李紅 郭華偉 肖強 殷坤山 唐美君
關鍵詞茶尺蠖;產卵條;制作;灰茶尺蠖
在昆蟲大量飼養(yǎng)過程中,取卵是一項重要的技術環(huán)節(jié)。根據(jù)昆蟲的習性,用簡便的方法獲得大量的卵是昆蟲大量飼養(yǎng)能否成功的關鍵。產卵條制作就是一項實現(xiàn)昆蟲大量飼養(yǎng)的關鍵技術。產卵條的制作雖然簡單,但意義重大,在整個飼養(yǎng)過程中起著十分重要的作用。
茶尺蠖Ectropis obliqua Prout和灰茶尺蠖E.grisescens Warren是茶園發(fā)生最普遍的害蟲,是研究者最主要的研究對象。在各項研究過程中均需進行茶尺蠖或灰茶尺蠖的大量飼養(yǎng)。用產卵紙條供其產卵不但取卵方便,而且還便于卵的冷藏存放,在茶尺蠖病毒生產過程中也十分有用。
過去鱗翅目昆蟲飼養(yǎng)常用瓦楞紙供其產卵,但茶尺蠖在瓦楞紙上產卵極少。前人對茶尺蠖產卵條已有報道,但在應用時發(fā)現(xiàn),該產卵條產卵效果時好時壞。本研究對該產卵條作了改進,并進行了對比試驗,找到一種產卵效果更佳的產卵條制作方法,并在茶尺蠖和灰茶尺蠖的飼養(yǎng)中應用,效果很好?,F(xiàn)將研究結果總結如下,為茶尺蠖和灰茶尺蠖的大量飼養(yǎng)提供依據(jù)。
1材料與方法
1.1供試蟲源
茶尺蠖為浙江余杭(119.90°E,30.39°N)種群,灰茶尺蠖為浙江樂清(121.08°E,28.36°N)種群,均為田間采集幼蟲在養(yǎng)蟲室用新鮮茶葉連續(xù)飼養(yǎng)多代的健康蟲種。飼養(yǎng)條件:溫度(23±1)℃;光周期L//D=12 h//12h;相對濕度75%~80%。
1.2產卵條
設計制作了4種產卵條,其中A為將紙片3次折疊,形成4層紙3條縫的產卵條;B為將紙片2次折疊,形成3層紙2條縫的產卵條;C為將紙片1次折疊,形成2層紙1條縫的產卵條(同參考文獻[4]);D為無縫的產卵條,做法是將產卵條B的兩條縫隙用膠水緊密粘合起來,自然晾干。
將A4打印紙先裁切成一定大小的小紙片,折疊后兩端用訂書機訂合,形成長100mm、寬18mm的紙條。以B為例,先裁切成長100minx寬54mm的紙片,折疊訂合后形成長100mm×寬18mm的產卵條(圖1)。A和C的起始紙片大小分別為長100mmx寬72mm、長100mmx寬36mm,D的起始紙片大小同B。
1.3單一卵條的產卵試驗
用同一批飼養(yǎng)的茶尺蠖成蟲進行產卵試驗,將上述A、B、C、D4種產卵條分別放人500mL養(yǎng)蟲瓶中,每瓶中放人1個產卵條,接入1對剛羽化未交配的成蟲進行配對產卵,瓶內放入一片茶葉保濕,用白紙和牛皮筋將瓶口封住。1個養(yǎng)蟲瓶為1個重復,每處理9次重復。飼養(yǎng)條件為:(22.54±0.5)℃,L//c=10 h//14 h。3 d后取產卵條檢查記錄著卵量。
1.4不同產卵條的選擇性試驗
在同一個養(yǎng)蟲瓶中放人2種不同產卵條,共設A+B、B+C、A+C 3種組合,每瓶接入2對剛羽化未交配的茶尺蠖成蟲進行配對產卵試驗,瓶內放人1片茶葉保濕,用白紙和牛皮筋封住瓶口。1個養(yǎng)蟲瓶為1個重復,每處理6次重復。飼養(yǎng)條件同1.3。3 d后取產卵條檢查記錄著卵量。
1.5產卵條B在茶尺蠖和灰茶尺蠖大量飼養(yǎng)中的應用
茶尺蠖和灰茶尺蠖的大量飼養(yǎng):每批次50~100瓶,每瓶接入一對成蟲,并放置1~2個產卵條B取卵,以確保每批次的幼蟲數(shù)量達1~2萬頭。成蟲配對及飼養(yǎng)方法同1.3。每天定時取出有卵的產卵條,連續(xù)取3 d。將同一天取的卵條集中放置在同一個養(yǎng)蟲瓶中冷藏保存,每瓶保存25~30張卵條。成蟲產卵結束后,分別從不同時問點保存的卵條中抽取5張,茶尺蠖和灰茶尺蠖各取15張,檢查著卵量。
1.6卵量檢查及數(shù)據(jù)統(tǒng)計
用醫(yī)用微型剪刀將卵條從卵塊附近的空白處剪開,并剪取有卵的紙片,卵塊朝上放在解剖鏡載物臺de,開啟透射燈,光線自下而上,透過紙片和卵粒進行觀察和計數(shù)。所得數(shù)據(jù)用DPS軟件進行方差分析和多重比較。
2結果與分析
2.1單一產卵條的產卵試驗
試驗結果(表1)表明,產卵條制作方法不同,產卵效果有顯著差異(F=13.967,P=0)。供試的4種產卵條中產卵條B的著卵效果最好,與前人報道的產卵條相比,卵條上著卵量顯著增加,提高45.95%。產卵條A的縫隙雖有3個,但卵條上著卵量與產卵條B相比略少,兩者沒有顯著差異。試驗還表明,產卵條D著卵量非常少,成蟲將卵產于養(yǎng)蟲瓶中,卵條上沒有卵或只有極少的卵,可見縫隙對產卵的影響很大。
2.2不同產卵條的選擇性試驗
在同一個養(yǎng)蟲瓶中放入2種不同產卵條,成蟲有明顯的選擇喜好(圖2)。B與C組合時,成蟲偏好選擇B產卵條產卵,兩者產卵量有極顯著差異(F=65.382,P<0.01),B卵條上的著卵量占總卵量的94.5%;A與C組合時,成蟲偏好選擇A產卵條產卵,兩者產卵量有極顯著差異(F=142.065,P<0.01);在A與B組合時,則出現(xiàn)A、B上卵量約各占一半,兩者問無顯著差異(F=0.152,P=0.7046)。
選擇試驗結果再次證明,產卵條B的產卵效果顯著優(yōu)于卵條C。同時在制作方法上,產卵條B比產卵條A簡單。因此,產卵條B是產卵效果最好而且制作最簡單的一種產卵條。
2.3產卵條B在茶尺蠖和灰茶尺蠖大量飼養(yǎng)中的應用
上述產卵試驗結果表明,對于茶尺蠖,產卵條B的應用效果顯著優(yōu)于產卵條c和D,是篩選出的比較理想的產卵條??紤]到灰茶尺蠖和茶尺蠖為近緣種,外部形態(tài)和生活習性都十分近似,因此,將產卵條B也應用到灰茶尺蠖的飼養(yǎng)中。抽樣調查結果顯示,茶尺蠖每張卵條的著卵量在112~389粒之問,平均為195.9粒;灰茶尺蠖每張卵條的著卵量在119~396粒之間,平均為225.4粒。說明改進篩選出的產卵條B可適用于這2種尺蠖。
3結論與討論
產卵條的制作對于昆蟲大量飼養(yǎng)意義重大。昆蟲人工飼養(yǎng)中常需根據(jù)昆蟲習性選擇利于產卵和卵孵化的基質,滿足實際飼養(yǎng)需要。本研究根據(jù)茶尺蠖喜產卵于縫隙的習性,用普通A4打印紙制作了具有2條縫隙的產卵條,其著卵量高,且制作方法簡單、成本低,可方便取卵和卵的冷藏等操作,對茶尺蠖和灰茶尺蠖大量飼養(yǎng)和茶尺蠖核型多角體病毒繁殖十分有益。
根據(jù)昆蟲的產卵習性制作產卵條可以取得好的產卵效果,否則會出現(xiàn)不產卵或極少產卵的情況。對茶尺蠖產卵行為的研究表明,成蟲產卵時會伸長產卵器,尋找裂縫,將卵產于裂縫中。所以產卵條的縫隙對其成蟲產卵十分重要。如果沒有裂縫雖偶也會產卵,但卵量極少??p隙太大或者太小都不利于產卵。上述試驗結果也證實了這點。成蟲產卵器長3.4~4.7mm,具有伸縮性,直徑0.5~0.6mm;卵長徑約0.71mm,短徑約0.47mm。本研究制作的產卵條(即產卵條B)縫隙大小為0.5~1mm,與產卵器直徑基本吻合,成為成蟲最適合的產卵場所,同時由于兩邊各有一個縫隙,提供了可選擇場所,因此產卵量高。而過去的方法制作的產卵條(即產卵條c)常常出現(xiàn)縫隙過大(大于2mm)或過?。▋蓪蛹埦o密貼合)的情況,不利于成蟲產卵,這可能就是導致該產卵條產卵效果時好時壞的主要原因。
本產卵條不但具有制作簡單且著卵量高的優(yōu)點,還使得檢查卵量和卵孵化率準確易行。本研究制作的產卵條裂縫大小合適,成蟲所產卵塊較薄,通常為1~2層卵(圖3),這樣使得卵量的檢查變得容易,提高了產卵量和存活率計數(shù)的準確性。而產在縫隙大的卵條(產卵條c)或養(yǎng)蟲瓶內的卵塊則是多層卵疊在一起(圖4),必須要用毛筆刷下或撥下卵粒才能進行觀察,刷卵必會對卵粒有損傷,由撥、刷卵造成的死亡率至少為10%,影響試驗的準確性,誤差大。