于其他泌乳階段，差異極顯著(P<0.01)；泌乳初期隱性乳房炎發(fā)病率最低，為23.16%。

表6 不同泌乳階段奶牛隱性乳腺炎的發(fā)病情況Table 6 Incidence of recessive mastitis in cows at different lactation stages

2.7 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與擠奶方式的相關性 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與擠奶方式具有一定的相關性，結果見表7。手工擠奶方式奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率為60.74%，明顯高于機器擠奶方式，差異極顯著(P<0.01)。

表7 不同擠奶方式奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況統(tǒng)計結果Table 7 Statistical results of recessive mastitis in cows with different milking methods

2.8 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與牧場管理水平的相關性 不同牧場飼養(yǎng)管理水平奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況統(tǒng)計結果見表8。飼養(yǎng)管理水平優(yōu)的奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率為26.48%，而飼養(yǎng)管理水平差的奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率為67.38%；飼養(yǎng)管理水平良、差奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率之間均差異顯著(P<0.05)；飼養(yǎng)管理水平優(yōu)、差奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率之間均差異極顯著(P<0.01)。

表8 不同牧場飼養(yǎng)管理水平奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況統(tǒng)計結果Table 8 Statistical results of the incidence of recessive mastitis in cows at different feeding and management levels in different pastures

2.9 奶牛隱性乳腺炎致病菌類型調查 奶牛隱性乳腺炎主要致病菌具體情況見表9。奶牛隱性乳腺炎單一性致病菌主要包括葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌以及蠟樣芽胞桿菌等；混合感染為奶牛隱性乳腺炎主要致病性因素，其中雙重混合感染發(fā)病率為62.96%，三重及以上混合感染發(fā)病率為72.45%，與其他感染類型比較明顯上升，差異極顯著(P<0.01)。

表9 致病菌類型與奶牛隱性乳腺炎發(fā)病情況關系Table 9 Correlation between pathogenic bacteria types and incidence of recessive mastitis in cows

3 討論

3.1 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與區(qū)域、胎次以及月份的相關性 研究證實，我國奶牛隱性乳腺炎平均發(fā)病率為46.40%～85.71%[5]，與本次調查的吉林地區(qū)各區(qū)域奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率結果具有一致性。樺甸市發(fā)病率最高，明顯高于吉林地區(qū)其他區(qū)域，可能與飼養(yǎng)水平有關，樺甸地區(qū)多為山區(qū)，土壤、水源中礦物質與硒等微量元素相對缺乏，奶牛生產(chǎn)飼料與水源由于缺乏礦物質與微量元素而導致機體免疫力下降，而且樺甸山區(qū)晝夜溫差較大，奶牛深受熱應激與冷應激交互影響而致抵抗力下降，發(fā)病率自然上升，散養(yǎng)戶相對較多，養(yǎng)殖技術相對落后，永吉縣以及舒蘭市奶牛養(yǎng)殖基礎較好，較早提出“無疫病奶牛小區(qū)建設”，相對發(fā)病率較低。從胎次統(tǒng)計分析看，發(fā)病率最低的是2胎，3～5胎次發(fā)病率有所上升，但差異不明顯，與郝景鋒等[6]研究結果一致，7胎次及以上隱性乳腺炎明顯升高，與其他胎次相比差異顯著，可能與長期泌乳導致乳腺組織不同程度受損以及器官功能退化有關，在種群結構上應適當淘汰7胎次以上奶牛，有利于奶牛養(yǎng)殖經(jīng)濟效益的提升。從月份統(tǒng)計分析看，5—10月份以及12月份奶牛隱性乳房炎發(fā)病率明顯升高，周慶民等[7]通過研究證實，8、9月份奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率較高，本病主要致病性因素為細菌感染，5—10月份天氣相對較熱，細菌易于滋生，故發(fā)病率有所提高，夏季機體抗病能力減弱，處于熱應激狀態(tài)，食欲下降，機體抗病能力降低，發(fā)病率上升，12月份發(fā)病率較高的原因可能與寒冷因素有關，剛進入冬季，奶牛對寒冷因素適應需要一段調整時間，免疫力受寒冷因素影響而下降，發(fā)病率上升，經(jīng)過一段時間調整與適應，次年1、2月份反而發(fā)病率下降，因此經(jīng)驗豐富的養(yǎng)殖戶會采取積極措施盡量較早御寒，降低寒冷因素對奶牛機體的危害，因此加強飼養(yǎng)管理對奶牛隱性乳腺炎防控意義重大。

3.2 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與產(chǎn)奶量、養(yǎng)殖方式、泌乳階段、擠奶方式以及牧場飼養(yǎng)管理水平相關性 奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與產(chǎn)奶量存在一定關聯(lián)，李進[8]通過研究證實，隨著奶牛產(chǎn)奶量上升，隱性乳腺炎發(fā)病率提高，本調查顯示，全年產(chǎn)奶量低于5 000 kg的奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率最低，可能與乳腺組織受損較輕有關，隨著奶牛產(chǎn)奶量上升，當全年產(chǎn)奶量高于7 000 kg時，機體易出現(xiàn)能量負平衡，大量泌乳對機體產(chǎn)生巨大的應激性損傷，奶牛免疫力降低，奶牛乳腺組織受損加劇，乳腺組織失去保護性作用，乳腺炎發(fā)病率明顯上升。吉林地區(qū)奶牛養(yǎng)殖多為規(guī)模化養(yǎng)殖，但仍有少部分散養(yǎng)，規(guī)?；B(yǎng)殖方式的技術相對豐富，免疫程序合理科學，發(fā)病治療及時有效，機體抵抗力相對較強，散養(yǎng)戶由于規(guī)模小，養(yǎng)殖技術相對滯后，免疫不合理，治療不及時等因素導致機體免疫力降低，發(fā)病率明顯上升，與高倞[9]調查結果一致。奶牛隱性乳腺炎發(fā)病與泌乳階段關系緊密，泌乳高峰期、泌乳中期發(fā)病率最高，這可能是因為泌乳中期及高峰期乳頭管括約肌松弛、乳頭不能完全收縮、乳頭管屏障作用降低、病原細菌從乳頭管充分進入乳腺組織造成乳腺炎發(fā)病率上升，張月[10]通過研究證實此觀點。手工擠奶奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率明顯高于機器擠奶奶牛，手工擠奶多為小規(guī)?；蛘呱B(yǎng)，自動化程度較低、消毒不嚴、操作手法生硬對乳腺組織損傷較大，而機器擠奶往往由于機器調試不合理、吸頭過緊、消毒不嚴等因素導致奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率提高，張振威等[11]通過研究證實，手工擠奶奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率明顯高于機器擠奶。牧場飼養(yǎng)管理水平對奶牛隱性乳腺炎發(fā)病影響較大，牧場飼養(yǎng)管理水平優(yōu)能明顯降低奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率，牧場飼養(yǎng)管理水平差奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率明顯升高，韓曉霞等[12]通過研究證實此觀點，提高飼養(yǎng)管理水平，加強奶牛日常營養(yǎng)、適當運動、及時合理休息、減少應激、避免噪聲污染、清潔飲水、改善畜舍環(huán)境衛(wèi)生、防寒降暑、加強通風換氣、科學免疫以及合理防疫等因素均可保障機體免疫力、恢復機體機能、機體抵抗力上升、奶牛健康生長，故而可以降低奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率。

3.3 奶牛隱性乳腺炎主要致病菌類型分析 本次調查發(fā)現(xiàn)，吉林地區(qū)奶牛隱性乳腺炎單一性致病菌為葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、化膿桿菌以及蠟樣芽胞桿菌等，葡萄球菌與大腸桿菌為優(yōu)勢性致病菌，與吳曉曉[13]研究具有一致性；甘林茂[14]研究證實，奶牛隱性乳腺炎主要致病菌為葡萄球菌、大腸桿菌以及蠟樣芽胞桿菌；張穎等[15]研究證實，奶牛隱性乳腺炎主要致病菌為葡萄球菌、化膿桿菌以及蠟樣芽胞桿菌。眾多研究均顯示，奶牛隱性乳腺炎主要致病菌為葡萄球菌、大腸桿菌和鏈球菌，前期研究亦證實東北地區(qū)奶牛隱性乳腺炎主要致病菌為葡萄球菌及大腸桿菌等，雙重致病菌感染明顯高于單一性感染，三重及以上感染表現(xiàn)更為突出，導致奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率最高，魏凡華等[16]研究結果與本試驗具有一致性。葡萄球菌、大腸桿菌、鏈

球菌以及蠟樣芽胞桿菌多為環(huán)境常見菌，于糞便、污水、被污染的墊料中廣泛存在，這些致病菌也是機體自身攜帶菌，環(huán)境消毒不嚴、乳腺組織消毒不嚴以及各種因素導致機體抵抗力下降均可致奶牛隱性乳腺炎發(fā)病率上升。應貫徹“預防為主，治療為輔”之原則，致病菌、環(huán)境和牛體是控制乳腺炎發(fā)生的關鍵環(huán)節(jié)，環(huán)境嚴格消毒、注意牛舍防寒降暑、加強通風換氣、維持飼料營養(yǎng)均衡、規(guī)范擠奶操作、減少應激等確保奶牛具有較強免疫力，減少致病菌通過乳頭侵入乳腺的機會，這對奶牛隱性乳腺炎防控意義重大?？茖W分析研判吉林地區(qū)奶牛隱性乳腺炎發(fā)病規(guī)律以及流行特點，有利于科學預防該病，提高奶牛養(yǎng)殖戶經(jīng)濟效益，確保牛奶食品安全，確保奶牛養(yǎng)殖業(yè)健康和諧發(fā)展。