韋柯利 黃杰安 袁海寧 劉詩權 鄒 軍 姚 莉 周利艷 于 冰
廣西醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院感染性疾病科 (廣西 南寧, 530000)
乙型肝炎病毒(HBV)是世界范圍內(nèi)流行的感染病毒,中國是HBV感染人群最多的國家[1]。HBV感染主要影響肝細胞的功能,長期的感染狀態(tài)可使肝細胞持續(xù)發(fā)生損傷進而導致肝臟功能減退,乙型肝炎肝硬化和乙型肝炎相關性肝癌是HBV感染患者疾病進展的嚴重臨床結(jié)局[2]。肝臟是人體內(nèi)甲狀腺激素分解代謝的主要場所,肝臟功能代謝異??砷g接影響機體激素水平的變化[3]。近年來不斷有研究表明[4,5],當HBV感染患者出現(xiàn)肝硬化時甲狀腺激素水平會隨之變化,但此類研究主要將甲狀腺激素水平與乙型肝炎肝硬化的程度進行相關性分析,尚無研究將甲狀腺激素水平應用于乙型肝炎肝硬化的鑒別診斷以及乙型肝炎肝硬化失代償期的診斷中。AFP-L3是近年來逐漸應用于臨床的肝臟腫瘤標記物,其在肝癌中的臨床診斷價值已被多項研究證實[6,7],但此類研究未能聯(lián)合甲狀腺激素水平變化進行診斷。本研究旨在明確血清AFP-L3和甲狀腺激素水平在乙型肝炎相關性肝癌鑒別診斷、乙肝肝硬化鑒別診斷及其失代償期的診斷價值,為臨床提供參考。
1.1 一般資料 選取2018年9月至2020年1月于我院診治的慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、乙型肝炎相關肝癌患者各30例,分為慢性肝炎組、肝硬化組、肝癌組,同時選取同期于我院體檢的健康志愿者30例設為對照組。慢性肝炎組男20例,女10例,平均年齡(43.58±13.72)歲;肝硬化組男18例,女12例,平均年齡(45.44±12.99)歲;肝癌組男21例,女9例,平均年齡(46.73±13.35)歲;對照組男20例,女10例,平均年齡(45.82±13.07)歲;納入標準[8,9]:①HBsAg陽性半年以上,符合慢性乙型肝炎的臨床診斷標準;②結(jié)合臨床表現(xiàn)、病史、檢查和檢驗結(jié)果,慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、乙型肝炎相關肝癌患者的診斷均明確;③患者均接受血清AFP-L3水平及甲狀腺激素水平檢驗;④患者知情本研究內(nèi)容并簽署知情同意書。排除標準[10,11]:①合并嚴重的甲狀腺疾病或高血壓、冠心病、糖尿病等慢性疾病患者;②合并血液系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)以神經(jīng)系統(tǒng)等嚴重系統(tǒng)疾病患者;③合并心、肝、腎、腦等重要組織臟器功能障礙患者。本研究經(jīng)我院倫理學會批準進行。
4組患者的性別、年齡等一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
1.2 方法 所有受試對象均接受血清AFP-L3水平及甲狀腺激素水平檢驗,且于患者手術或肝穿刺前進行相關指標檢驗。采集患者清晨空腹靜脈血2管,每管3 ml,并置于高速離心機以3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min,取上清液及時送檢,不滿足及時送檢條件的先保存于-80℃冰箱冷凍待檢。取一管血清樣品通過微量離心柱法獲取血清AFP-L3,并采用磁微?;瘜W發(fā)光免疫分析法檢測血清AFP-L3含量,儀器為全自動化學發(fā)光免疫分析儀(型號:MQ60 Pro,北京熱景生物技術股份有限公司),并選用配套AFP-L3測定試劑盒。用化學發(fā)光法檢測血清甲狀腺激素水平,包括血清游離T3(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)水平、血清總T3(TT3)以及總甲狀腺素(TT4)水平,儀器為貝克曼全自動生物化學儀(型號:UniCel DxI 800),并選用配套試劑盒。所有實驗操作均嚴格按照試劑盒的要求進行,并嚴格遵守實驗室規(guī)則。
慢性肝炎組、肝硬化組、肝癌組患者在明確診斷后入組,對照組受試對象在明確無乙型肝炎相關疾病后入組,利用Excel表格建立臨床資料數(shù)據(jù)庫。將存在臨床資料缺失的患者剔除,將最終入組的有效臨床數(shù)據(jù)納入SPSS統(tǒng)計學軟件,并進行描述性統(tǒng)計及相關統(tǒng)計分析。
1.3 觀察指標 ①4組人員血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較;②乙型肝炎肝硬化代償期、失代償期患者血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較;③血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎相關肝病鑒別診斷中的價值;④血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎肝硬化進展程度評價中的價值。
2.1 血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎相關肝病鑒別診斷中的價值 采用血清AFP-L3、FT3水平診斷肝癌。血清AFP-L3的敏感度、特異度、PPV、NPV、準確度以及AUC均高于血清FT3。ROC曲線分析提示用血清AFP-L3、FT3水平診斷肝癌的最優(yōu)臨界值分別為27.8 IU/mL、3.3 pmol/L,AUC分別為0.763(0.621,0.920)、0.628(0.549,0.879),聯(lián)合檢測的AUC(95% CI) = 0.835(0.694,0.956),聯(lián)合診斷的AUC顯著高于單一指標診斷(Z=5.928,P=0.001)。見表1。
表1 血清AFP-L3、FT3水平診斷肝癌的效能
采用血清AFP-L3、FT3、FT4、TT3、TT4水平診斷肝硬化,納入對照組、慢性肝炎組以及肝硬化組進行分析。ROC曲線分析提示用血清AFP-L3、FT3具有肝硬化診斷價值(AUC>0.5),血清FT4、TT3、TT4水平無診斷價值(AUC<0.5)。血清AFP-L3、FT3水平診斷肝硬化的最優(yōu)臨界值分別為8.9 IU/mL、3.7 pmol/L,AUC分別為0.721(0.601,0.912)、0.523(0.512,0.890),聯(lián)合檢測的AUC(95% CI) = 0.758(0.532,0.884)。見表2。
表2 血清AFP-L3及甲狀腺激素水平診斷肝硬化的效能
2.2 血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎肝硬化進展程度評價中的價值 采用血清AFP-L3、FT3作為乙型肝炎肝硬化進展程度評估的指標。ROC曲線分析提示用血清AFP-L3、FT3水平診斷乙型肝炎肝硬化失代償?shù)淖顑?yōu)臨界值分別為11.5 IU/mL、3.6 pmol/L,AUC分別為0.625(0.503,0.712)、0.531(0.420,0.698),聯(lián)合檢測的AUC(95% CI)=0.689(0.521,0.768),聯(lián)合診斷的AUC顯著高于單一指標診斷(Z=3.21,P=0.03)。見表3。
表3 血清AFP-L3、FT3水平診斷乙型肝炎肝硬化失代償?shù)男?/p>
2.3 4組人員血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較 見表4。
2.4 乙型肝炎肝硬化代償期、失代償期患者血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較 見表5。
表4 4組人員血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較
表5 乙型肝炎肝硬化代償期、失代償期患者血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較
HBV感染后肝臟病變呈慢性發(fā)展,及早診斷乙型肝炎相關性肝臟疾病對于患者的早期治療具有重要意義[12]。目前臨床對于乙型肝炎相關性肝癌、乙型肝炎肝硬化的早期診斷主要依靠實驗室檢查以及影像檢查進行綜合評價[13],實驗室檢查是目前最為便捷的診斷方式之一,且能夠有效降低患者的診治成本。血清AFP檢查是肝癌早期篩查的重要手段,但AFP的靈敏度和特異性不夠高,這可能與良性肝病患者也可表達中等濃度的AFP有關。根據(jù)糖鏈不同,AFP分為L1、L2、L3共3種類型,其中AFP-L3主要由肝癌細胞合成,肝癌患者AFP-L3表達顯著增高;且乙型肝炎肝硬化患者血清AFP-L3水平較正常健康者表達顯著增加,因此在肝臟惡性病變的診斷與鑒別診斷中具有一定的參考價值[6,7]。本研究結(jié)果提示血清AFP-L3及FT3、FT4、TSH、TT3、TT4水平在乙型肝炎相關疾病中具有一定檢測價值?;诖耍狙芯窟M行了后續(xù)的診斷價值分析。
本研究結(jié)果證實了血清AFP-L3、FT3均具有診斷價值,血清AFP-L3的診斷效能更高,且聯(lián)合診斷的效能高于單一指標診斷。呂春燕[14]的研究結(jié)果表明,原發(fā)性肝癌患者血清AFP-L3顯著高于對照組和乙型肝炎肝硬化組。本研究結(jié)果顯示肝癌組患者血清AFP-L3顯著高于慢性肝炎組、肝硬化組以及對照組,與呂春燕等[14]人的研究結(jié)果相符。楊曉婷等[15]研究認為慢性乙型肝炎患者的血清甲狀腺激素水平表達明顯下降,隨著疾病的進展其甲狀腺激素水平下降越明顯。本研究結(jié)果與楊曉婷的研究結(jié)論相符,本研究在明確了血清AFP-L3、FT3在乙型肝炎相關性肝癌鑒別診斷中的可能后并非簡單采用相關性分析,而是進一步采用了ROC曲線分析明確其價值,聯(lián)合檢測AFP-L3、FT3水平能夠發(fā)揮最大診斷優(yōu)勢。分析其原因是AFP-L3主要來源于癌變肝細胞,而FT3水平在肝臟病變后仍有一定的代償,因此血清AFP-L3比FT3具有更高的敏感度;而甲狀腺激素水平受到機體多方面調(diào)節(jié),肝癌與其他肝臟疾病相比肝臟功能受到影響更大,因此其在肝癌與其他肝臟疾病診斷中有一定優(yōu)勢;結(jié)合血清AFP-L3與FT3能夠進一步提高診斷的敏感度和特異度[16,17]。
在肝硬化診斷及肝硬化失代償期診斷中,本研究結(jié)果證實了血清AFP-L3、FT3是主要的診斷標記物,且聯(lián)合檢測的價值更高。薛麗寒等[18]的研究結(jié)果證實,乙型肝炎肝硬化患者血清TT3、FT3在病情評估中具有重要作用,與本研究結(jié)果相符。本研究采用血清AFP-L3、FT3、FT4、TT3、TT4水平診斷肝硬化,由于肝癌組已進行診斷方案的探究,故只納入了對照組、慢性肝炎組以及肝硬化組進行分析。研究結(jié)果顯示ROC曲線分析提示血清AFP-L3、FT3具有肝硬化診斷價值,而血清FT4、TT3、TT4水平無診斷價值,與薛麗寒研究結(jié)果不同之處在于本研究患者中血清TT3水平并未表現(xiàn)出診斷價值。本研究結(jié)果顯示,乙型肝炎相關性肝癌和肝硬化患者均可表達AFP-L3,但肝癌患者血清AFP-L3的表達量較大,而肝硬化患者亦存在少量表達,提示肝癌和肝硬化作為慢性乙型肝炎的惡性進展結(jié)局其均會高表達AFP-L3,而肝癌的惡性程度更高,其表達水平顯著增加[19,20]。
綜上所述,血清AFP-L3和FT3聯(lián)合檢測在乙型肝炎相關性肝癌、肝硬化的診斷中均具有價值,可在臨床參考應用。但本研究在乙型肝炎肝硬化失代償期診斷中,納入的患者數(shù)偏少,有待進一步擴大樣本量進行更深入的研究。