魯旭鋒，朱慧霞 *，吳 歡，姚日生，2，王 淮，2，馬曉靜，張慧敏

（1.合肥工業(yè)大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院，安徽 合肥 230601；2.合肥工業(yè)大學(xué) 農(nóng)產(chǎn)品生物化工教育部工程研究中心，安徽 合肥 230601）

我國(guó)農(nóng)作物秸稈數(shù)量大、種類多，分布廣[1]，但秸稈商品化和產(chǎn)業(yè)化程度都較低[2]，目前已被利用的也是粗放的低水平利用[3-4]。在秸稈被轉(zhuǎn)化利用的過程中，如何破除抗降解屏障以及實(shí)現(xiàn)纖維素、半纖維素等組分的增值開發(fā)一直是亟待攻克的難題[5-6]。合肥工業(yè)大學(xué)姚日生課題組利用具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的三氧化硫微熱爆（SO3micro-thermal explosion，STEX）技術(shù)[7]對(duì)稻草秸稈進(jìn)行預(yù)處理，可以很好地剝離木質(zhì)素，使得稻草秸稈成為可供微生物發(fā)酵過程利用的碳源。劉新歌[8]以經(jīng)SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理后的稻草秸稈水解液作為替代葡萄糖的碳源，可用于槐糖脂的合成中，降低了發(fā)酵成本；陳家麗等[9]證明了秸稈經(jīng)SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理后得到的綜纖維素，替代淀粉作為碳源發(fā)酵生產(chǎn)頭孢菌素C是完全可行的。

不斷發(fā)展的畜牧業(yè)對(duì)蛋白飼料的需求日益增加[10]。蛋白飼料是指粗纖維含量小于18%，粗蛋白含量達(dá)到20%的一種飼料，包括植物性蛋白質(zhì)飼料、動(dòng)物性蛋白質(zhì)飼料、單細(xì)胞蛋白質(zhì)飼料和非蛋白氮飼料[11]。相比其他飼料，單細(xì)胞蛋白質(zhì)飼料具有生長(zhǎng)周期短、蛋白含量高和粗纖維含量低等優(yōu)點(diǎn)，本研究的“蛋白飼料”是指單細(xì)胞蛋白質(zhì)飼料。陳鑫等[12]選用紅芪藥渣為發(fā)酵原料，利用白腐菌和產(chǎn)朊假絲酵母進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物中真蛋白含量為19.05%，粗纖維含量為19.94%；程方等[13]利用馬鈴薯渣為原料，采用黑曲霉和啤酒酵母進(jìn)行混合發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物中粗纖維含量為8.47%，粗蛋白含量為41.72%。雖然已有許多研究表明微生物利用農(nóng)業(yè)廢料生產(chǎn)蛋白飼料是可行的，但若直接用未經(jīng)處理的原秸稈進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料，發(fā)酵后的殘留物中粗纖維含量較高，不符合蛋白飼料的要求，因此目前利用秸稈生產(chǎn)蛋白飼料的研究少，尚未有成熟方案[14-16]。

本研究以SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理后的稻草秸稈為原料，通過實(shí)驗(yàn)室保藏的纖維素酶產(chǎn)生菌（籃狀菌（Talaromyces radicus）HFY和綠色木霉（Trichoderma viride）ZY-1）[17-18]與蛋白產(chǎn)生菌（擬威克酵母（Wickerhamiella domercqiae）MZ-3和枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）ZL-1）[19]的不同組合生產(chǎn)蛋白飼料，提出了一種將稻草秸稈利用與蛋白飼料生產(chǎn)相結(jié)合的方法，通過此法不僅可將稻草秸稈轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)蛋白微生物可利用的碳源，實(shí)現(xiàn)了對(duì)稻草秸稈的增值化利用，還可用于蛋白飼料的生產(chǎn)中，具有良好的應(yīng)用前景與市場(chǎng)價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 菌種與材料

籃狀菌（T.radicus）HFY、綠色木霉（T.viride）ZY-1、擬威克酵母（W.domercqiae）MZ-3和枯草芽孢桿菌（B.subtilis）ZL-1：均為本實(shí)驗(yàn)室保藏菌種；稻草秸稈：安徽省合肥市。

1.1.2 培養(yǎng)基

種子培養(yǎng)基：葡萄糖2%，蛋白胨2%，酵母粉2%，瓊脂2%（液體培養(yǎng)基中不加），pH自然，121 ℃滅菌20 min；

馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基：稱取200 g馬鈴薯切成小塊，加水煮爛（煮沸20～30 min），用紗布過濾，濾液中加入20 g瓊脂，繼續(xù)加熱并攪拌，使瓊脂完全溶解，加入葡萄糖20 g，攪拌均勻，稍冷卻后再補(bǔ)足純水至1 000 mL，121 ℃滅菌20 min；

發(fā)酵培養(yǎng)基：稻草秸稈（經(jīng)SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理）4%，KH2PO40.3%，MgSO40.05%，酵母粉0.5%，pH自然，121 ℃滅菌20 min。

1.2 儀器與設(shè)備

ZHJH-C115C超凈工作臺(tái)、ZWY-2102恒溫培養(yǎng)振蕩器：上海智成分析儀器制造有限公司；YXQ-LS立式蒸汽滅菌器：上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司；HC-3018R高速冷凍離心機(jī)：安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司；AUY120分析天平：日本Shimadzu公司；SBA-40E生物傳感分析儀：山東省科學(xué)院研究所；Master-Q15純水機(jī)：上海和泰儀器有限公司；K1302凱氏定氮儀：上海晟聲自動(dòng)化分析儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 稻草秸稈的預(yù)處理

采用本課題組具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿[20]對(duì)稻草秸稈進(jìn)行預(yù)處理。對(duì)照組中使用未處理的原稻草秸稈。

1.3.2 菌種活化

綠色木霉（T.viride）ZY-1、籃狀菌（T.radicus）HFY：取低溫保存的菌液分別涂布于PDA培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基中，在30 ℃靜置培養(yǎng)2～3 d后，將孢子接入生理鹽水中，均配制成108個(gè)/mL的孢子懸液。

擬威克酵母（W.domercqiae）MZ-3、枯草芽孢桿菌（B.subtilis）ZL-1：分別接入2%（V/V）菌液至液體種子培養(yǎng)基中，在30 ℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)12～24 h。

1.3.3 單菌發(fā)酵

發(fā)酵培養(yǎng)基中按6%（V/V）接種量接入活化后的菌液，在30 ℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)6 d，將發(fā)酵產(chǎn)物烘干、粉碎。對(duì)照組中使用未處理的原稻草秸稈，同法發(fā)酵。以粗纖維降解率及粗蛋白含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察不同菌株單獨(dú)發(fā)酵的效果。

1.3.4 微生物組合發(fā)酵

取編號(hào)為1～4的錐形瓶，分別裝50 mL/250 mL發(fā)酵培養(yǎng)基，按表1接入不同組合微生物，總接種量為6%，在30 ℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)6 d。

表1 不同比例的微生物組合Table 1 Microbial combinations of different proportions

以發(fā)酵產(chǎn)物中粗蛋白含量、粗纖維含量、粗纖維降解率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定最佳菌株組合，用于后續(xù)發(fā)酵條件優(yōu)化單因素和正交試驗(yàn)。

1.3.5 發(fā)酵條件優(yōu)化單因素和正交試驗(yàn)

以發(fā)酵產(chǎn)物中粗蛋白含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察發(fā)酵時(shí)間（2 d、4 d、6 d、8 d、10 d）、總接種量（2%、4%、6%、8%、10%）、籃狀菌HFY與擬威克酵母MZ-3比例（1∶1、1∶2、1∶3、2∶1、3∶1，V/V）及發(fā)酵溫度（20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃、40 ℃）對(duì)發(fā)酵效果的影響。

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以粗蛋白含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，選擇發(fā)酵時(shí)間（A）、發(fā)酵溫度（B）、籃狀菌HFY與擬威克酵母MZ-3比例（C）為影響因素，利用L9（33）進(jìn)行正交試驗(yàn)確定每個(gè)因素的最佳水平。正交試驗(yàn)的因素及水平見表2。

表2 發(fā)酵條件優(yōu)化正交試驗(yàn)因素與水平Table 2 Factors and levels of orthogonal experiments for fermentation conditions optimization

1.3.6 分析檢測(cè)

粗蛋白含量測(cè)定：參照GB 5009.5—2016《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》中的凱氏定氮法[21]；纖維素、半纖維素、木質(zhì)素含量測(cè)定：參照文獻(xiàn)[22]；粗纖維含量測(cè)定：參照酸堿洗滌法[23]，其計(jì)算公式如下：

1.3.7 數(shù)據(jù)處理

采用Origin 7.5、GraphPad Prism 8.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用正交設(shè)計(jì)助手軟件對(duì)正交試驗(yàn)的因素與水平進(jìn)行分析。本研究中每個(gè)試驗(yàn)條件下做3個(gè)平行樣，結(jié)果為3個(gè)平行樣的平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 預(yù)處理前后稻草秸稈主要組分測(cè)定

稻草秸稈經(jīng)過SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿處理后，各組分測(cè)定結(jié)果見表3。由表3可知，經(jīng)預(yù)處理后，稻草秸稈中的木質(zhì)素含量由12.02%下降至6.20%，比原來降低了48.42%，表明預(yù)處理確實(shí)能剝離部分木質(zhì)素。由于木質(zhì)素的剝離，稻草秸稈中的纖維素所占比重會(huì)相應(yīng)提高，其含量由30.93%上升至49.86%；而半纖維素由于其結(jié)構(gòu)介于纖維素和木質(zhì)素之間，在預(yù)處理過程中會(huì)因木質(zhì)素的剝離而有損失，其含量由39.76%降低至32.94%。纖維素、半纖維素是稻草秸稈中可被利用的主要成分，木質(zhì)素是阻礙其被利用的第一道壁壘，有效剝離木質(zhì)素可使纖維素、半纖維素更大程度的暴露出來，使得稻草秸稈更易被利用，這在后續(xù)的稻草秸稈發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的試驗(yàn)中也得到了驗(yàn)證。

表3 預(yù)處理前后稻草秸稈組分含量Table 3 Contents of straw stalks component before and after pretreatment

2.2 單菌發(fā)酵試驗(yàn)

籃狀菌HFY和綠色木霉ZY-1均可在生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生纖維素酶，而纖維素酶可分解稻草秸稈中的部分纖維素，故無論是對(duì)原秸稈還是預(yù)處理后的秸稈，這2株微生物對(duì)其中的粗纖維都會(huì)有一定程度的降解。由圖1a可知，籃狀菌HFY和綠色木霉ZY-1的粗纖維降解率都達(dá)到了30%以上，經(jīng)過預(yù)處理后的秸稈相比于原秸稈，因?yàn)镾O3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理可以很好地剝離稻草秸稈最外層的木質(zhì)素，這2株微生物可以更直接地作用于粗纖維，因此它們的粗纖維降解率會(huì)相應(yīng)提高（籃狀菌HFY的粗纖維降解率提高了72.58%，綠色木霉ZY-1提高了66.65%）。而且作為發(fā)酵原料，預(yù)處理后的秸稈由于木質(zhì)素的剝離，比原秸稈更合適。

圖1 單菌發(fā)酵預(yù)處理前后稻草秸稈發(fā)酵效果Fig.1 Fermentation effect of straw stalks before and after pretreatment by single strain fermentation

空白組（不接種試驗(yàn)菌，僅含稻草秸稈和發(fā)酵培養(yǎng)基）、枯草芽孢桿菌ZL-1和擬威克酵母MZ-3利用預(yù)處理前后稻草秸稈進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)物中粗蛋白含量的變化結(jié)果見圖1b。由圖1b可知，原秸稈的粗蛋白含量為3.11%，經(jīng)試驗(yàn)菌枯草芽孢桿菌ZL-1（擬威克酵母MZ-3）發(fā)酵后，產(chǎn)物中的粗蛋白含量為6.04%（6.67%），相比空白組提高了94.21%（114.47%）；原秸稈經(jīng)SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理后，粗蛋白含量（3.28%）未發(fā)生顯著變化（P＞0.05），經(jīng)試驗(yàn)菌枯草芽孢桿菌ZL-1（擬威克酵母MZ-3）發(fā)酵后，產(chǎn)物中的粗蛋白含量為6.55%（7.65%），相比空白組提高了99.70%（133.23%）。作為蛋白產(chǎn)生菌，這兩株微生物在各自生長(zhǎng)過程中本身就含有較高的蛋白質(zhì)含量。

結(jié)果表明，試驗(yàn)所用微生物以預(yù)處理后的稻草秸稈進(jìn)行發(fā)酵，所得產(chǎn)物的粗蛋白含量和粗纖維降解率均比以原秸稈發(fā)酵的更高。因此，選用預(yù)處理后的稻草秸稈作為后續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料試驗(yàn)的原料。

2.3 不同微生物組合發(fā)酵

文獻(xiàn)報(bào)道，在構(gòu)建酶解天然纖維素的連續(xù)反應(yīng)體系方面，多是應(yīng)用多種微生物混合發(fā)酵體系來解除底物和降解產(chǎn)物對(duì)酶合成的影響[24-25]。本試驗(yàn)中，為了得到好的發(fā)酵結(jié)果，故利用不同的微生物組合發(fā)酵稻草秸稈，由發(fā)酵產(chǎn)物中的粗纖維含量和粗蛋白含量篩選出最佳的微生物組合，結(jié)果見表4。由表4可知，對(duì)比1號(hào)和3號(hào)組合、2號(hào)和4號(hào)組合，可知籃狀菌HFY對(duì)稻草秸稈的降解能力優(yōu)于綠色木霉ZY-1。3號(hào)組合中，發(fā)酵產(chǎn)物的粗纖維含量（16.28%）顯著低于1號(hào)組合（22.11%），并且粗纖維降解率達(dá)到70.83%。對(duì)比1號(hào)和2號(hào)組合、3號(hào)和4號(hào)組合，可知擬威克酵母MZ-3的產(chǎn)蛋白能力明顯優(yōu)于枯草芽孢桿菌ZL-1，這與單菌發(fā)酵得出的結(jié)論一致。1號(hào)組合中，發(fā)酵產(chǎn)物的粗蛋白含量（13.38%）明顯高于2號(hào)組合（9.04%）。3號(hào)和4號(hào)組合中，該差異變得更加顯著，3號(hào)組合的粗蛋白含量（23.50%）遠(yuǎn)高于4號(hào)組合（13.02%）。在所有組合中，3號(hào)組合（籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3=1∶1）發(fā)酵結(jié)束后，產(chǎn)物中粗纖維含量最低（16.28%），粗纖維降解率最高（70.83%），粗蛋白含量也最高（23.50%），符合蛋白飼料的要求。因此，選用籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3=1∶1的微生物組合作為最佳菌株組合。

表4 不同菌株組合發(fā)酵預(yù)處理后稻草秸稈發(fā)酵效果Table 4 Fermentation effect of straw stalks after pretreatment by different strain combinations

2.4 發(fā)酵條件優(yōu)化單因素和正交試驗(yàn)

2.4.1 不同發(fā)酵時(shí)間對(duì)粗蛋白含量的影響

發(fā)酵時(shí)間對(duì)微生物的生長(zhǎng)有影響。適合的發(fā)酵時(shí)間可以有效提高發(fā)酵產(chǎn)物的粗蛋白含量，因此確定微生物的發(fā)酵時(shí)間很有必要[26-27]。

圖2 不同發(fā)酵時(shí)間對(duì)粗蛋白含量的影響Fig.2 Effect of different fermentation time on crude protein contents

由圖2可知，發(fā)酵產(chǎn)物中粗蛋白含量隨著發(fā)酵時(shí)間在2～8 d范圍的延長(zhǎng)而不斷增加，并在發(fā)酵第8天時(shí)粗蛋白含量達(dá)到了最高，為27.50%，此后，隨著發(fā)酵時(shí)間的繼續(xù)延長(zhǎng)，粗蛋白含量出現(xiàn)了下降的趨勢(shì)。這可能是因?yàn)楫?dāng)發(fā)酵時(shí)間過短時(shí)，微生物不能充分利用碳源進(jìn)行生長(zhǎng)，從而粗蛋白含量較低；而發(fā)酵時(shí)間過長(zhǎng)，可能由于微生物自身分解代謝導(dǎo)致粗蛋白含量降低。因此，選擇最適發(fā)酵時(shí)間為8 d。

2.4.2 不同接種量對(duì)粗蛋白含量的影響

圖3 不同接種量對(duì)粗蛋白含量的影響Fig.3 Effect of different inoculum on crude protein contents

由圖3可知，隨著接種量在2%～10%（籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3=1∶1）范圍內(nèi)的提高，發(fā)酵產(chǎn)物的粗蛋白含量呈現(xiàn)先增加后下降的趨勢(shì)。當(dāng)接種量＜8%時(shí)，粗蛋白含量隨接種量增加而提高，并在接種量為8%時(shí)，粗蛋白含量達(dá)到最大，為23.68%；當(dāng)接種量＞8%之后，粗蛋白含量有所下降，是因?yàn)榇藭r(shí)接入的菌體數(shù)量較多，營(yíng)養(yǎng)相對(duì)缺乏，兩株微生物都無法很好生長(zhǎng)，導(dǎo)致粗蛋白含量略有下降（22.53%）。因此，選擇最佳接種量為8%。

2.4.3 不同菌株比例對(duì)粗蛋白含量的影響

不同菌株比例（籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3）對(duì)應(yīng)的發(fā)酵產(chǎn)物的粗蛋白含量見圖4。

圖4 菌株HFY與MZ-3比例對(duì)粗蛋白含量的影響Fig.4 Effect of strain HFY and MZ-3 ratio on crude protein contents

由圖4可知，當(dāng)籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3=1∶1時(shí)，粗蛋白含量達(dá)到最高值23.71%。當(dāng)提高體系中籃狀菌HFY的比例時(shí)，粗蛋白含量下降，籃狀菌HFY生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生的纖維素酶會(huì)降解稻草秸稈中的纖維素，產(chǎn)生了可供微生物生長(zhǎng)的碳源，但此時(shí)由于產(chǎn)蛋白的酵母比例小、量少，從而造成粗蛋白含量較低；同樣，當(dāng)提高擬威克酵母MZ-3的比例時(shí)，粗蛋白含量也下降了，是因?yàn)轶w系中由于籃狀菌HFY比例小、量少，產(chǎn)生的纖維素酶量也少，不能較多的降解稻草秸稈中的纖維素，故酵母生長(zhǎng)由于缺少碳源受到影響，亦會(huì)造成粗蛋白含量較低。因此，選擇籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3為1∶1。

2.4.4 不同發(fā)酵溫度對(duì)粗蛋白含量的影響

發(fā)酵溫度對(duì)微生物發(fā)酵而言，也是一個(gè)非常重要的因素，有文獻(xiàn)報(bào)道擬威克酵母最適生長(zhǎng)溫度為30 ℃[8]。由圖5可知，發(fā)酵產(chǎn)物的粗蛋白含量隨發(fā)酵溫度在20～40 ℃范圍內(nèi)呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。當(dāng)發(fā)酵溫度＜30 ℃時(shí)，粗蛋白含量隨溫度提高而增加，并在發(fā)酵溫度為30 ℃時(shí)，粗蛋白含量達(dá)到最高，為23.53%；當(dāng)發(fā)酵溫度＞30 ℃后，粗蛋白含量隨溫度提高而下降，是由于發(fā)酵溫度過高或者過低，偏離了擬威克酵母MZ-3的最適生長(zhǎng)溫度，其生長(zhǎng)不良導(dǎo)致產(chǎn)蛋白能力下降。因此，選擇最佳發(fā)酵溫度為30 ℃。

圖5 不同發(fā)酵溫度對(duì)粗蛋白含量的影響Fig.5 Effect of different fermentation temperature on crude protein contents

2.5 發(fā)酵條件優(yōu)化正交試驗(yàn)

由于接種量對(duì)結(jié)果影響較小，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以發(fā)酵產(chǎn)物的粗蛋白含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)發(fā)酵溫度（A）、發(fā)酵時(shí)間（B）、籃狀菌HFY與擬威克酵母MZ-3比例（C）進(jìn)行3因素3水平正交優(yōu)化試驗(yàn)，結(jié)果見表5。由表5可知，這3個(gè)因素對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物粗蛋白含量的影響程度依次為A（發(fā)酵時(shí)間）＞B（發(fā)酵溫度）＞C（籃狀菌HFY與擬威克酵母MZ-3比例），即發(fā)酵時(shí)間對(duì)稻草秸稈發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料影響最大，因?yàn)榘l(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短直接影響微生物的生長(zhǎng)和發(fā)酵環(huán)境，因此在后續(xù)生產(chǎn)放大時(shí)應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格控制發(fā)酵時(shí)間。最佳工藝組合為A2B2C1，即發(fā)酵溫度30 ℃，發(fā)酵時(shí)間8 d，籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3=1∶1。在此發(fā)酵條件下進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，粗蛋白含量為30.46%，比優(yōu)化前提高了29.62%，粗纖維含量為14.15%，比優(yōu)化前降低了13.08%。

表5 發(fā)酵條件優(yōu)化正交試驗(yàn)結(jié)果與分析Table 5 Results and analysis of orthogonal experiments for fermentation conditions optimization

3 結(jié)論

本研究通過組合兩種纖維素酶產(chǎn)生菌和兩種蛋白產(chǎn)生菌對(duì)SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理后的稻草秸稈和原秸稈進(jìn)行降解并發(fā)酵，結(jié)果顯示稻草秸稈經(jīng)SO3微熱爆技術(shù)聯(lián)合稀堿預(yù)處理后可有效剝離木質(zhì)素，采用混菌發(fā)酵更有利于菌種生長(zhǎng)和蛋白飼料的發(fā)酵生產(chǎn)。經(jīng)過單因素和正交優(yōu)化試驗(yàn)得到最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵時(shí)間8 d，籃狀菌HFY∶擬威克酵母MZ-3=1∶1，接種量8%，發(fā)酵溫度30 ℃。在此優(yōu)化條件下，粗蛋白含量為30.46%，比原秸稈中粗蛋白含量（3.11%）提高了8.79倍，比優(yōu)化前（23.50%）提高了29.62%；粗纖維含量為14.15%，比原秸稈中粗纖維含量（49.67%）降低了71.51%，比優(yōu)化前（16.28%）降低了13.08%，符合蛋白飼料的標(biāo)準(zhǔn)。本研究提出了一種“變廢為寶”的方法，即利用微生物的組合發(fā)酵將稻草秸稈轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍罪暳希@對(duì)促進(jìn)稻草秸稈的增值利用、蛋白飼料的生產(chǎn)和應(yīng)用具有很好的現(xiàn)實(shí)意義，應(yīng)用前景廣闊。