尤雪梅，種亞楠，狄海莉，孟軍鵬，沈小燕，吳文婷

陜西省第四人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，陜西 西安 710043

帕金森是臨床常見神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，隨著我國人口老齡化進(jìn)程，其發(fā)生率呈逐漸增加趨勢(shì)，早期表現(xiàn)為震顫、運(yùn)動(dòng)遲緩、肌肉強(qiáng)直等運(yùn)動(dòng)癥狀，隨病程發(fā)展，抑郁、認(rèn)知等非運(yùn)動(dòng)癥狀加重，對(duì)患者生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響[1-2]。近年來研究顯示，帕金森病情演變過程中通常存在免疫炎癥反應(yīng)[3]。單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)又稱CC趨化因子配體2(CC chemokine ligand 2，CCL2)，是CC趨化因子家族的一員，對(duì)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞具有強(qiáng)趨化作用，其存在多種受體，其首選受體是CC趨化因子受體2(CC chemokine receptor-2，CCR-2)，在炎性反應(yīng)中，MCP-1/CCR2信號(hào)通路可招募、激活單核細(xì)胞，進(jìn)而發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的作用[4-5]，且MCP-1/CCR2結(jié)合位點(diǎn)在海馬、丘腦、杏仁核復(fù)合物等與邊緣系統(tǒng)有關(guān)腦區(qū)中均存在，MCP-1/CCR2與認(rèn)知功能的關(guān)系已引起諸多研究者的興趣[6]。但是目前關(guān)于MCP-1、CCR2與帕金森病情嚴(yán)重程度的關(guān)系的報(bào)道較少，本文就此展開研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年5月至2020年5月陜西省第四人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的265例帕金森患者作為觀察組，年齡40~85歲，病程2~12年。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合中國帕金森病治療指南(第三版)中診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；(2)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)腫瘤性、中毒性、外傷性、血管性等繼發(fā)性帕金森者；(2)存在腦外傷、卒中或腦部手術(shù)史者；(3)合并血液系統(tǒng)疾病者；(4)自身免疫性疾病者；(5)合并惡性腫瘤者；(6)合并心、肝、肺、腎等臟器嚴(yán)重功能障礙者。另選取270例同期健康體檢者作為對(duì)照組，年齡40~85歲。兩組受檢者除蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表(Montreal Cognitive Assessment，MoCA)評(píng)分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)外，性別、年齡、身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙、飲酒、高血壓、糖尿病、高血脂等一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬知情同意。

表1 兩組受檢者的基線資料比較[(±s)，例(%)]

表1 兩組受檢者的基線資料比較[(±s)，例(%)]

項(xiàng)目 對(duì)照組(n=270)觀察組(n=265)t/χ2值P值男性151(55.93)153(57.74)0.1790.673年齡(歲)64.56±10.3964.97±11.210.4390.661 BMI(kg/m2)24.12±2.5724.43±2.691.3630.173病程(年)-6.71±2.15--H-Y分期(期)-2.42±0.54--吸煙36(13.33)43(16.23)0.8890.346飲酒18(6.67)23(8.68)0.7660.382高血壓93(34.44)101(38.11)0.7790.377糖尿病22(8.15)19(7.17)0.1810.671高血脂32(11.85)37(13.96)0.5300.467 MoCA評(píng)分(分)27.93±2.9415.42±2.6751.4940.000

1.2 方法

1.2.1 血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平檢測(cè) 兩組受檢者均采集5 mL空腹肘靜脈血，3 000 r/min離心10 min，將分離的血清置于-80℃條件下保存。檢測(cè)時(shí)，提前取出血清標(biāo)本并放至室溫，采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測(cè)血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平，MCP-1試劑盒購于武漢博士德生物工程有限公司(貨號(hào)為EK0441)，CCR2試劑盒購于武漢華美生物工程有限公司(貨號(hào)為CSB-E14200h)，試驗(yàn)操作嚴(yán)格遵循試劑盒說明書。將血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平以平均數(shù)區(qū)分高、低表達(dá)。

1.2.2 帕金森患者運(yùn)動(dòng)功能評(píng)估 采用改良Hoehn-Yahr(H-Y)分期量表評(píng)估帕金森患者運(yùn)動(dòng)功能，0期：無癥狀；1期：單側(cè)肢體受累；1.5期：單側(cè)肢體受累，合并軀干(軸)受影響；2期：雙側(cè)肢體受累，平衡未受影響；2.5期：輕度雙側(cè)肢體受累，可借助后拉試驗(yàn)自行恢復(fù)平衡；3期：輕至中度雙側(cè)肢體受累，平衡受影響，且無法借助后拉試驗(yàn)恢復(fù)；4期：重度病殘，不借助幫助仍能走路、站立；5期：無協(xié)助下只能臥床或坐輪椅。H-Y分期越高說明運(yùn)動(dòng)功能受損越嚴(yán)重。

1.2.3 蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表(Montreal Cognitive Assessment，MoCA)測(cè)試 采用MoCA量表評(píng)估兩組受檢者認(rèn)知功能，所有受試者均在安靜環(huán)境下開始測(cè)試，且全程以標(biāo)準(zhǔn)化用語進(jìn)行。MoCA量表包括記憶、語言能力、視空間與執(zhí)行功能、注意力等項(xiàng)目，總分30分，答對(duì)一個(gè)單項(xiàng)計(jì)1分，回答錯(cuò)誤或回答不知道或不回答計(jì)0分，MoCA評(píng)分≥26分則為認(rèn)知功能正常，MoCA評(píng)分<26分提示認(rèn)知功能障礙，受教育年限≤12年者應(yīng)在總得分基礎(chǔ)上加1分，以作校正，Mo-CA評(píng)分越低，則認(rèn)知功能受損越嚴(yán)重。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用S-PSS25.0軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例(n)或百分率(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用Spearman分析帕金森患者血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平與H-Y分期、MoCA評(píng)分的相關(guān)性；繪制受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve，ROC曲線)評(píng)估血清MCP-1、CCR2對(duì)帕金森的診斷價(jià)值。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者的血清MCP-1、CCR2水平比較 觀察組患者的血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表2 兩組受檢者的血清MCP-1、CCR2水平比較(±s)

表2 兩組受檢者的血清MCP-1、CCR2水平比較(±s)

組別 例數(shù)MCP-1(pg/mL)CCR2(ng/mL)對(duì)照組27017.32±5.1622.38±6.56觀察組26526.67±8.6031.71±9.67 t值15.28113.081 P值0.0010.001

2.2 帕金森患者血清MCPP-1、CCR2表達(dá)水平與H-Y分期、MoCA評(píng)分的相關(guān)性 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，帕金森患者血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平與H-Y分期呈正相關(guān)(P<0.05)，與MoCA評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，見表3。

表3 帕金森患者血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平與H-Y分期、MoCA評(píng)分的相關(guān)性

2.3 血清MCPP1、CCR2對(duì)帕金森的診斷價(jià)值 血清MCP-1、CCR2單獨(dú)診斷帕金森患者的曲線下面積(area under the curve，AUC)分別為0.817(95%CI：0.780~0.855)、0.781(95%CI：0.741~0.821)，截 斷 值 分 別 為20.57 pg/mL、26.74 ng/mL，此時(shí)對(duì)應(yīng)的敏感度分別為77.00%、74.00%，特異性分別為81.50%、78.90%；兩者聯(lián)合診斷帕金森的AUC為0.853(95%CI：0.820~0.886)，敏感度為85.70%，特異性為74.80%，且與單獨(dú)診斷相比，兩者聯(lián)合診斷敏感度較高，見圖1。

圖1 血清MCP-1、CCR2診斷帕金森患者的ROC曲線

3 討論

帕金森是一種慢性進(jìn)行性神經(jīng)變性疾病，主要病理改變是多巴胺能神經(jīng)元缺失，其發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，與遺傳、環(huán)境、氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)均有關(guān)，但具體機(jī)制尚未明確闡述。因臨床應(yīng)用H-Y分期量表存在遲滯性，患者多在缺失30%~50%以上多巴胺神經(jīng)元時(shí)，臨床癥狀才較為明顯，可能使漏診患者錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)[8-9]。

炎性反應(yīng)已被證明是包括帕金森在內(nèi)的多種神經(jīng)退行性疾病的主要因素[10]。MCP-1是調(diào)控單核細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞募集及活化的重要趨化因子，其與受體CCR2在多種神經(jīng)炎癥性疾病中發(fā)揮重要作用[6,11-12]。MCP-1多由神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，能增加紋狀體神經(jīng)細(xì)胞趨化作用，與帕金森神經(jīng)炎癥關(guān)系密切，可能在炎癥反應(yīng)起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用[13]。MCP-1/CCR2通路能夠誘導(dǎo)白細(xì)胞在神經(jīng)損傷部位聚集，促使炎癥因子及其他趨化因子的釋放，進(jìn)而引起神經(jīng)炎癥[14-15]。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠脊髓損傷后發(fā)生運(yùn)動(dòng)、感覺功能障礙，同時(shí)脊髓中MCP-1、CCR2表達(dá)量增加，可能影響大鼠運(yùn)動(dòng)及感覺功能，有望將其用于靶向治療，推測(cè)與MCP-1、CCR2介導(dǎo)脊髓損傷后發(fā)生繼發(fā)性炎性反應(yīng)有關(guān)[16]。

本研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，觀察組患者血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平較高，提示MCP-1、CCR2與帕金森的發(fā)生有關(guān)，分析原因是，炎性反應(yīng)過度激活是帕金森病變的重要病理環(huán)節(jié)，MCP-1具趨化活性，促進(jìn)炎性細(xì)胞向損傷部位趨化移動(dòng)，增強(qiáng)炎性細(xì)胞在中樞神經(jīng)浸潤，發(fā)揮促炎作用，最終引發(fā)神經(jīng)退行性病變[3，17]。進(jìn)一步研究顯示，帕金森患者血清MCP-1、CCR2表達(dá)水平與H-Y分期呈正相關(guān)，與MoCA評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，提示MCP-1、CCR2與帕金森患者運(yùn)動(dòng)功能、認(rèn)知功能損傷程度有關(guān)，兩者可能在帕金森的病情演變中發(fā)揮重要作用，

對(duì)患者進(jìn)行早期診斷并及時(shí)干預(yù)，對(duì)提高預(yù)后意義重大。本研究還顯示，血清MCP-1、CCR2單獨(dú)診斷帕金森的AUC分別為0.817、0.781，截?cái)嘀捣謩e為20.57 pg/mL、26.74 ng/mL，而兩者聯(lián)合診斷帕金森的AUC為0.853，其敏感度、特異性可分別高達(dá)85.70%、74.80%，可見兩者聯(lián)合診斷較單獨(dú)診斷價(jià)值提高，提示MCP-1、CCR2可能成為帕金森早期診斷的客觀生物標(biāo)記物。

綜上所述，帕金森患者血清MCP-1、CCR2為高表達(dá)，且與H-Y分期、MoCA評(píng)分有關(guān)，可能用于監(jiān)測(cè)患者病情嚴(yán)重程度，且對(duì)帕金森有一定診斷價(jià)值，可能成為帕金森早期診斷血清標(biāo)記物，以便及時(shí)進(jìn)行干預(yù)，延緩疾病進(jìn)展，但本研究也有一定局限性，后續(xù)將增加縱向研究以佐證結(jié)果。