肖秦箭，張曉虎，高夢(mèng)蝶，張峻偉

（商洛學(xué)院生物醫(yī)藥與食品工程學(xué)院，陜西秦嶺特色生物資源產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院，陜西商洛726000）

0 引言

南五味子為木蘭科植物五味子(Schisandras phenanthera Rehid et Wils)的干燥成熟果實(shí)，含五味子甲素、五味子乙素、五味子酯甲、乙、丙、丁、戊、五味子醇甲、醇乙等木脂素類，既是具有防腐保鮮作用的有效成分，也是南五味子的主要藥用成分之一[1-3]。南五味子含有的天然抑菌成分，具有光譜抗菌作用，能抑制多種致病菌，因此可作為天然食品防腐劑資源[4,5]。

目前，天然、高效、無毒、低成本已成為食品保鮮涂膜技術(shù)的主要發(fā)展方向。研究表明，單一的涂膜劑配制簡(jiǎn)單，作用效果不顯著。復(fù)合涂膜劑因成分復(fù)雜，各物質(zhì)之間具有協(xié)同作用，可有效保證其性質(zhì)穩(wěn)定，同時(shí)能夠加強(qiáng)抑菌性、抗氧化性等多方面的涂膜效果。

由于中草藥獨(dú)特的性質(zhì)，已吸引了世界各地學(xué)者的注意力。眾多研究表明，南五味子提取物具有抗氧化、抑菌等作用，在食品保鮮中具有很廣泛的應(yīng)用前景[6]。但是單味中藥抗菌譜比較狹窄，將中藥與其他材料配伍使用，可以增強(qiáng)其抗菌能力、拓寬抗菌范圍。

目前常用食品保鮮劑多為人工合成，制造成本低，對(duì)食品的外觀形態(tài)影響較微，防腐效果出眾。但相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，人工合成防腐保鮮劑可抑制酶在體內(nèi)的代謝活動(dòng)，長(zhǎng)期或者過量食用對(duì)人體產(chǎn)生危害，輕則使機(jī)體代謝紊亂、重則引起食物中毒、致畸、致癌等[7]。因此，以中草藥為有效成分，研發(fā)天然、高效、無毒、低成本的食品防腐保鮮劑已成為目前此領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)[8]。

綜上所述，通過查閱文獻(xiàn)，未見有關(guān)于商洛南五味子醇乙、蟲膠蠟、抗壞血酸和氯化鈣復(fù)合保鮮膜的研究報(bào)道。本文以南五味子為研究對(duì)象，采用響應(yīng)面法優(yōu)化南五味子醇乙提取工藝，以DM-130型大孔樹脂對(duì)其進(jìn)行純化并進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，將南五味子醇乙輔以蟲膠蠟、抗壞血酸和氯化鈣為原料制備復(fù)合保鮮劑，并用于綠蘆筍保鮮試驗(yàn)，其成果將作為綠蘆筍貯藏保鮮的技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料 南五味子果實(shí)（2019年7月購于商洛市商州區(qū)福鑫康藥業(yè)）、綠蘆筍（2020年5月購于陜西省商洛市商州區(qū)佳家惠超市）。

南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)品（批號(hào)：100561，2020年5月購于江蘇永健醫(yī)藥科技有限公司）、無水乙醇、95%乙醇（分析純）、甲醇、蒸餾水、抗壞血酸、氯化鈣、蟲膠蠟、DM-130型大孔吸附樹脂、瓊脂粉、牛肉浸膏、蛋白胨。

金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌（2020年5月購于上海魯微科技有限責(zé)任公司）。

1.1.2 儀器 FW100型高速萬能粉碎機(jī)，北京中興偉業(yè)儀器有限責(zé)任公司；DHG9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海齊欣科學(xué)儀器有限責(zé)任公司；ZDX-35BI電熱壓力蒸汽滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠；DHG-9240A型隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司；KQ5200DE型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；LC-20A型高效液相色譜儀，上海儀電分析儀器有限公司。色譜條件：色譜柱，Symmetry C18(3.0×100mm，3.5 μm)；流動(dòng)相：甲醇-水；流速：1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：290 nm；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：10 μL。

1.2 方法

1.2.1 原料的預(yù)處理 用蒸餾水清洗南五味子果實(shí)，于電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)60℃干燥2 h，高速萬能粉碎機(jī)粉碎后過60目篩，65℃烘干，置于干燥廣口瓶備用。

1.2.2 南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)溶液制備：準(zhǔn)確稱取南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)品12 mg，轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，加甲醇溶液溶解并定容至刻度，而后搖勻制成濃度為1.2 mg/mL的南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)溶液。

南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL上述制備的南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)溶液于6個(gè)10 mL容量瓶中，加甲醇溶液定容至刻度，根據(jù)1.1.2色譜條件進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣。以南五味子醇乙濃度為橫坐標(biāo)，南五味子醇乙相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)曲線[9]，見圖1；得到南五味子醇乙濃度-峰面積線性回歸方程(1)。

圖1 南五味子醇乙標(biāo)準(zhǔn)曲線

1.2.3 南五味子醇乙的提取 準(zhǔn)確稱取10 g南五味子粉末，放入燒杯中，加10倍量85%的乙醇，超聲功率150W，超聲時(shí)間40 min，溫度50℃提取，將提取液留存于4℃?zhèn)溆肹10]。

1.2.4 南五味子醇乙提取率的測(cè)定 用移液管吸取2.0mL南五味子醇乙粗提液，轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，加入一定量的乙醇溶液定容，根據(jù)1.1.2的色譜條件重復(fù)進(jìn)樣3次，求其平均值并結(jié)合回歸方程，按公式(2)計(jì)算出南五味子粗提液中醇乙的質(zhì)量濃度[11]。

式中：C-回歸方程計(jì)算出的五味子醇乙濃度(mg/mL)；N-溶液稀釋倍數(shù)；V-稀釋液體積(mL)；V1-提取液取樣量(mL)；M-五味子醇乙粉末質(zhì)量(g)。

1.2.5 單因素實(shí)驗(yàn) 按1.2.3提取方法進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，分別考察料液比(1:8、1:10、1:12、1:14、1:16)、提取溫度(50、60、70、80、90℃)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(50%、60%、70%、80%、90%)、提取時(shí)間(0.5、1、1.5、2、2.5 h)4個(gè)因素對(duì)南五味子醇乙提取率的影響，3次實(shí)驗(yàn)取平均值。

1.2.6 響應(yīng)面試驗(yàn) 基于單因素實(shí)驗(yàn)，采用Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，選擇對(duì)南五味子醇乙提取率影響較大的幾個(gè)因素為自變量，以提取率為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)并分析得出南五味子醇乙提取的優(yōu)化工藝參數(shù)。

1.2.7 驗(yàn)證性試驗(yàn) 根據(jù)響應(yīng)面優(yōu)化所得到的南五味子醇乙最佳提取工藝，按照相應(yīng)的工藝參數(shù)進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，取其平均值進(jìn)行對(duì)比驗(yàn)證。

1.2.8 南五味子醇乙純化 大孔吸附樹脂的前處理：將DM-130型樹脂在95%的乙醇中浸泡至24 h，膨脹后用95%的乙醇繼續(xù)進(jìn)行反復(fù)沖洗，直到?jīng)_洗液與水以一定比例相混合仍表現(xiàn)澄清時(shí)，再用蒸餾水沖洗大孔吸附樹脂，直至乙醇味道完全消除后浸泡在蒸餾水中備用[12]。

大孔吸附樹脂吸附量的計(jì)算：稱取2.0 g已處理的濕樹脂，用濾紙吸干后裝入250 mL三角瓶中，加入已知濃度的南五味子醇乙粗提液50 mL，使兩者充分接觸，每20 min振搖1次，每次30 s，振搖2 h后再放置24 h至吸附飽和，過濾，測(cè)定濾液（吸附液）中五味子醇乙的質(zhì)量濃度[13]。按公式(3)計(jì)算南五味子醇乙被大孔樹脂吸附后的吸附量。

式中：Qe-吸附量(μg/g)；C0-南五味子醇乙在粗提液中的質(zhì)量濃度(μg/mL)；Ce-南五味子醇乙在吸附液中的質(zhì)量濃度(μg/mL)；V0-粗提液的體積(mL)；M-濕樹脂的質(zhì)量(μg/g)。

大孔吸附樹脂解析量的計(jì)算：用蒸餾水沖洗已吸附飽和的DM-130型大孔樹脂，而后再分別加入乙醇溶液50 mL，加入各種不同濃度乙醇溶液的大孔吸附樹脂每20 min振搖1次，每次30 s，振搖2 h后再繼續(xù)放置24 h直至解吸完全。測(cè)定解吸液中南五味子醇乙質(zhì)量濃度，按公式(4)計(jì)算大孔樹脂對(duì)南五味子醇乙解吸后的解吸量。

式中：Q1-解吸量(μg/g)；C1-解析后南五味子醇乙的質(zhì)量濃度(μg/mL)；V1-解吸液體積(mL)。

1.2.9 抑菌試驗(yàn) 菌懸液制備：挑取活化后的菌種，將其接種到注入一定量無菌水的試管中，振蕩搖勻，制成濃度1×105cfu/mL的菌懸液備用。

南五味子醇乙抑菌能力測(cè)定：將濾紙制成直徑為6 mm的圓紙片，于121℃干熱滅菌2 h，冷卻備用。將待試菌懸液各取0.1 mL加入到已倒好培養(yǎng)基的平板培養(yǎng)皿中涂布均勻。將南五味子醇乙提取液配制成100、50、25、12.5、6.25 mg/mL 5個(gè)濃度梯度（每個(gè)濃度做3組平行）。將滅菌濾紙片于各濃度提取液中浸漬完全后取出，干燥后放入含待測(cè)菌的培養(yǎng)皿表面中央，以無菌水為空白對(duì)照，于37℃培養(yǎng)24 h后取出觀察，用十字交叉法測(cè)量抑菌圈直徑[14-15]。

1.2.10 復(fù)配防腐保鮮劑的篩選及綠蘆筍保鮮試驗(yàn) 選用南五味子醇乙、蟲膠蠟、抗壞血酸、氯化鈣作為防腐保鮮劑配方的組分采用不同濃度設(shè)計(jì)成4因素3水平的實(shí)驗(yàn)處理。南五味子醇乙復(fù)配保鮮劑的配方篩選試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

表1 南五味子醇乙復(fù)配保鮮劑的配方篩選試驗(yàn)設(shè)計(jì)

綠蘆筍保鮮效果試驗(yàn)：選取無機(jī)械損傷、無病蟲害、挖采時(shí)間相近的新鮮綠蘆筍，用無菌水清洗、瀝干后按表1不同配方對(duì)其噴涂處理，在溫度為25℃、相對(duì)濕度為65%的條件下貯藏，分別在3、5、7、9、11天觀察測(cè)定綠蘆筍的4個(gè)主要影響指標(biāo)，與CK組比對(duì)，選擇綠蘆筍指標(biāo)均較優(yōu)的配方組合[16-17]。重復(fù)3次取其平均值。

用乙醇溶液提取蘆筍組織中的葉綠素，而后比色測(cè)定[18]。

采用酸堿洗滌法測(cè)定粗纖維含量[19]。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1.1 料液比對(duì)南五味子醇乙提取率的影響 由圖2可知，逐漸加大料液比，南五味子醇乙提取率也會(huì)隨之逐漸增大，當(dāng)料液比達(dá)到1:12時(shí)，提取率達(dá)到最大值。此后繼續(xù)加大料液比，提取率無明顯變化。因此，選擇最佳料液比為1:12。

圖2 料液比對(duì)南五味子醇乙提取率的影響

2.1.2 提取溫度對(duì)南五味子醇乙提取率的影響 由圖3可知，當(dāng)南五味子醇乙的提取溫度設(shè)置為80℃時(shí)，提取率達(dá)到最大值。當(dāng)提取溫度超過80℃時(shí)，提取率會(huì)出現(xiàn)明顯下降。因此，80℃為最佳提取溫度。

圖3 提取溫度對(duì)南五味子醇乙提取率的影響

2.1.3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)南五味子醇乙提取率的影響 由圖4可知，乙醇體積分?jǐn)?shù)85%時(shí)南五味子醇乙提取率出現(xiàn)最大值。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)超過85%，提取率會(huì)出現(xiàn)下降趨勢(shì)。因此，選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)為85%。

圖4 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)南五味子醇乙提取率的影響

2.1.4 提取時(shí)間對(duì)南五味子醇乙提取率的影響 由圖5可知，提取時(shí)長(zhǎng)為1.5 h南五味子醇乙提取率達(dá)到最大值，超過1.5 h提取率變化不明顯。因此，選擇最佳提取時(shí)間為1.5 h。

圖5 提取時(shí)間對(duì)南五味子醇乙提取率的影響

2.2 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.2.1 響應(yīng)面試驗(yàn)方案與結(jié)果 基于單因素實(shí)驗(yàn)，固定料液比1:12，根據(jù)提取溫度、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)3個(gè)對(duì)南五味子醇乙提取率影響較大的因素實(shí)施響應(yīng)面分析試驗(yàn)[20]。試驗(yàn)方案與結(jié)果見表2。

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果

2.2.2 回歸分析 利用Design-Expert8.0.6軟件，擬合分析表2數(shù)據(jù)，得到回歸方程模型(7)。

判斷方程一次項(xiàng)系數(shù)絕對(duì)值的大小，得出對(duì)南五味子醇乙提取率影響大小的因素順序?yàn)椋禾崛囟龋疽掖俭w積分?jǐn)?shù)＞提取時(shí)間[21]。

回歸模型系數(shù)的顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見表3。

由表3可知，方程模型P＜0.0001，表明該模型的顯著度較高；失擬項(xiàng)為0.0672，表明該模型能較好反映南五味子醇乙的實(shí)際值，可用來分析預(yù)測(cè)最佳提取工藝。

表3 回歸模型系數(shù)的顯著性檢驗(yàn)結(jié)果

回歸模型方差分析結(jié)果見表4。

由表4可知，模型校正相關(guān)系數(shù)為0.9963，說明該回歸模型可以用來解釋99.63%的響應(yīng)值變化，整體模型與實(shí)際情況擬合良好；C.V（.變異系數(shù)）=1.40%，表明該模型可較好地反映實(shí)際值。綜上分析可知，該模型可用于優(yōu)化南五味子醇乙的提取工藝。

表4 回歸模型方差分析結(jié)果

2.2.3 響應(yīng)面分析 由圖6可知，當(dāng)提取溫度一定時(shí)，南五味子醇乙提取率隨提取時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，當(dāng)提取時(shí)間在1.6～1.8 h時(shí)，提取率最大；當(dāng)提取時(shí)間一定時(shí)，提取率隨提取溫度的升高而增加，當(dāng)提取溫度在80℃～85℃時(shí)，提取率最大。由此可知，合適的提取溫度和提取時(shí)間對(duì)提取率的影響較為重要。

圖6 南五味子醇乙提取率受提取時(shí)間與提取溫度交互作用影響的等高線與響應(yīng)面

由圖7可知，當(dāng)提取溫度一定時(shí)，南五味子醇乙提取率隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大而增加，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)在86%～88%時(shí)，提取率最大；當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)一定時(shí)，提取率隨提取溫度的升高而增加，當(dāng)提取溫度在80℃～85℃時(shí)，提取率最大。由此可知，合適的提取溫度和乙醇體積分?jǐn)?shù)均對(duì)提取率的影響較為重要。

圖7 南五味子醇乙提取率受提取溫度與乙醇體積分?jǐn)?shù)交互作用影響的等高線與響應(yīng)面

由圖8可知，當(dāng)提取時(shí)間一定時(shí)，南五味子醇乙提取率隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大而增加，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)在86%～88%時(shí)，提取率最大；當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)一定時(shí)，提取率隨提取時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，當(dāng)提取時(shí)間在1.6～1.8 h時(shí)，提取率最大。由此可知，合適的提取時(shí)間和乙醇體積分?jǐn)?shù)均對(duì)提取率的影響較為重要。

圖8 南五味子醇乙提取率受提取時(shí)間與乙醇體積分?jǐn)?shù)交互作用影響的等高線與響應(yīng)面

2.2.4 回歸模型驗(yàn)證性試驗(yàn) 提取南五味子醇乙的最佳工藝條件可通過回歸模型預(yù)測(cè)得出，即提取溫度81.77℃、提取時(shí)間1.68 h，乙醇體積分?jǐn)?shù)86.98%，得到2.504 mg/g預(yù)測(cè)響應(yīng)值。綜合實(shí)際操作選擇提取的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)條件為：料液比1:12、提取時(shí)間1.7 h、提取溫度82℃、乙醇體積分?jǐn)?shù)87%，進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，得到響應(yīng)值為2.501 mg/g，與理論值的偏差為0.003 mg/g?；貧w模型驗(yàn)證性試驗(yàn)結(jié)果見表5。

表5 南五味子醇乙提取工藝驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

2.3 純化結(jié)果分析

南五味子中除木脂素類外，還有萜類物質(zhì)等。不同樹脂性能不同，對(duì)有效成分的吸附及解吸程度也有所區(qū)別。采用DM-130型大孔樹脂對(duì)南五味子醇乙純化，其純度提高了15.02%[22]。大孔吸附樹脂純化結(jié)果見表6。

表6 DM-130型大孔樹脂純化南五味子醇乙結(jié)果

2.4 純化前后抑菌效果對(duì)比及最低抑菌濃度結(jié)果分析

2.4.1 抑菌效果對(duì)比結(jié)果與分析 南五味子醇乙純化前后抑菌效果對(duì)比結(jié)果見表7。

由表7可知，南五味子醇乙對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌以及乙型副傷寒沙門氏菌均有抑制作用，且經(jīng)DM-130型大孔樹脂純化后，抑菌效果明顯增強(qiáng)。

表7 南五味子醇乙純化前后抑菌效果對(duì)比結(jié)果

2.4.2 最低抑菌濃度結(jié)果與分析 南五味子醇乙對(duì)3種供試菌的最低抑菌濃度見表8。

由表8可知，南五味子醇乙對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌效果較強(qiáng)，最低抑菌濃度為12.5 mg/mL；其次為大腸埃希氏菌，最低抑菌濃度為25 mg/mL；對(duì)乙型副傷寒沙門氏菌抑制效果較弱，最低抑菌濃度為50 mg/mL。

表8 南五味子醇乙對(duì)3種供試菌的最低抑菌濃度結(jié)果

2.5 最佳復(fù)配防腐保鮮劑的篩選及綠蘆筍保鮮試驗(yàn)結(jié)果分析

不同配方組合對(duì)綠蘆筍腐爛率的影響結(jié)果見表9。

由表9可見，在25℃、RH65%條件下，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，用不同濃度的復(fù)配組合噴灑處理的綠蘆筍腐爛率均呈上升趨勢(shì)。貯藏11天時(shí)，第3組配方噴灑處理的綠蘆筍腐爛率最低，為27.38%。

表9 不同配方組合對(duì)綠蘆筍腐爛率的影響結(jié)果 %

不同配方組合對(duì)綠蘆筍總?cè)~綠素含量的影響結(jié)果見表10。

由表10可見，在25℃、RH65%條件下，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，用不同濃度的復(fù)配組合噴灑處理的綠蘆筍總?cè)~綠素含量均呈下降趨勢(shì)。貯藏11天時(shí)，第3組配方噴灑處理的綠蘆筍總?cè)~綠素含量最高，損失量?jī)H為14.71×10-6g/g。

表10 不同配方組合對(duì)綠蘆筍總?cè)~綠素含量的影響結(jié)果 (×10-6g/g)

不同配方組合對(duì)綠蘆筍失重率的影響結(jié)果見表11。

由表11可知，在25℃、RH65%條件下，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，用不同濃度的復(fù)配組合噴灑處理的綠蘆筍失重率均呈上升趨勢(shì)。貯藏11天時(shí)，第3組配方噴灑處理的綠蘆筍失重率最低，變化量為2.42%。

表11 不同配方組合對(duì)綠蘆筍失重率的影響結(jié)果 %

不同配方組合對(duì)綠蘆筍粗纖維含量的影響結(jié)果見表12。

由表12可見，在25℃、RH65%條件下，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，用不同濃度的復(fù)配組合噴灑處理的綠蘆筍粗纖維含量均呈上升趨勢(shì)。貯藏11天時(shí)，第3組配方噴灑處理的綠蘆筍粗纖維含量最低，僅為28.48%。

表12 不同配方組合對(duì)綠蘆筍粗纖維含量的影響結(jié)果 %

綜上，綠蘆筍保藏較優(yōu)復(fù)合防腐保鮮劑為第3組配方組合：2.5%南五味子醇乙+0.75%蟲膠蠟+2%抗壞血酸+1%氯化鈣。

3 討論

（1）本研究采用響應(yīng)面優(yōu)化超聲輔助乙醇提取南五味子中的醇乙，在超聲波的作用下，促使植物細(xì)胞組織破壁或變形，有利于充分提取目標(biāo)成分，與程振玉、張悅怡等[23-24]的提取工藝原理基本一致。

（2）本研究采用DM-130型大孔樹脂對(duì)南五味子醇乙提取液進(jìn)行了初步純化，因?qū)嶒?yàn)室條件有限，純化后可能仍含有少量雜質(zhì)，在今后研究中，應(yīng)進(jìn)一步優(yōu)化南五味子醇乙純化工藝，提高純度，增強(qiáng)其抑菌保鮮效果。

（3）本研究以商洛市藥食兩用的南五味子為研究對(duì)象，與蟲膠蠟、抗壞血酸、氯化鈣復(fù)配，制備天然復(fù)合防腐保鮮劑并用于綠蘆筍的保藏。利用中草藥提取物抑菌、抗壞血酸抗氧化、蟲膠蠟成膜抗菌性等特點(diǎn)，克服了單一防腐保鮮劑抗菌譜窄、抑菌效果不佳等缺陷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與CK組相比，實(shí)驗(yàn)組可在一定程度上延長(zhǎng)綠蘆筍的保藏期。與張曉虎[20]等結(jié)論基本一致。但由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間、操作條件有限，保鮮劑在綠蘆筍表面成膜時(shí)間、膜層厚度等還待進(jìn)一步測(cè)定。在今后研究中，應(yīng)對(duì)成膜層的各項(xiàng)性能進(jìn)行測(cè)定并將此配方應(yīng)用于其他果蔬，進(jìn)一步為以南五味子醇乙為有效成分制備復(fù)合防腐保鮮劑并用于果蔬保鮮提供支撐。

4 結(jié)論

本研究以商洛南五味子為研究對(duì)象，采用響應(yīng)面優(yōu)化超聲輔助乙醇提取南五味子醇乙工藝，通過抑菌實(shí)驗(yàn)確定最小抑菌濃度，輔以蟲膠蠟、抗壞血酸、氯化鈣制備防腐保鮮劑，并對(duì)綠蘆筍進(jìn)行保藏試驗(yàn)以驗(yàn)證保鮮效果，得到結(jié)論如下：

（1）在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面優(yōu)化分析得到的南五味子醇乙提取方案為：料液比1:12、提取溫度82℃、87%的乙醇浸提1.7 h，南五味子醇乙的提取率為2.501 mg/g。影響提取率的因素順序?yàn)椋禾崛囟龋疽掖俭w積分?jǐn)?shù)＞提取時(shí)間。

（2）南五味子醇乙對(duì)供試菌種均有一定的抑菌效果，且經(jīng)過DM-130大孔樹脂純化后效果更好，其順序?yàn)椋航瘘S色葡萄球菌＞大腸埃希氏菌＞乙型副傷寒沙門氏菌。

（3）南五味子醇乙輔以蟲膠蠟、抗壞血酸、氯化鈣制備防腐保鮮劑，對(duì)綠蘆筍進(jìn)行涂膜保鮮試驗(yàn)，以腐爛率、總?cè)~綠素含量、失重率、粗纖維含量為指標(biāo)，得出南五味子醇乙復(fù)配保鮮劑較優(yōu)配方為：2.5%南五味子醇乙+0.75%蟲膠蠟+2%抗壞血酸+1%氯化鈣，使綠蘆筍貯藏保鮮時(shí)間達(dá)11天。