謝可杰，金應(yīng)蘭，徐婷婷，徐長(zhǎng)滬，陳梅芳，邵風(fēng)帆

（江蘇格林勒斯檢測(cè)科技有限公司，山東 聊城 214000）

1 前言

有機(jī)磷農(nóng)藥，屬于農(nóng)作物生長(zhǎng)過(guò)程中常用的一種農(nóng)藥化合物，該類(lèi)化合物在防治農(nóng)作物病蟲(chóng)害中發(fā)揮重要的作用。有機(jī)磷農(nóng)藥品種繁多，具有高效廣譜和易分解的特點(diǎn)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)多屬于硫酸酯類(lèi)或者硫代磷酸酯類(lèi)化合物。由于有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)大多數(shù)的生物體具有一定的毒性，且對(duì)于人類(lèi)和畜類(lèi)的毒性偏大[1]。農(nóng)藥在土壤中的殘留不僅造成環(huán)境的污染，更是在生物鏈的過(guò)程中逐漸的對(duì)人類(lèi)的身體健康產(chǎn)生威脅，特別是在癌變和致畸方面。因此，近年來(lái)我國(guó)逐漸增加對(duì)土壤的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留測(cè)定，以促進(jìn)環(huán)境監(jiān)測(cè)工作的開(kāi)展。

通過(guò)閱讀文獻(xiàn)，我們得知在土壤中殘留的有機(jī)磷農(nóng)藥，大多是采取超聲、索氏、微波萃取以及溶劑加熱的方法進(jìn)行提取[2]。本文選擇的微波萃取法具有升溫快、加熱均勻以及溶劑使用量較少的優(yōu)點(diǎn)。由于土壤中除有機(jī)磷農(nóng)藥外，還含有較多的污染物，因此在對(duì)土壤提取物進(jìn)行分析前需要經(jīng)過(guò)凈化以消除污染物的干擾。目前使用率較高的凈化方法包括柱層析、固相小柱以及凝膠色譜方法等[3-6]。本文采取的是硅膠固相小柱的方法進(jìn)行凈化處理。最后有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)選擇氣相色譜方法，提高環(huán)境監(jiān)測(cè)控制的基礎(chǔ)。

2 研究方法

2.1 儀器與試劑

氣相色譜儀：安捷倫DB-608

色譜柱：毛細(xì)管色譜柱

檢測(cè)器：火焰光度

微波消解儀：speedwave xpert型（德國(guó)博格霍）

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；EYELA-N1300型（日本東京理化器械）

實(shí)驗(yàn)所用試劑，色譜純包含乙腈、丙酮和甲苯，分析純包括氯化鈉和無(wú)水硫酸鎂。所測(cè)十種有機(jī)磷農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為1000 μg/ml（來(lái)源于上海市農(nóng)藥研究所）。

2.2 氣相色譜儀分析條件

氣相色譜儀的溫度控制如下；

初始溫度：90 ℃，保持30 s。

第二階段：以每分鐘35 ℃的速度升溫至210 ℃。

第三階段：以每分鐘35 ℃的速度升溫至250 ℃。

第四階段：以每分鐘20 ℃的速度升溫至270 ℃，并保持3分鐘。

載氣為氮?dú)猓兌葹?9.999%），流量是7 ml/min（壓力16.34 psi）。檢測(cè)器入口溫度是250 ℃，氫氣和空氣的流速分別是75 ml/min和100 ml/min。進(jìn)樣方式選擇不分流。FPD檢測(cè)器溫度是245 ℃。進(jìn)樣體積是2 ml。

2.3 樣品的采集和保存

對(duì)土壤樣品的采集和保存方法是參照HJ/T166。使用金屬制品采集土壤樣品，并保存于零下18 ℃的溫度中。

2.4 土壤樣品溶液的制備

提??；精密稱(chēng)取1 g去除污染物的土壤樣品置于四氟乙烯萃取罐中，精密加入二氯甲烷溶液20 ml，在溫度為60 ℃的條件下萃取10分鐘，取萃取液。萃取罐使用15 ml的二氯甲烷分三次充分洗滌，然后將萃取液和洗滌液混合后，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上旋干。然后采用正己烷和丙酮（體積比為1:1）混合溶液溶解就得到粗品溶液。

凈化：將粗制樣品溶液過(guò)硅膠固相小柱，溶液蒸干后使用1 ml的丙酮溶解，即得凈化后的土壤樣品溶液。

2.5 對(duì)照品溶液的制備

精密移取10種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，丙酮稀釋并定容在容量為50 ml的容量瓶中，就得到混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度為10 mg/L。

2.6 方法學(xué)考察

2.6.1 線性關(guān)系

分別精密量取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1 ml、2 ml、5 ml、8 ml和10 ml，丙酮稀釋并定容在容量為10 ml的容量瓶中。0.45 μm濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣，記錄峰面積。然后以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)品的線性圖，得到回歸方程和相關(guān)系數(shù)。具體數(shù)值見(jiàn)表1。

表1 10種有機(jī)磷農(nóng)藥氣相色譜測(cè)定方法的回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限（n=5）

2.6.2 加標(biāo)回收與精密度試驗(yàn)

選擇適量的土壤樣品，加入混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。充分混合后，根據(jù)土壤的提取和凈化方法制備樣品溶液，然后使用氣相色譜儀進(jìn)行樣品檢測(cè)并計(jì)算加樣回收率。計(jì)算回收率范圍是86.5%～94.9%，RSD范圍是0.72%～8.63%。滿足方法學(xué)要求。數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

表2 10種有機(jī)磷農(nóng)藥的加樣回收率和精密度試驗(yàn)數(shù)據(jù)

2.7 土壤中10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留測(cè)定

對(duì)3個(gè)不同來(lái)源的土壤樣品溶液進(jìn)行10種有機(jī)磷殘留農(nóng)藥測(cè)定。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 3種產(chǎn)地土壤的10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)論

本文對(duì)土壤中含有的10種有機(jī)磷殘留農(nóng)藥檢測(cè)建立方法，其中包括土壤樣品溶液的制備和凈化方法、氣相色譜儀分析方法。建立方法中檢測(cè)限的范圍是0.045～0.312 μg/L。加樣回收率范圍是86.5%～94.9%，RSD范圍是0.72%～8.63%。上述數(shù)據(jù)提示，該方法具有較好的分離度，且精密度和加樣回收率均符合有關(guān)要求，可以作為土壤中10種有機(jī)磷殘留農(nóng)藥的檢測(cè)。使用建立的方法對(duì)3個(gè)不同來(lái)源的土壤進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，不同來(lái)源土壤中10種有機(jī)磷殘留量也存在差異。這些差異性可能與當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)作物種植品種以及農(nóng)藥的給予量有關(guān)聯(lián)。