張 旭，李 闖，黃 璇，蔣桂韜，李昊幫，戴求仲*

（1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究室，湖南長(zhǎng)沙 410131；2.湖南家禽安全生產(chǎn)工程技術(shù)研究中心，湖南長(zhǎng)沙 410128）

硒是人和動(dòng)物必需的微量元素之一，硒與機(jī)體的生理功能關(guān)系密切，具有促進(jìn)和調(diào)節(jié)人體免疫、抗腫瘤、抗氧化等許多重要的生理功能[1]。硒存在于動(dòng)物體的多種功能蛋白、酶和肌肉細(xì)胞中，影響并維持著機(jī)體的正常代謝和免疫[2]。硒是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）的組成成分。硒的生理功能主要是通過(guò)GSH-Px 發(fā)揮抗氧化作用，可以將產(chǎn)生的氫過(guò)氧化物或過(guò)氧化氫迅速分解或還原成無(wú)害的醇類(lèi)或水，防止氫過(guò)氧化物在細(xì)胞內(nèi)堆積，保護(hù)細(xì)胞膜[3]。作為飼料添加劑的硒分為無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒2 種類(lèi)型，無(wú)機(jī)硒主要有硒酸鹽和亞硒酸鹽，有機(jī)硒主要有酵母硒、硒代氨基酸、硒多糖等。

亞硒酸二葡萄糖酯俗稱(chēng)有機(jī)糖硒，是一種有機(jī)硒。在催化劑作用下，將酵母多糖與亞硒酸鈉通過(guò)生物與化學(xué)的反應(yīng)轉(zhuǎn)化為酵母多糖硒，再通過(guò)生物降解，即在生物酶的催化下，將酵母多糖硒水解為葡萄糖和亞硒酸二葡萄糖酯，而在此條件下Se-O 鍵不能被淀粉酶催化水解，通過(guò)膜分離，得到亞硒酸二葡萄糖酯純品。目前，未見(jiàn)亞硒酸二葡萄糖酯在動(dòng)物生產(chǎn)中應(yīng)用的研究報(bào)道。有研究者用蔗糖、糊精、糖醇與亞硒酸鈉等硒化試劑反應(yīng)合成蔗糖亞硒酸酯、糊精亞硒酸酯和糖醇亞硒酸酯，并發(fā)現(xiàn)與亞硒酸鈉相比，糊精亞硒酸酯有更好的抗氧化作用和抑制腫瘤活性的作用，蔗糖亞硒酸酯更易被動(dòng)物吸收，且毒性遠(yuǎn)小于亞硒酸鈉[4-6]。

本試驗(yàn)旨在探討飼糧中添加不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)產(chǎn)蛋后期臨武鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)和血液生化指標(biāo)的影響，為亞硒酸二葡萄糖酯在蛋鴨飼料生產(chǎn)中科學(xué)應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 亞硒酸二葡萄糖酯為米黃色粉末，硒含量2 000 mg/kg，由湖南諾維信生物科技有限公司生產(chǎn)并提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼糧 試驗(yàn)選用產(chǎn)蛋率接近的50 周齡健康臨武鴨240 只，將試驗(yàn)鴨隨機(jī)分為5 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8 只。對(duì)照組在基礎(chǔ)飼糧中添加0.2 mg/kg（以硒計(jì)）的無(wú)機(jī)硒（亞硒酸鈉）。試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加50、100、150、200 g/t 亞硒酸二葡萄糖酯，以硒計(jì)分別為0.1、0.2、0.3、0.4 mg/kg（各組以此硒劑量表示組別）?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。預(yù)試期7 d，試驗(yàn)期42 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)蛋鴨分上、下兩層階梯籠養(yǎng)，每籠1 只，各重復(fù)均勻分布于鴨舍。自由采食與飲水，自然光照與人工光照、自然通風(fēng)和橫向負(fù)壓通風(fēng)相結(jié)合。每日清理鴨糞和撿蛋各2 次，按常規(guī)進(jìn)行欄舍消毒和日常管理。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 試驗(yàn)期間每天按重復(fù)記錄產(chǎn)蛋總數(shù)、總蛋重、采食量、軟破蛋（軟殼蛋、破殼蛋）數(shù)、次品蛋（畸形蛋、薄殼蛋、沙殼蛋）數(shù)和死淘數(shù)，試驗(yàn)結(jié)束后以組為單位統(tǒng)計(jì)平均蛋重、日產(chǎn)蛋量、產(chǎn)蛋率、合格蛋率、軟破蛋率、次品蛋率、死淘率、平均日采食量和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì) 在試驗(yàn)期的第21 天和42 天抽取鴨蛋樣品進(jìn)行蛋品質(zhì)分析，分別從每重復(fù)中取2 枚蛋用于測(cè)定蛋黃比率、蛋白比率、蛋殼厚度（蛋殼厚度測(cè)定儀）、蛋殼強(qiáng)度（蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀）、蛋形指數(shù)（游標(biāo)卡尺測(cè)量法）、蛋黃顏色（蛋品質(zhì)分析儀）及哈夫單位（蛋品質(zhì)分析儀）。在試驗(yàn)期第42 天，從每重復(fù)中抽取1 枚蛋放置于4℃冰箱中貯藏90 d 后測(cè)定鴨蛋的哈夫單位。以組為單位進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.4.3 血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo) 在試驗(yàn)第42 天從每重復(fù)中選取試驗(yàn)蛋鴨1 只，空腹12 h 后翅下靜脈采血5 mL，靜置1 h 后于4 000 r/min 離心10 min，分離血清，于-20℃冰箱中保存?zhèn)錅y(cè)。采用全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清中總膽固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、尿素（Urea）、尿酸（UA）和葡萄糖（GLU）的含量。采用試劑盒法測(cè)定血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、過(guò)氧化氫酶（CAT）的量和總抗氧化能力（T-AOC），試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010 軟件進(jìn)行初步處理，用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，顯著水平為P<0.05，差異顯著的做Duncan's 多重比較。試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨生產(chǎn)性能的影響 由表2可見(jiàn)，添加亞硒酸二葡萄糖酯的各試驗(yàn)組采食量、產(chǎn)蛋率和料蛋比等生產(chǎn)性能指標(biāo)與對(duì)照組無(wú)顯著差異。

2.2 亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋品質(zhì)的影響 由表3 可見(jiàn)，亞硒酸二葡萄糖酯試驗(yàn)組蛋雞21 d 和42 d 所產(chǎn)蛋的蛋白、蛋黃、蛋殼比率、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋黃顏色和哈夫單位均與對(duì)照組差異不顯著。將試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天所產(chǎn)蛋在4℃貯藏3 個(gè)月后測(cè)定哈夫單位，4 個(gè)亞硒酸二葡萄糖酯組蛋的哈夫單位分別較對(duì)照組高125.89%、105.02%、123.83%和146.44%（P<0.01）。

2.3 亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨血清生化指標(biāo)的影響 如表4 所示，添加亞硒酸二葡萄糖酯與添加亞硒酸鈉的對(duì)照組相比，有降低蛋鴨血清TCH 含量的趨勢(shì)（P=0.067）；0.3、0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清ALT 含量分別較對(duì)照組高出82.80% 和94.62%（P<0.05）；0.1～0.3 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清ALP 含量與對(duì)照組差異不顯著，而0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清ALP 含量較對(duì)照組高45.08%（P<0.01）。添加亞硒酸二葡萄糖酯試驗(yàn)組的其他血液生化指標(biāo)與對(duì)照組差異不顯著。

2.4 亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響如表5 所示，4 個(gè)亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清GSHPx 活力有提高趨勢(shì)（P=0.07），其他抗氧化指標(biāo)與對(duì)照組差異不顯著。

3 討 論

3.1 亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響硒作為動(dòng)物體必需的一種微量元素，參與機(jī)體的多種生物學(xué)功能。大多數(shù)研究結(jié)果表明，飼料中硒添加量為0.3 mg/kg 以下時(shí)，對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)無(wú)顯著影響[7-11]。當(dāng)硒添加量超過(guò)0.5 mg/kg 時(shí)，會(huì)對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)產(chǎn)生顯著影響，但影響結(jié)果不盡相同。李靜等[8]研究認(rèn)為，添加0.5 mg/kg 的酵母硒可以顯著降低45～50周齡海賽克斯蛋雞的采食量、提高產(chǎn)蛋率、降低料蛋比；而添加0.5 mg/kg 的亞硒酸鈉會(huì)使料蛋比顯著提高[9]。楊玉等[10]也得出類(lèi)似結(jié)論，添加0.20～1.00 mg/kg 的酵母硒顯著提高了69 周齡海蘭褐蛋雞的產(chǎn)蛋率、降低了料蛋比，并且添加0.60 mg/kg 以上的酵母硒顯著提高了蛋殼強(qiáng)度和蛋殼厚度。

表2 不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨生產(chǎn)性能的影響

表3 不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨蛋品質(zhì)的影響

表4 飼糧添加不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨血清生化指標(biāo)的影響

表5 飼糧添加不同水平亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響

關(guān)于硒對(duì)蛋鴨影響的研究較少。王向榮等[12]在29周齡產(chǎn)蛋臨武鴨飼糧中分別添加0.3 mg/kg 酵母硒或亞硒酸鈉，對(duì)臨武鴨的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)無(wú)顯著影響。黃璇等[13]研究表明，在29 周齡產(chǎn)蛋高峰期臨武鴨蛋鴨的基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.10～0.80 mg/kg 酵母硒對(duì)蛋鴨產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)各指標(biāo)均無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對(duì)照組相比，在蛋鴨飼糧中添加0.1～0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)無(wú)顯著影響，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯能夠提高鮮鴨蛋在貯藏3 個(gè)月后的哈夫單位，即添加亞硒酸二葡萄糖酯能夠延緩鮮鴨蛋在貯藏過(guò)程中哈夫單位的下降，延緩鮮鴨蛋品質(zhì)下降。相關(guān)結(jié)果亦表明，飼糧中添加酵母硒等有機(jī)硒能夠減慢雞蛋哈夫單位的下降速度，可改善貯藏雞蛋的新鮮度，延長(zhǎng)雞蛋的貨架期[14-15]；飼糧中添加納米硒和酵母硒還能夠極顯著延緩鵪鶉蛋在儲(chǔ)藏過(guò)程中哈夫單位下降[16]。

鮮蛋在貯藏過(guò)程中，濃厚蛋白逐漸減少，稀薄蛋白逐漸增加，濃厚蛋白高度隨之下降，而哈夫單位是由濃厚蛋白高度計(jì)算而得，即HU=100lg（H－1.7W0.37+7.6）（H 為蛋白高度，W 為蛋重），故哈夫單位會(huì)隨濃厚蛋白高度的下降而降低。濃厚蛋白的減少和變稀可能與卵黏蛋白的解離及卵黏蛋白溶菌酶復(fù)合物的解離有關(guān)。硒在體內(nèi)以硒半胱氨酸的形式存在于近30 種蛋白質(zhì)中，含硒半胱氨酸的蛋白質(zhì)稱(chēng)為硒蛋白。硒蛋白參與機(jī)體的各項(xiàng)生命活動(dòng)，目前已被發(fā)現(xiàn)的硒蛋白有數(shù)十種，生物體的大部分硒蛋白都表現(xiàn)出抗氧化功能，它們?cè)谏锕δ艿母鱾€(gè)領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用，體內(nèi)大部分硒蛋白的水平與飲食攝入的硒含量呈正相關(guān)[17]。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶是重要的含硒抗氧化蛋白，能夠降低細(xì)胞中過(guò)氧化氫的含量，保護(hù)細(xì)胞膜[2]。含硒抗氧化蛋白的增加有利于保持細(xì)胞膜完整，減少濃厚蛋白中卵黏蛋白和卵黏蛋白溶菌酶復(fù)合物的解離，從而使蛋白高度得以保持，哈夫單位下降緩慢。本研究中，飼糧添加硒能夠延緩哈夫單位的下降，可能與含硒抗氧化蛋白降低過(guò)氧化物含量、保護(hù)細(xì)胞膜的功能有關(guān)。

3.2 亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對(duì)照組相比，在產(chǎn)蛋后期蛋鴨飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯后蛋鴨血清中TCH 含量有降低趨勢(shì)。有研究表明，添加硒能夠影響小鼠體內(nèi)膽固醇酯的代謝[18]，納米硒能夠顯著降低小鼠血清TCH、TG 和LDL-C 含量[19]，補(bǔ)充硒能夠降低血清膽固醇的機(jī)理可能和膽固醇的合成代謝有關(guān)，異戊烯焦磷酸（IPP）是膽固醇合成代謝的中間產(chǎn)物，也是一些硒蛋白的合成前體，機(jī)體內(nèi)硒增加會(huì)競(jìng)爭(zhēng)抑制而降低IPP 含量，進(jìn)而降低膽固醇合成[20-21]。本研究表明，亞硒酸二葡萄糖酯對(duì)蛋鴨血清膽固醇的降低效果好于亞硒酸鈉。

GSH-Px 是含硒抗氧化蛋白。本研究發(fā)現(xiàn)，與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對(duì)照組相比，在產(chǎn)蛋后期飼糧中添加0.1～0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯后蛋鴨血清中GSH-Px 活力有升高的趨勢(shì)，其抗氧化效果好于亞硒酸鈉。在蛋鴨、蛋雞、鵪鶉和蛋鴿飼糧中添加酵母硒或納米硒同樣發(fā)現(xiàn)血清GSH-Px 活性顯著提高[6,9,15-16]。

本研究發(fā)現(xiàn)，0.1～0.4 mg/kg 亞硒酸二葡萄糖酯組蛋鴨血清的T-AOC 和T-SOD 活性與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉的對(duì)照組差異不顯著。而一些研究者認(rèn)為，在鵪鶉飼糧中添加0.2、0.4 mg/kg 酵母硒或納米硒，在蛋鴿飼糧中添加0.4、0.5 mg/kg 納米硒，能夠顯著提高鵪鶉和蛋鴿血清的T-AOC 和T-SOD 活性[15-16]；在蛋鴨飼糧中添加0.4、0.8 mg/kg 酵母硒，能夠顯著提高蛋鴨血清T-SOD活性[10]。這些研究結(jié)果說(shuō)明，亞硒酸二葡萄糖酯和亞硒酸鈉對(duì)機(jī)體血清T-AOC 和T-SOD 活性影響效果接近。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)亞硒酸二葡萄糖酯添加量為0.3、0.4 mg/kg 時(shí)，產(chǎn)蛋后期蛋鴨血清中ALT 活性顯著增加，添加量為0.4 mg/kg 時(shí)ALP 活性也顯著增加，而ALT 和ALP 活性的提高均與肝臟問(wèn)題相關(guān)[22-23]，這也提示當(dāng)亞硒酸二葡萄糖酯添加量在0.3 mg/kg（以硒計(jì)）以上時(shí)，會(huì)增加肝臟代謝的負(fù)擔(dān)。因此，亞硒酸二葡萄糖酯在蛋雞飼糧中的推薦使用量為0.2 mg/kg（以硒計(jì)）。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)條件下，蛋鴨飼糧中添加0.1～0.4 mg/kg（以硒計(jì)）亞硒酸二葡萄糖酯與添加0.2 mg/kg 亞硒酸鈉對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋鴨生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響無(wú)顯著差異，能夠延緩鮮鴨蛋在貯藏過(guò)程中哈夫單位的下降，有利于蛋保持新鮮；亞硒酸二葡萄糖酯作為硒補(bǔ)充劑在蛋鴨飼糧中推薦添加量為0.2 mg/kg（以硒計(jì)）。