季 云,巢 蓓,鄭國軍,周萃星，薛 冬,陸 皓△

1.江蘇省常州市第一人民醫(yī)院檢驗科,江蘇常州 213003；2.江蘇省常州市第三人民醫(yī)院檢驗科, 江蘇常州 213001；3.江蘇省常州市第一人民醫(yī)院泌尿外科，江蘇常州 213003

新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是2019 新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)感染引起的以呼吸道病變?yōu)橹鞯膫魅静。⑶铱砂榘l(fā)多器官功能損傷，嚴重者可導(dǎo)致死亡[1]。世界衛(wèi)生組織認為，COVID-19已造成世界范圍內(nèi)的大流行，疫情形勢仍然嚴峻，值得高度重視[2]。目前沒有針對COIVD-19的有效治療藥物，疫苗也處于臨床試驗階段，能做到及時準確的診斷，盡可能收治患者對于疫情控制非常重要[3]。中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布的《新型冠狀病毒感染肺炎的診療方案(試行第七版)》提及的診斷標準中，確診病例在原有核酸檢測和測序基礎(chǔ)上增加血清學(xué)檢測作為依據(jù)。由于血清中的IgM抗體和IgG抗體易受交叉反應(yīng)等影響而出現(xiàn)假陽性，從而影響臨床診斷，因此，需要結(jié)合其他參數(shù)進行聯(lián)合分析。本研究探討血常規(guī)及腎功能參數(shù)在SARS-CoV-2 IgM和IgG抗體陽性患者的鑒別診斷中是否存在一定的意義，有利于臨床快速、準確診斷COVID-19。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取常州市第一人民醫(yī)院2020年3月19-31日門診檢測SARS-CoV-2 IgG和IgM抗體陽性的40例患者作為抗體陽性組，其中男22例，女18例，平均年齡(62.83±9.45)歲；選取抗體檢測均為陰性的55例健康成年人作為健康成人組，其中男26例，女29例，平均年齡(46.3±15.65)歲；另選取COVID-19患者50例作為COVID-19確診組，其中男25例，女25例，平均年齡(41.88±16.78)歲。對3組研究對象的血常規(guī)及腎功能參數(shù)進行比較分析，為臨床鑒別分析SARS-CoV-2 IgM和IgG抗體陽性患者是否為SARS-CoV-2感染假陽性提供一定的參考依據(jù)。本研究通過常州市第一人民醫(yī)院倫理委員會批準，所有研究對象均對本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2試劑與儀器 日本SYSMEX-XN9000系列全自動血細胞分析儀(配套試劑)；美國貝克曼AU5800全自動生化分析儀(配套試劑)；中國深圳新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光分析儀(配套試劑)。

1.3方法 采集所有研究對象安靜狀態(tài)下3 mL EDTA-K2抗凝靜脈血及5 mL含分離膠試管的靜脈血。含分離膠試管的5 mL靜脈血于離心機中4 500 r/min離心5 min，取上清液，于-20 ℃保存。SARS-CoV-2抗體檢測試劑盒由中國深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司提供，采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法，所需血液標本的采集保存處理、檢測程序和結(jié)果判定均按照試劑說明書進行；陽性為檢測結(jié)果≥1.00 AU/mL。50例確診COVID-19患者均采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測SARS-CoV-2核酸，且核酸檢測均為陽性確診。所有患者均行血常規(guī)、血生化及核酸檢測，并予以胸部CT平掃檢查。

2 結(jié) 果

2.1COVID-19確診組與健康成年人組血常規(guī)及生化參數(shù)比較 COVID-19確診組白細胞計數(shù)(WBC)、淋巴細胞(L)及嗜酸性粒細胞(E)計數(shù)均明顯低于健康成年人組，肌酐(Cr)水平明顯高于健康成人組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 COVID-19確診組與健康成人組血常規(guī)及生化參數(shù)比較

2.2診斷COVID-19的ROC曲線分析 ROC曲線分析顯示，WBC、L、E的AUC>0.7，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，具有較好的鑒別效能；腎功能參數(shù)中，Cr在核酸陽性患者中明顯升高，AUC>0.7，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，具有較好的鑒別效能。見圖1、表2。

表2 各指標診斷COVID-19的效能分析

圖1 診斷COVID-19的ROC曲線分析

2.3SARS-CoV-2抗體陽性組與健康成人組血常規(guī)及生化參數(shù)比較 SARS-CoV-2抗體陽性組WBC、E及Cr與健康成年人組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但L明顯低于健康成人組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 SARS-CoV-2抗體陽性組與健康成人組血常規(guī)及生化參數(shù)比較

2.4SARS-CoV-2抗體陽性患者的ROC曲線分析 ROC曲線分析顯示，L的AUC為0.785，而WBC、E及Cr均無較好的鑒別效能。見圖2、表4。

圖2 SARS-CoV-2抗體陽性患者的ROC曲線分析

表4 各指標診斷SARS-CoV-2抗體陽性的效能分析

3 討 論

COVID-19自傳播發(fā)病以來，得到廣泛關(guān)注。如何準確、快速診斷COVID-19，從而有效地對感染者進行隔離，是阻止疫情蔓延的關(guān)鍵[4]。2020年3月3日發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第七版)》新增加了抗體血清學(xué)檢測作為診斷病毒感染確診的另一關(guān)鍵證據(jù)。SARS-CoV-2核酸檢測陽性率低，檢測出現(xiàn)的假陰性結(jié)果與臨床表現(xiàn)不吻合等問題備受關(guān)注[5]。有的SARS-CoV-2感染患者核酸檢測數(shù)次仍為陰性[6]。近來隨著國內(nèi)疫情控制情況的好轉(zhuǎn)，對于無癥狀感染者的認知越發(fā)受到重視[7]。

抗體血清學(xué)檢測與核酸檢測比較，其操作簡便，可實現(xiàn)自動化、大批量分析，已在臨床上廣泛應(yīng)用，因此對其效果進行了分析，從而更好地明確診斷。本研究對常州市第一人民醫(yī)院的40例SARS-CoV-2抗體陽性、核酸檢測陰性的患者總結(jié)發(fā)現(xiàn)，所有患者胸部CT均有肺炎或磨玻璃樣改變，但通過對患者流行病學(xué)及臨床表現(xiàn)進行調(diào)查，所有患者不存在潛在感染SARS-CoV-2的風險。血常規(guī)及生化參數(shù)提示，抗體陽性患者僅僅表現(xiàn)為L降低，可能是由于輕度肺炎造成的。而WBC、Cr等參數(shù)與健康成年人比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究隨訪20例SARS-CoV-2抗體陽性患者，臨床給予抗炎治療后復(fù)查胸部CT，肺部炎癥明顯好轉(zhuǎn)，血清抗體轉(zhuǎn)為陰性。而SARS-CoV-2 感染確診患者的WBC、L及E與健康成年人比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)?？赡茉蛟谟赟ARS-CoV-2感染后細胞因子會大量分泌，而導(dǎo)致白細胞中邊緣池粒細胞增多而循環(huán)池減少，這也與其他學(xué)者的論證報道一致[8]。由此可通過普通的實驗室檢查指標初篩抗體是否為假陽性，以此提高臨床鑒別率。

隨著疫情不斷發(fā)展，對于COVID-19的研究也不斷深入，并且需要更明確的診斷方法。近來有研究認為，SARS-CoV-2抗體檢測的重要意義在于可以與核酸檢查聯(lián)合，提高COVID-19診斷的靈敏度[9]。但本研究仍存在一定的缺陷，主要缺是SARS-CoV-2 感染確診患者及SARS-CoV-2抗體陽性入組病例較少，而且地區(qū)較局限，無法形成一個通用的標準；對于SARS-CoV-2抗體陽性患者未能進行一個長期隨訪來觀察其后期的抗體變化情況。本研究只是回顧了門診患者的血常規(guī)及腎功能的情況，在后續(xù)研究中，會對各種實驗室檢查進行匯總，以獲得一個通用的診斷模型。