王麗麗，韓明明

河北省保定市第二中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北保定 072750

純紅細(xì)胞再生障礙性貧血(PRCA)是骨髓紅細(xì)胞系選擇性再生障礙所導(dǎo)致的一組少見綜合征，包括獲得性及先天性兩種類型。臨床治療一般以免疫抑制治療為主，但該治療方法在不同患者中的療效不一[1]。PRCA主要發(fā)病機(jī)制為自身免疫耐受失調(diào)、細(xì)胞免疫功能持續(xù)異常、炎性反應(yīng)等?？扇苄訤as分子(sFas)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、CD4+、CD25+是與PRCA發(fā)生相關(guān)的重要因子[2-3]。T淋巴細(xì)胞具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用，可維持免疫平衡，當(dāng)發(fā)生自身免疫性疾病時(shí)會(huì)出現(xiàn)T淋巴細(xì)胞的功能及數(shù)量異常[4]。本研究探討了促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合環(huán)孢素A治療老年獲得性PRCA的療效，以及對(duì)炎癥因子sFas、TNF-α、IL-2和T淋巴細(xì)胞亞群水平的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2020年4月本院收治的老年獲得性PRCA 患者80例作為研究對(duì)象，采用信封密封法隨機(jī)分為對(duì)照組(給予環(huán)孢素A治療)和研究組(給予促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合環(huán)孢素A治療)，每組各40例。對(duì)照組中男27例，女13例；年齡60～75歲，平均(67.54±6.43)歲；血紅蛋白(Hb)42～80 g/L，平均(55.54±5.55)g /L；網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比0.17%～0.65%，平均(0.25±0.03)%。研究組中男28例，女12例；年齡61～76歲，平均(68.63±6.53)歲；Hb 43～81 g /L，平均(55.66±5.38)g /L；網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比0.16%～0.66%，平均(0.26±0.04)%。兩組患者性別、年齡、Hb、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有患者及家屬均對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡≥60歲；(2)臨床資料完整，治療依從性較高；(3)符合獲得性PRCA診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近6個(gè)月內(nèi)使用過免疫抑制劑、皮質(zhì)類固醇激素；(2)有心、肝、肺、腎等器官功能不全；(3)合并其他血液系統(tǒng)疾??；(4)合并其他具有貧血表現(xiàn)的疾病。

1.3方法 對(duì)照組患者給予環(huán)孢素A(福建科瑞藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字：H10930026)治療，3～5(kg·d)，靜脈滴注，連續(xù)治療10 d，隨后改為口服，120～160 mg/d，并根據(jù)血清膽紅素、肌酐水平及環(huán)孢素A血藥濃度調(diào)整使用劑量，療程為6個(gè)月。研究組患者給予促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合環(huán)孢素A治療，環(huán)孢素A用法與對(duì)照組相同，促紅細(xì)胞生成素(沈陽三生制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字：S20010001)80～120 U/kg，每周2次，皮下注射。每個(gè)月檢測(cè)患者血細(xì)胞比容(Hct)、Hb水平，當(dāng)Hct超過33%或Hb超過100 g/L時(shí)，可減少促紅細(xì)胞生成素劑量，維持劑量為60 U/kg，療程為6個(gè)月。

1.4觀察指標(biāo) (1)比較兩組患者臨床療效，顯效：貧血情況有較大好轉(zhuǎn)，貧血癥狀消失，女性Hb>100 g/L，男性Hb>120 g/L，隨訪3個(gè)月無復(fù)發(fā)；有效：貧血情況逐漸好轉(zhuǎn)，貧血癥狀改善，女性Hb>100 g/L，男性Hb>120 g/L，白細(xì)胞計(jì)數(shù)約為3.5×109/L，隨訪3個(gè)月后病情穩(wěn)定或者無進(jìn)一步惡化；無效：以上標(biāo)準(zhǔn)均未達(dá)到[6]。總有效率=(有效例數(shù)+顯效例數(shù))/總例數(shù)×100%。(2)比較兩組治療前T淋巴細(xì)胞亞群水平。采集空腹外周血2 mL，EDTA抗凝，采用美國BD公司生產(chǎn)的FACS Calibur流式細(xì)胞儀及配套試劑盒檢測(cè)CD4+、CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+/CD4+。(3)比較兩組患者治療前后sFas、TNF-α、IL-2水平。sFas、TNF-α檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，其檢測(cè)水平以A值表示；IL-2檢測(cè)采用放射免疫分析法。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者臨床療效比較 研究組患者治療總有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.988，P<0.05)，見表1。

表1 兩組患者臨床療效比較[n(%)]

2.2兩組患者治療前T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 研究組患者治療前CD4+、CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+/CD4+水平均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組患者治療前T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

2.3兩組患者治療前后sFas、TNF-α、IL-2水平比較 兩組患者治療前sFas、TNF-α、IL-2水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩組患者治療后sFas、TNF-α、IL-2水平均較治療前降低，且研究組均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 兩組患者治療前后sFas、TNF-α、IL-2水平比較

3 討 論

目前，獲得性PRCA的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但有研究顯示其屬于CD4+功能亢進(jìn)的免疫性疾病，且T淋巴細(xì)胞免疫表型、數(shù)量的變化都與其發(fā)病有關(guān)[7-8]。獲得性PRCA患者調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)百分比與患者病情嚴(yán)重程度有一定關(guān)系，Treg可抑制CD4+的活性，導(dǎo)致其分泌的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β、IL-35、IL-10水平均較低[9-10]。

獲得性PRCA患者T淋巴細(xì)胞免疫功能失衡，同時(shí)IL-2、TNF-α等造血調(diào)控因子的分泌不斷增加，這些均可能與其發(fā)病相關(guān)[11]。CD4+CD25+可通過免疫抑制作用抑制自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞的活化，維持免疫功能平衡。自身免疫性疾病中，如特發(fā)性血小板減少性紫癜、重癥肌無力、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、1型糖尿病等均存在CD4+CD25+水平明顯降低。獲得性PRCA患者在發(fā)病初期CD4+CD25+水平均有所下降，但在聯(lián)合治療后患者造血系統(tǒng)功能逐漸恢復(fù)，CD4+CD25+也不斷接近正常水平[12]。CD4+CD25+通過分泌免疫調(diào)節(jié)因子不斷調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞來控制自身的反應(yīng)性，還可直接通過T淋巴細(xì)胞發(fā)揮作用[10]。人體內(nèi)CD4+CD25+水平失衡后，其抑制IL-2的能力會(huì)有所下降，維持免疫耐受的作用也會(huì)下降，體內(nèi)活化T淋巴細(xì)胞增殖，體液免疫亢進(jìn)，最終引起PRCA。本研究中，研究組患者治療前CD4+、CD25+、CD4+CD25+、CD4+CD25+/CD4+水平均低于對(duì)照組，提示老年獲得性PRCA患者存在免疫功能異常。

研究組患者治療總有效率高于對(duì)照組，提示促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合環(huán)孢素A治療老年獲得性PRCA的效果優(yōu)于單獨(dú)使用環(huán)孢素A治療。sFas是細(xì)胞表面的一種凋亡信號(hào)受體，能通過促進(jìn)Fas分子聚合而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，在PRCA患者中呈異常高表達(dá)；IL-2、TNF-α是臨床常見的炎癥因子，當(dāng)機(jī)體免疫功能失衡后，IL-2、TNF-α表達(dá)上調(diào)，可抑制造血，參與粒-單系造血祖細(xì)胞生長(zhǎng)，在PRCA的發(fā)生和發(fā)展中具有重要作用[13]。本研究中兩組患者治療后sFas、TNF-α、IL-2水平均較治療前降低，且研究組均低于對(duì)照組，提示促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合環(huán)孢素A治療老年獲得性PRCA能夠改善患者的造血功能障礙，控制病情發(fā)展。

綜上所述，老年獲得性PRCA患者存在免疫功能失衡，促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合環(huán)孢素A治療老年獲得性PRCA效果佳，治療有效率高，能有效調(diào)節(jié)患者免疫功能，改善造血障礙，值得臨床推廣應(yīng)用。