張學(xué)鵬 李 騰 王 彪 劉 晴 劉涵瑜 陶志強 隋 鵬

（1中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，100193，北京；2中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部作物生理生態(tài)重點實驗室，100081，北京）

目前，全球的地表溫度比上個世紀平均高出0.6℃[1]，預(yù)計到21世紀末，全球平均氣溫將上升0.3℃～4.8℃，糧食作物遭受的高溫脅迫天氣越來越頻繁，這對世界糧食安全是重大挑戰(zhàn)[2]。玉米是全球重要的糧食作物之一，玉米幾乎整個生育階段均處于炎熱夏季，極易受到高溫脅迫的影響。因此明確高溫脅迫對玉米生長的影響機理，對于應(yīng)對未來全球氣候持續(xù)變暖下玉米的穩(wěn)定生產(chǎn)意義重大。

國外目前有大量關(guān)于玉米高溫脅迫閾值的研究。Schlenker和Roberts[3]分析美國玉米產(chǎn)量顯示，當(dāng)日最高溫大于29℃時玉米減產(chǎn)。Lobell等[4]對撒哈拉以南非洲玉米的研究表明，當(dāng)日最高溫超過30℃時，氣溫每升高1℃玉米百粒重減少1%。過去50年來法國玉米產(chǎn)量受日最高溫的影響要大于降雨的影響，其中累積日最高溫大于32℃較多天數(shù)的年份與該年份減產(chǎn)趨勢吻合[5]。與玉米同為C4作物的高粱籽粒產(chǎn)量、收獲指數(shù)和花粉活力的最適溫度是22℃～32℃，生物量、葉片凈光合速率（Pn）和籽粒大小的最適溫度分別是30℃～40℃、34℃～44℃和26℃～36℃[6]。于振文[7]總結(jié)了玉米不同生育階段的高溫脅迫閾值：播種至出苗期、出苗至抽雄期、抽雄至吐絲期和吐絲至成熟期分別為31℃、33℃、35℃和33℃。

葉片是玉米形成光合產(chǎn)物的主要“源”，目前已經(jīng)有大量關(guān)于葉片光反應(yīng)和暗反應(yīng)階段對高溫脅迫響應(yīng)的研究。高溫脅迫擾亂了光系統(tǒng)Ⅱ（PSⅡ）的電子傳遞和光化學(xué)效率（Fv/Fm）[8]。高溫條件下，PSⅡ活性可能降低，甚至部分停止，導(dǎo)致電子轉(zhuǎn)移受限制[9]。Faria等[10]報道，高溫降低了光合作用CO2的固定，降低了光合速率，導(dǎo)致減產(chǎn)。高溫脅迫條件下，氣孔導(dǎo)度（Gs）下降，胞間CO2濃度（Ci）上升[11]，葉片的光合作用過程遭受明顯破壞，且Pn的降低并非是由于高溫引起氣孔關(guān)閉導(dǎo)致CO2的吸收量下降引起的，而是由于高溫導(dǎo)致葉片光合器官（如葉綠體）受到破壞所致[12-13]。高溫脅迫下，云杉的Gs下降是導(dǎo)致Pn下降的一個主要原因，因為Gs下降引起Ci下降[11，14]。雖然光合作用對高溫脅迫響應(yīng)的研究已經(jīng)比較成熟，但仍缺乏對于高溫脅迫閾值附近光合作用的響應(yīng)研究。

因此，本研究在精準控溫人工氣候室，設(shè)置不同梯度的日最高溫，研究不同程度的高溫脅迫對玉米葉片光合作用光反應(yīng)和暗反應(yīng)階段的影響，同時結(jié)合氣孔和葉綠體的表型結(jié)構(gòu)變化，明確玉米葉片“源”在拔節(jié)期的高溫脅迫閾值，為作物高溫脅迫閾值的研究提供支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗地點與材料

試驗于2019年在中國農(nóng)業(yè)大學(xué)吳橋?qū)嶒炚救斯ぶ悄軞夂蚴抑羞M行。選用金海5號作為試驗材料，盆栽種植。玉米于4月1日播種于育苗杯中，每杯播3粒精選種子，放置于培養(yǎng)箱中，每天8h光照，溫度為30℃/25℃（晝/夜），育苗杯中土壤水分保持在70%～80%。玉米于4月4日出苗后3d移栽入花盆中，花盆規(guī)格：內(nèi)徑×高度=23cm×26.5cm?；?fù)合肥（N∶P2O5∶K2O=23∶15∶18）4g/盆，花盆中土壤水分保持在70%～80%。于V3～V5期定苗，每盆留1株長勢良好的玉米。于5月6日追施復(fù)合肥（N∶P2O5∶K2O=23∶15∶18）4g/盆。

1.2 試驗設(shè)計

于5月14日（V8期）-23日，將盆栽移至4間不同溫度的人工智能氣候室中進行連續(xù)10d的控溫處理，人工氣候室太陽光透射率達85%～90%，8∶00-18∶00模擬大田溫度變化進行溫度設(shè)置，其余時間開風(fēng)機通風(fēng)保持與外界溫度一致，具體溫度設(shè)置見表1。人工氣候室實際控溫效果如圖1所示?？販卦囼炂陂g每天隨機調(diào)整盆栽的位置，避免光照不均勻帶來的影響。結(jié)束后將每個處理剩余的盆栽樣品移至人工氣候室外繼續(xù)生長。于5月30日的10∶00（處理結(jié)束后7d）測定不同溫度處理后植株的恢復(fù)狀況。

表1 人工氣候室8∶00-18∶00溫度設(shè)置Table 1 Temperature of climate room from 8∶00-18∶00 in experiment conducted ℃

圖1 人工氣候室不同處理的24h氣溫變化Fig.1 Changes of temperature in climate room under different treatments

1.3 測定項目與方法

1.3.1 葉綠素?zé)晒?于2019年5月13日的10∶00、5月14日的14∶00和15∶00、5月16日、5月19日和5月23日的15∶00，以及5月30日10∶00（處理結(jié)束后1周），每個處理選取3株長勢一致玉米的最新完全展開葉片，暗適應(yīng)15min，采用德國WALZ公司生產(chǎn)的Mini-PAM葉綠素?zé)晒鈨x測定葉綠素?zé)晒鈪?shù)，包括潛在PSⅡ最大光化學(xué)量子產(chǎn)量（Fv/Fm）、PSⅡ?qū)嶋H光化學(xué)量子產(chǎn)量Y（Ⅱ）、光化學(xué)猝滅（qL）和非光化學(xué)猝滅（NPQ）。

1.3.2 光合作用 測定時間及取樣同1.3.1，利用Li-6400（Li-Cor Inc.，Lincoln，美國）測定Pn、Gs、Ci以及蒸騰速率（Tr）。

1.3.3 葉片氣孔掃描電鏡觀察 于2019年5月14日（處理1d）和5月23日（處理10d）的15∶00取新鮮葉片，擦凈表面污物，切取5mm×5mm的方塊置于2.5%戊二醛溶液中固定2h以上以備觀察。觀察前樣品用0.1mol/L磷酸緩沖液（pH=7.4）漂洗3次，每次15min，然后在室溫固定1～2h。依次經(jīng)過30%、50%、70%、80%、90%、95%和100%酒精梯度脫水，每次15min，然后用乙酸異戊酯處理15min。經(jīng)CO2臨界點干燥，將樣本緊貼于導(dǎo)電碳膜雙面膠上放入離子濺射儀噴金30s，將其置于掃描電鏡下觀察葉片背面氣孔開閉情況[15]。

1.3.4 葉片細胞透射電鏡觀察 采樣時間同1.3.3，取新鮮葉片，擦凈表面污物，切取1mm×1mm的方塊置于2.5%戊二醛溶液中固定2h以上以備觀察。觀察前樣品用0.1mol/L PBS磷酸緩沖液（pH=7.4）漂洗3次，每次15min，然后在室溫條件下固定5h，依次經(jīng)過30%、50%、70%、80%、90%、95%和100%酒精脫水，每次15min。然后轉(zhuǎn)入100%丙酮，15min后轉(zhuǎn)入含有無水硫酸鈉的丙酮，15min后用丙酮和樹脂等體積的混合液浸透2h，最后轉(zhuǎn)入純樹脂中包埋、聚合和修塊，用超薄切片機切片，厚度約為70nm，經(jīng)鈾鉛雙染色（2%醋酸鈾飽和酒精溶液，枸櫞酸鉛，各染色15min），切片置于室溫干燥過夜，用透射電鏡觀察拍照[15]。

1.4 數(shù)據(jù)處理和分析

使用Excel 2013對數(shù)據(jù)進行初步歸納整理。使用SPSS 18.0進行統(tǒng)計分析，包括單因素方差分析。使用SigmaPlot 12.0作圖。

2 結(jié)果分析

2.1 不同溫度處理對光反應(yīng)階段的影響

由圖2可以看出，38℃處理下PSⅡ的Fv/Fm整體上顯著低于其他處理，F(xiàn)v/Fm值在處理3、6和10d時均小于0.80，其他處理基本一致，F(xiàn)v/Fm值均大于0.80；控溫期間，各處理的Fv/Fm整體呈逐漸降低趨勢，處理結(jié)束后7d，38℃顯著回升，F(xiàn)v/Fm值大小與其他處理基本一致且無顯著差異。38℃處理Y(Ⅱ)整體也顯著低于其他處理，32℃處理也顯著限制電子傳遞。qL在控溫處理期間整體呈現(xiàn)隨溫度升高而降低的趨勢，32℃和34℃處理呈先升高后降低趨勢，而36℃和38℃處理呈逐漸降低趨勢；處理結(jié)束后，36℃和38℃處理顯著回升?？販靥幚砥陂gNPQ整體呈現(xiàn)隨溫度升高而升高的趨勢，32℃、34℃和36℃處理呈逐漸降低趨勢，而38℃處理呈先升高后降低趨勢，且控溫期間顯著高于其他處理；處理1h處，38℃處理顯著低于其他處理，而處理持續(xù)2h后NPQ快速升高且顯著高于其他處理。

圖2 不同溫度處理下玉米葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)變化Fig.2 Changes of chlorophyll fluorescence parameters of maize leaf under different temperature treatments

2.2 不同溫度處理對暗反應(yīng)階段的影響

由圖3可以看出，32℃處理下葉片的Pn在處理期間無明顯變化，34℃、36℃和38℃處理均呈先降低后升高再降低趨勢。相比處理前，經(jīng)過持續(xù)10d 38℃處理后的Pn顯著低于其他處理。處理結(jié)束后7d，34℃、36℃和38℃處理Pn相比處理10d時均回升，且34℃和36℃處理呈顯著升高，均與32℃處理的Pn基本一致，而38℃處理顯著低于其他處理。Gs和Tr與Pn的變化基本一致，38℃處理在10d處的Gs和Tr均顯著低于其他處理，且在處理結(jié)束后7d也有顯著回升，但是仍顯著低于其他處理。36℃處理的Ci在處理前6d基本與Gs的變化一致，處理末期與Gs的變化相反，表明持續(xù)10d的36℃處理Pn會由于非氣孔限制因素而降低，光合反應(yīng)中心受損。38℃處理的Ci變化趨勢與Pn、Gs以及Tr均呈相反趨勢，表明短期38℃處理的Pn會由于非氣孔限制因素而降低，光合反應(yīng)中心在短期內(nèi)就會被破壞且難以修復(fù)。

圖3 不同溫度處理下葉片光合作用參數(shù)變化Fig.3 Changes of photosynthetic parameters of maize leaves under different temperature treatments

2.3 不同溫度處理對葉片氣孔的影響

采用掃描電鏡對玉米葉片的下表皮和氣孔進行觀察，結(jié)果（圖4）表明，32℃處理1d和10d氣孔基本都呈完全開放狀態(tài)，表皮細胞鼓起，液泡水分飽滿。34℃處理1d時氣孔幾乎呈完全關(guān)閉狀態(tài)，表皮細胞鼓起，液泡水分飽滿，10d時氣孔呈半關(guān)閉狀態(tài)，氣孔開口較小，表皮細胞較為扁平。36℃處理1d時氣孔呈半關(guān)閉狀態(tài)，表皮細胞較為扁平，液泡水分減少，處理10d時氣孔也呈半關(guān)閉狀態(tài)，表皮細胞與處理1d時的飽滿狀態(tài)基本一致。38℃處理1d時氣孔呈半關(guān)閉狀態(tài)，表皮細胞凹陷，液泡嚴重失水，處理10d時氣孔呈關(guān)閉狀態(tài)，表皮細胞恢復(fù)凸起，液泡水分保持較為良好。

圖4 不同溫度處理對玉米葉片下表皮及氣孔結(jié)構(gòu)的影響Fig.4 Effects of different temperatures on lower epidermal structure and stomata status of maize leaves

對比葉片Gs和Tr結(jié)果（圖3）得出，處理1d時，34℃處理的Gs最小，表明氣孔受到脅迫，氣孔呈半關(guān)閉狀態(tài)，表皮細胞也飽滿，同時該溫度下可能不會對葉片其他生理活動造成太大影響，因此也不需要大量蒸騰來降低葉片的溫度，所以相對應(yīng)的Tr也最??；36℃和38℃處理的葉片可能需要大量的蒸騰來降低葉片溫度，以維持其他生理活動的正常進行，因此在大量蒸騰的帶動下，氣孔的開放程度要大于34℃處理，同時38℃處理在經(jīng)歷長時間大量蒸騰后，液泡明顯失水，因此表皮細胞呈凹陷狀。

2.4 不同溫度處理對細胞超微結(jié)構(gòu)的影響

采用透射電鏡對玉米葉片的葉肉細胞進行觀察，結(jié)果（圖5）表明，32℃處理1d時海綿組織細胞結(jié)構(gòu)完整，液泡飽滿，葉綠體和線粒體等細胞器清晰可見，葉綠體均呈正常的紡錘體形狀，葉綠體中的淀粉粒清晰且數(shù)量較多，處理10d后基本無變化，維管束鞘細胞中淀粉粒體積大且數(shù)量較少。34℃處理1d時細胞結(jié)構(gòu)基本與32℃處理一致，處理10d時液泡更為飽滿，葉綠體中的脂質(zhì)球體增多，柵欄組織和葉綠體中基本沒有淀粉粒的儲存。36℃處理1d時液泡萎縮，海綿組織細胞變小，細胞器基本可見，部分葉綠體變形成球狀，葉綠體中淀粉粒較少，處理10d后海綿組織細胞內(nèi)比較雜亂，大部分葉綠體變形，部分葉綠體模糊不清，細胞中含有大量的脂質(zhì)球體，維管束鞘細胞中的淀粉粒較多。38℃處理1d時，海綿組織細胞的液泡結(jié)構(gòu)難以辨別，細胞萎縮變小，部分葉綠體變形破損且淀粉粒較少，維管束鞘細胞中淀粉粒體積較小且數(shù)量較少；處理10d后，海綿組織細胞液泡較小，葉綠體變形降解，葉綠體中的淀粉粒幾乎不可見，出現(xiàn)大粒級脂質(zhì)球體，維管束鞘細胞中的淀粉粒體積小且數(shù)量少。

圖5 不同溫度處理對玉米葉片葉肉細胞葉綠體的影響Fig.5 Effects of different temperatures on chloroplast status in mesophyll cell of maize leaves

進一步放大觀察葉綠體的形態(tài)（圖6），可以看出32℃處理1d和10d時的葉綠體差別不大，類囊體片層清晰可見且排列有序，淀粉粒體積大，數(shù)量多。與處理1d相比，34℃處理10d時類囊體膜片層結(jié)構(gòu)稍顯模糊，葉綠體中淀粉粒較小且數(shù)量少。與32℃和34℃處理相比，36℃處理1d的葉綠體結(jié)構(gòu)完整清晰，淀粉粒體積減小數(shù)量減少，脂質(zhì)球體數(shù)量增多，處理10d時葉綠體類囊體片層結(jié)構(gòu)紊亂，脂質(zhì)球體體積大且數(shù)量多，線粒體結(jié)構(gòu)模糊。38℃處理1d時線粒體分解，葉綠體結(jié)構(gòu)基本正常，類囊體膜片層稍顯模糊，淀粉粒體積進一步減小，處理10d后，類囊體膜片層結(jié)構(gòu)幾乎不可見，葉綠體中無淀粉粒，細胞中出現(xiàn)大粒級的脂質(zhì)球體。

圖6 不同溫度處理對玉米葉片葉肉細胞葉綠體的影響Fig.6 Effects of different temperatures on chloroplast status in mesophyll cell of maize leaves

3 討論

玉米葉片的光合作用是對高溫脅迫最為敏感的過程之一，常表現(xiàn)在其他癥狀之前。類囊體結(jié)構(gòu)中的PSⅡ是受到高溫傷害的主要功能位點，其中Fv/Fm值可在不受光照條件的協(xié)同影響下，直接反映溫度對PSⅡ的影響程度[16]，在非脅迫條件下該參數(shù)的變化極小，而在脅迫條件下會明顯下降。趙薇等[17]對小麥旗葉的研究表明，F(xiàn)v/Fm值在20℃～37℃全部保持在0.76以上，只在高于37℃時才急劇下降。本研究結(jié)果表明，隨著處理時間的持續(xù)，38℃處理下的Fv/Fm逐漸降低且整體顯著低于其他處理，而處理結(jié)束后又顯著回升，且Fv/Fm值與其他處理基本一致。由此表明，38℃處理可以對PSⅡ反應(yīng)中心造成持續(xù)性破壞，但這種破壞是可修復(fù)的，在脅迫解除后PSⅡ反應(yīng)中心恢復(fù)到與其他處理一樣的水平，這是因為PSⅡ反應(yīng)中心失活蛋白在ATP的推動下經(jīng)過一定的時間可以恢復(fù)活性[18]。整個控溫處理期間，38℃處理限制了Y(Ⅱ)，32℃處理末期也顯著降低，表明短時間和持續(xù)的38℃處理均會顯著抑制光合電子傳遞，而持續(xù)的較低溫度處理（32℃）也會限制光合電子的傳遞，可能是由于玉米是喜熱喜光作物，較低溫度的處理還不足以完全激活光反應(yīng)中心相關(guān)酶的活性[19]。

逆境脅迫下PSⅡ反應(yīng)中心受損，電子能量傳遞受阻，進入光化學(xué)反應(yīng)的能量減少，PSⅡ累積過多的能量，這些多余的光能需要通過NPQ途徑耗散來保護葉綠體以及維持正常細胞機能。大量的研究結(jié)果顯示，高溫、亞高溫（35℃）和干旱等逆境脅迫下qL會顯著降低，NPQ會顯著升高[15，20-25]。本研究結(jié)果也表明，隨著處理溫度升高及處理時間的增加，qL顯著降低，而NPQ整體呈增加趨勢，且38℃處理的NPQ顯著高于其他處理，表明隨著溫度升高PSⅡ反應(yīng)中心受損程度增加，電子傳遞受阻，累積的過剩光能需要通過NPQ途徑耗散，從而抑制光合作用器官的損傷，對光合作用機能起一定的保護作用。同時長時間的qL過程產(chǎn)生的超氧陰離子啟動膜質(zhì)過氧化來進一步破壞PSⅡ并且限制PSⅡ的恢復(fù)，需要通過NPQ途徑來耗散更多的過剩能量，因此形成惡性循環(huán)，進而發(fā)生更多的過氧化反應(yīng)，破壞細胞膜脂結(jié)構(gòu)。

光合速率降低的原因主要是氣孔限制和非氣孔限制。氣孔限制是指由于葉片遭受逆境脅迫后氣孔減小或關(guān)閉，造成Ci減小，光合速率下降；而非氣孔限制是指逆境脅迫下Ci足夠高，但光合速率依然受限[26]。核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶（Rubisco）作為光合暗反應(yīng)的關(guān)鍵酶，逆境下其活性的降低被認為是導(dǎo)致光合速率下降的非氣孔因素之一[27]，此外，逆境脅迫限制光合電子傳遞和核酮糖-1，5-二磷酸（RuBP）的再生能力[28]，也是導(dǎo)致光合速率下降的非氣孔因素之一。本研究結(jié)果表明，不同溫度處理初期，38℃處理因溫度升高影響，蒸騰加快，氣孔擴張，Ci升高，因此光合速率短暫的顯著升高。34℃、36℃和38℃處理均受到氣孔限制因素的影響，光合速率在處理1d時顯著降低。隨著處理的持續(xù)進行，36℃和38℃處理Ci逐漸升高，但是光合速率降低，非氣孔限制因素逐漸表現(xiàn)出來，表明持續(xù)的36℃和38℃可能對Rubisco活性和RuBP的再生造成了顯著的影響。另外，對比處理結(jié)束后7d的光反應(yīng)和暗反應(yīng)恢復(fù)程度可以看出，暗反應(yīng)階段更易受高溫脅迫的影響。

根據(jù)以上分析可以看出，隨著溫度的升高以及持續(xù)時間的增加，光合作用光反應(yīng)和暗反應(yīng)階段均受到不同程度抑制，進一步觀察不同溫度下葉片細胞和葉綠體超微結(jié)構(gòu)的變化來說明高溫脅迫對光合作用的影響機理。水分脅迫下高粱和玉米的葉綠體形狀變得不規(guī)則，其中的淀粉顆粒解體消失，基粒變得松散不規(guī)則，只能分辨出少量的類囊體，并且出現(xiàn)較多的脂類小滴，類囊體片層結(jié)構(gòu)混亂，難以辨認[29]。40℃高溫持續(xù)12d使得芍藥保衛(wèi)細胞受損，細胞壓縮變形，液泡變小或破裂，細胞器逐漸解體，出現(xiàn)大量淀粉粒[15]。本研究結(jié)果也表明，隨著處理溫度的升高，海綿組織細胞液泡越來越小，葉綠體逐漸由紡錘體變成球形，類囊體片層結(jié)構(gòu)逐漸模糊不清，葉綠體基質(zhì)中脂質(zhì)球體數(shù)量增多，體積變大，葉綠體基質(zhì)與維管束鞘細胞中淀粉粒體積變小，數(shù)量減少；36℃和38℃處理持續(xù)10d后，海綿組織細胞結(jié)構(gòu)雜亂，大部分葉綠體變形嚴重，部分破損解體，大部分類囊體片層結(jié)構(gòu)消失，維管束鞘細胞中淀粉粒體積變小，數(shù)量減少，細胞質(zhì)和液泡中出現(xiàn)大量的脂質(zhì)球體，一方面表明高溫脅迫導(dǎo)致細胞內(nèi)各類細胞器的質(zhì)膜受損，機體在高溫脅迫中需要大量的脂類物質(zhì)來修復(fù)受損的質(zhì)膜，因此脂質(zhì)球體隨之增加；另一方面，葉綠體內(nèi)膜系統(tǒng)破壞解體，導(dǎo)致脂質(zhì)球體釋放至細胞質(zhì)中累積形成大顆粒脂質(zhì)球體，隨后大量的脂質(zhì)球體會聚集在細胞膜附近[30-32]，累積過多可能會堵塞胞間連絲通道，同化物轉(zhuǎn)運的共質(zhì)體途徑受限，這也與張彩霞[33]研究高溫脅迫下水稻葉片及葉鞘胞間連絲的表面發(fā)現(xiàn)胼胝質(zhì)的沉積限制胞間連絲的轉(zhuǎn)運效率的結(jié)果相類似。

結(jié)合葉綠體表型和葉綠素?zé)晒夥枪饣瘜W(xué)猝滅的結(jié)果，持續(xù)10d的36℃和38℃處理下葉綠體中都累積了過剩光能，因此都造成不同程度的膜脂過氧化，導(dǎo)致這兩個處理的細胞結(jié)構(gòu)和葉綠體結(jié)構(gòu)明顯受損，同時由于葉綠體受損，Ci雖然很高，但Pn仍然降低。綜上所述，36℃是玉米葉片“源”的高溫脅迫閾值，較前人報道的高溫脅迫閾值要高一些，可能是因為玉米屬C4作物，其葉片的高溫耐受性比較強[34]。另外，本研究主要針對“源”進行了探索，對于作物的另外兩個功能過程“庫”形成過程以及“流”轉(zhuǎn)運過程的高溫脅迫閾值還有待進一步探究。

4 結(jié)論

持續(xù)10d日最高溫36℃的處理下，葉片細胞內(nèi)葉綠體結(jié)構(gòu)部分紊亂降解，Pn由于非氣孔限制因素顯著降低，但是并未顯著影響光反應(yīng)階段。持續(xù)10d日最高溫38℃的處理下，葉片細胞中膜脂過氧化程度嚴重，葉綠體結(jié)構(gòu)紊亂，大量降解，光反應(yīng)階段PSⅡ反應(yīng)中心活性顯著降低且高溫脅迫解除后可以恢復(fù)正常，Pn也由于非氣孔限制因素顯著降低，但脅迫解除后未能恢復(fù)。因此，高溫脅迫的影響主要是限制光合作用的暗反應(yīng)階段，對于玉米葉片的“源”，高溫脅迫閾值為日最高溫36℃。