李兆云，李輝，楊蘭芬，楊琦(德宏師范高等?？茖W(xué)校德宏生物醫(yī)藥工程研究中心，云南 芒市 678400)

0 引言

石斛屬(Dendrobium Sw.)全世界目前約1000種，廣泛分布于亞洲熱帶和亞熱帶地區(qū)至大洋洲。我國(guó)有74種和2種變種，大多分布在秦嶺以南，云南南部尤多。疊鞘石斛(Dendrobium denneanum)是線葉石斛的一個(gè)變種，是藥食兩用的名貴藥材之一。主產(chǎn)于臺(tái)灣、四川中南部 (峨眉山、峨邊)、云南東南部至西北部[1]。在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品，具有滋陰清熱、生津益胃、潤(rùn)肺止咳、潤(rùn)喉明目的功效。本研究采用全自動(dòng)氨基酸分析儀分析法對(duì)其氨基酸進(jìn)行定量分析，并通過與FAO/WHO氨基酸模式譜和FAO/WHO理想蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)比較，對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)分析，為進(jìn)一步開發(fā)利用疊鞘石斛資源提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

收集云南省普洱、紅河、版納，廣西南寧，四川夾江縣等地的疊鞘石斛，經(jīng)德宏師范高等?？茖W(xué)校施洪教授鑒定確認(rèn)為疊鞘石斛后作為材料。

1.2 儀器和試劑

A300型全自動(dòng)氨基酸分析儀 (德國(guó)曼默博爾公司)；DHG-9140電熱鼓風(fēng)干燥箱 (上海一恒科學(xué)儀器有限公司)；CP214分析天平 (奧豪斯國(guó)際貿(mào)易上海有限公司)；EPED-E2-20TH型超純水機(jī) (南京易普易達(dá)科技發(fā)展有限公司)；18種氨基酸標(biāo)樣2 nmol/mL(德國(guó)曼默博爾公司)。

1.3 試實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

將石斛樣品鮮條用超純水洗凈，切片晾干，55 ℃烘干至恒重，粉碎，過80目篩備用。

1.3.2 氨基酸測(cè)定

1.3.2.1 供試溶液制備

如表1所示，精密稱取疊鞘石斛樣品0.2 g，分別置于10 ml安瓿中，加6.00 mol/L鹽酸10 mL，充氮?dú)猓芊獍碴称?，置烘箱中?10 ℃水解22 h，冷卻后過濾定容至50 mL。取1 mL，于10 ml燒杯中水浴揮干鹽酸，用1 mL樣品稀釋液(pH 2.2)溶解，以0.22 um微孔濾膜過濾后備用。采用GB 5009.124—2016《食品中氨基酸的測(cè)定》方法測(cè)定[2]。

2 結(jié)果與分析

2.1 氨基酸的組成分析

本研究未檢測(cè)出胱氨酸和蛋氨酸，共檢出15種氨基酸，如表1所示10種樣品的氨基酸總量介于1.14%～4.22%，平均值為2.5%，其中廣西南寧的樣品總氨基酸含量最高，云南勐?？h的樣品總氨基酸含量最低。谷氨酸含量最高，酪氨酸含量最低。必需氨基酸含量介于0.45%～1.45%，平均0.91%，其中廣西南寧市的樣品必需氨基酸含量最高，云南省版納勐海縣的樣品必需氨基酸含量最低，在供試樣品必需氨基酸中亮氨酸含量最高，必需氨基酸與總氨基酸(EAA/TAA)值(34.34%～39.32%)平均比值為37.32%，必需氨基酸與非必需氨基酸的(EAA/NEAA)值(52.29%～64.81%)平均比值為59.61%，(FAO/WHO)推薦的模式值EAA/TAA＝40%，EAA/NEAA＝60%[3]接近，表明其具有較高的食用價(jià)值。

通過氨基酸評(píng)分(AAS)，AAS值越接近100，說明蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值就越高，AAS值低于100為限制性氨基酸，其中最小的為第一限制氨基酸，所有石斛的第一限制氨基酸均為胱氨酸+蛋氨酸。其余產(chǎn)地石斛中除產(chǎn)自云南勐?？h的以外，其它產(chǎn)地的賴氨酸AAS值均低于100。

表1 疊鞘石斛氨基酸含量

2.2 必需氨基酸組成分析與氨基酸評(píng)分

為進(jìn)一步描述不同產(chǎn)地疊鞘石斛營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，采用WHO/FAO推薦的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)的必需氨基酸模式氨基酸比值系數(shù)法，計(jì)算樣品中必需氨基酸的RAA、RC、SRC來評(píng)價(jià)其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。利用RC和SRC，可以直觀評(píng)價(jià)其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。氨基酸比值系數(shù)分(SRC)越接近100，說明蛋白質(zhì)中必需氨基酸的組成比例與必需氨基酸模式越接近，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值就越高。不同產(chǎn)地疊鞘石斛SRC值為69.6%～96.7%，明顯高于冬蟲夏草[4]、馬鈴薯[5]，說明疊鞘石斛必需氨基酸組成均衡，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，具有廣闊的開發(fā)利用前景。

3 結(jié)語(yǔ)

疊鞘石斛含有豐富的人體必需氨基酸和其它基本氨基酸。谷氨酸和天門冬氨酸為其主要氨基酸，在必需氨基酸中，谷氨酸所占比例最高。聚類分析中，根據(jù)疊鞘石斛中氨基酸含量可以分為四類，地理位置相近的聚為一類，聚類分析結(jié)果說明疊鞘石斛氨基酸含量存在一定的地域性差異，可能和生長(zhǎng)環(huán)境的氣候、溫度、濕度有關(guān)，具體原因還需進(jìn)一步研究確認(rèn)。谷氨酸是重要的鮮味劑，也是人體和動(dòng)物的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有特殊的生理作用，主要用于治療肝昏迷、改善兒童智力發(fā)育、改善和維持大腦機(jī)能，亦可以用于治療腦震蕩、癲癇、弱智兒童和神經(jīng)損傷等疾病[3]。天門冬氨酸能增強(qiáng)肝臟功能，消除疲勞，在肝病、高血壓、恢復(fù)疲勞等方面發(fā)揮著重要作用。疊鞘石斛的EAA/TAA值為34.34%～39.32%，EAA/NEAA值為52.29%～64.81%，與WHO/FAO推薦模式值接近，說明其具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。藥用氨基酸占TAA的59.71%～67.33%，平均值為62.91%，高于枇杷[6]。廣西南寧疊鞘石斛藥用氨基酸含量最高，占總氨基酸的67.33%。云南勐海藥用氨基酸含量最低，占總氨基酸的59.71%，說明不同產(chǎn)地疊鞘石斛所含藥用氨基酸的含量有一定差異。氨基酸不僅具有各種生理功能，大多數(shù)氨基酸還呈現(xiàn)出特殊味道，比如鮮味和甜味，在疊鞘石斛的呈味和品質(zhì)方面具有重要作用。各地疊鞘石斛甜味氨基酸含量平均值為0. 66 mg/g，甜味氨基酸含量介于0.33～1.01 mg/g之間，占總氨基酸含量的24.00%～28.81%，其中云南勐海甜味氨基酸含量最低，為0.33 mg/g廣西南寧甜味氨基酸含量最高，達(dá)1.01 mg/g。不同疊鞘石斛中鮮味氨基酸總含量差異較大，以廣西南寧最高，云南勐海最低，各地疊鞘石斛鮮味氨基酸含量介于0.50～2.20 mg/g之間，占總氨基酸的比例介于43.40%～52.25%之間。