溫碧柔，林來鳳，賴文娜，陳仕林，劉 活，易潤(rùn)華

（廣東海洋大學(xué)濱海農(nóng)業(yè)學(xué)院，廣東 湛江 524088）

【研究意義】椰子（Cocos nucifera）為棕櫚科（Palmae）椰子屬（Cocos）多年生熱帶木本油料和食品能源作物。椰子原產(chǎn)于亞洲東南部、印度尼西亞至太平洋群島，主要分布于亞洲、非洲、拉丁美洲等赤道濱海地區(qū)，主產(chǎn)國(guó)有中國(guó)、印度尼西亞、斯里蘭卡、印度、菲律賓、泰國(guó)和馬來西亞等國(guó)家。我國(guó)種植椰子有2000 多年歷史，在我國(guó)海南、臺(tái)灣、廣東、福建、廣西、云南南部均有栽培。椰樹高大挺拔美觀，在熱帶亞熱帶地區(qū)可作為園林綠化樹種；椰果經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，可加工為形色多樣的產(chǎn)品［1］；椰汁富含蛋白質(zhì)、果糖、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高；椰肉可加工膳食食品［2］，具有很大的開發(fā)潛力。2018 年我國(guó)椰子主產(chǎn)區(qū)海南省的種植面積3.36 萬hm2，總產(chǎn)值達(dá)3.86 億元，總產(chǎn)量2.26 億個(gè)，而2011 年的總產(chǎn)值曾達(dá)4.79 億元［3］。因此，椰子種植可增加農(nóng)民就業(yè)機(jī)會(huì)和經(jīng)濟(jì)收入，促使農(nóng)民脫貧致富，實(shí)現(xiàn)鄉(xiāng)村振興，促進(jìn)熱帶現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展。【前人研究進(jìn)展】據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，約600 多種真菌侵染椰子樹根部、葉片、莖干和椰果，引起各種病害［4］。椰果腐病是椰子種植中常見的病害，由多種腐霉如棕櫚疫霉Phytophthora palmivora、桂氏疫霉P.katsurae、P.castaneae和P.heveae等引起，在樹上引起椰果褐色腐爛，播種發(fā)芽時(shí)引起芽腐爛。在苗期主要發(fā)生葉部病害，主要有灰斑?。ㄗ貦皵M盤多毛孢菌Pestalotiopsis palmarum）［5］和炭疽?。–olletrotrichum gloeosporioides）［6］等病害侵染。莖泄血?。╯tem bleeding）又稱莖干腐爛病（stem rot），在椰子種植區(qū)均有發(fā)生，是一種世界性的病害，對(duì)椰子產(chǎn)業(yè)發(fā)展影響極大。該病害的病原菌為奇異根串珠霉菌Thielaviopsis paradoxa，有性型為Ceratocystis paradoxa，可侵染椰樹莖稈，形成黑色病斑，受侵染部位溢出紅棕色液汁，導(dǎo)致莖干腐爛［7-8］。在我國(guó)椰子主要發(fā)生的病害有莖泄血病、果腐病和葉部病害。近年來，報(bào)道的椰子病害主要有椰苗葉斑?。˙ipolaris setariae［9］、Colletrotrichum gloeosporioides［6］和Curvulariaoryzae［10］）、椰果蒂腐?。↙asiodiplodia theobromae［11］和Pestalotiopsis adusta［12］）、葉枯?。≒.menezesiana）［13］等?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】椰果采收后發(fā)生的病害主要有椰果底腐?。?4］和黑腐?。?5］，2017 年12 月，在廣東省湛江地區(qū)的椰子交易市場(chǎng)發(fā)現(xiàn)一種引起椰子果實(shí)外果皮黑色腐爛的病害。該病害引起約15%～20% 的果實(shí)腐爛。病害發(fā)生后傳播速度極快，嚴(yán)重時(shí)侵染內(nèi)果皮，導(dǎo)致椰肉腐爛和椰汁變質(zhì)，經(jīng)濟(jì)價(jià)值受損嚴(yán)重?！緮M解決的關(guān)鍵問題】為確定椰子腐爛的病原菌，本試驗(yàn)對(duì)從腐爛果中分離到的純培養(yǎng)物進(jìn)行致病性測(cè)定，根據(jù)分離物形態(tài)學(xué)特征和ITS 序列分析確定其分類地位，并研究其生物學(xué)特性，以期為該病害的防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病原菌的分離

用稀釋分離法分離病原菌。從發(fā)病的椰果上挑取孢子進(jìn)行梯度稀釋制成菌懸液，用混菌法接種到PDA 培養(yǎng)基，置于25 ℃恒溫箱中培養(yǎng)3 d，待菌落長(zhǎng)出，挑取單菌落，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 致病性及寄主范圍測(cè)定

1.2.1 致病性測(cè)定 純培養(yǎng)物接種到PDA 培養(yǎng)基25 ℃黑暗培養(yǎng)3 d。選取健康的椰子經(jīng)75%酒精表面消毒后，接種直徑為6 mm的菌餅，室溫（25～28℃）保濕，觀察病害發(fā)生情況。試驗(yàn)設(shè)3 次重復(fù)，以接種6 mm 不帶菌的培養(yǎng)基作為對(duì)照。

1.2.2 寄主范圍測(cè)定 接種方法同致病性測(cè)定，13種供試寄主植物分別為香蕉Musa nana、芒果Mangifera indica、菠蘿Ananas comosus、甘蔗Saccharum officinarum、豆薯Pachyrhizus erosus、木薯Manihot esculenta、菠蘿蜜Artocarpusheterophyllus、龍血樹Dracaena angustifolia、番木瓜Carica papaya、番薯Ipomoea batatas、白蘿卜Raphanus sativus、木蘭Magnolia lilifl ora和富貴竹Dracaena sanderiana。香蕉、芒果、菠蘿和菠蘿蜜的接種部位為果實(shí)，白蘿卜、番薯和豆薯的接種部位為塊根，龍血樹、木蘭、富貴竹和番木瓜的接種部位為葉片，木薯和甘蔗的接種部位為莖桿。

1.3 病原菌鑒定

1.3.1 形態(tài)特征鑒定 參照De Beer 等［16］方法，將病原菌接種到PDA 培養(yǎng)基，25 ℃黑暗培養(yǎng)3 d，觀察菌落形態(tài)、產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)、孢子形態(tài)特征。

1.3.2 ITS 序列分析 按照童依婷等［17］的方法PCR 擴(kuò)增病原菌ITS 序列。擴(kuò)增引物為ITS1（TCC GTA GGT GAA CCT GCG G）和ITS4（TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC）。PCR 反應(yīng)體系采用TaKaRa 公司的MightyAmp DNA Polymerase Ver.2試劑盒，擴(kuò)增體積為50 μL，含1×MightyAmp Buffer、0.2 μmol/L 上下游引物，1.25 U MightyAmp DNA 聚合酶。擴(kuò)增程序：98 ℃預(yù)變性2 min，98 ℃變性10 s，56 ℃退火15 s，68 ℃延伸 1 min，35 個(gè)循環(huán)。PCR 產(chǎn)物由生工生物工程（上海）股份有限公司測(cè)序。所得序列在GenBank 進(jìn)行BLAST 比對(duì)和同源性分析，用MEGA6.0 軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，用Bootstrap 進(jìn)行自舉檢驗(yàn)，1000 次重復(fù)。

1.4 生物學(xué)特性測(cè)定

測(cè)定溫度、光照、pH、碳源、氮源和培養(yǎng)基對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢量和孢子萌發(fā)的影響。用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，顯微直接計(jì)數(shù)測(cè)定病原菌的產(chǎn)孢量。將孢子懸浮液涂布在帶有厚度約為2 mm PDA 培養(yǎng)基的玻片，保濕培養(yǎng)6 h 后，記錄孢子萌發(fā)量，計(jì)算孢子萌發(fā)率。每個(gè)處理3次重復(fù)。

1.4.1 溫度 將病原菌接種到PDA 后分別置于5、10、15、20、25、30、35 ℃黑暗培養(yǎng)3 d。

1.4.2 光照 將病原菌分別接種到PDA 培養(yǎng)基后分別置于24 h 光照、12 h光照12 h黑暗、24 h黑暗、10 min 紫外線+24 h 光照、10 min 紫外線+24 h 黑暗條件下，室溫（25～28℃）培養(yǎng)3 d。

1.4.3 pH 將病原菌分別接種至pH 為2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0 的PDA培養(yǎng)基后置于25 ℃黑暗培養(yǎng)3 d。

1.4.4 碳源和氮源 分別用等質(zhì)量的葡萄糖、半乳糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、棉子糖、淀粉和阿拉伯樹膠，替換察氏培養(yǎng)基中的蔗糖，以不加碳源為對(duì)照；用硫酸銨、硝酸鈉、明膠、水解乳蛋白、甘氨酸、尿素、牛肉膏、酵母粉代替察氏培養(yǎng)基中的NaNO3，以不加氮源為對(duì)照，病原菌接種后置于25 ℃黑暗培養(yǎng)3 d。

1.4.5 培養(yǎng)基 測(cè)試培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA：土豆200.0 g、瓊脂20.0 g、葡萄糖20.0 g、水1 L）、馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基（PSA：土豆200.0 g、瓊脂20.0 g、蔗糖20.0 g、水1 L）、燕麥培養(yǎng)基（OMA：燕麥片30.0 g、瓊脂17.0 g、水1 L）、椰子葉培養(yǎng)基（MCL：椰子葉30.0 g、瓊脂20.0 g、水1 L）、胡蘿卜培養(yǎng)基（CM：胡蘿卜100.0 g、瓊脂18 g、水1 L）、玉米粉培養(yǎng)基（CMM：玉米粉17.0 g、瓊脂15.0 g、水1 L）、葡萄糖蛋白胨酵母培養(yǎng)基（GTYA：蛋白胨2.0g、酵母粉1.0 g、葡萄糖10.0 g、瓊脂20.0 g、水1 L）。

1.5 室內(nèi)毒力測(cè)定

6 種供試藥劑：250 g/L 戊唑醇乳油、400 g/L氟硅唑乳油、300 g/L苯甲·丙環(huán)唑（150 g/L丙環(huán)唑、150 g/L 苯醚甲環(huán)唑）乳油、30%苯甲·吡唑酯（20%苯醚甲環(huán)唑、10%吡唑醚菌酯）乳油、60%唑醚·代森聯(lián)（55%代森聯(lián)、5%吡唑醚菌酯）水分散粒劑、40%氟硅唑·吡唑乳。試驗(yàn)方法參照楊世杰等［18］和谷會(huì)等［19］的方法。

應(yīng)用SPSS 21.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA及DUNCAN 氏新復(fù)極差法分析，并用 MEGA 6 軟件進(jìn)行圖表分析。用Excel 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行殺菌劑毒力測(cè)定的生物統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 致病性及寄主范圍測(cè)定

2.1.1 致病性 自然發(fā)病的椰子果實(shí)內(nèi)部棕黑色腐爛，表面長(zhǎng)出白色菌絲，并逐漸變成灰黑色（圖1A），形成黑色粉層，果實(shí)腐爛。將從具典型癥狀病組織分離到的菌株YZS 接種到健康無病的椰子，10 d 后，果柄斷裂，斷裂處有白色菌絲，內(nèi)部果肉呈黑褐色（圖1B），隨后整個(gè)果實(shí)呈棕褐色腐爛。病果上菌絲生長(zhǎng)茂盛，菌絲初期白色，后期全部變?yōu)榛液谏▓D1C），散發(fā)出香味。人工接種健康椰子腐爛的癥狀與自然發(fā)病癥狀一致，對(duì)照不發(fā)病。從人工接種發(fā)病組織中重新分離的純培養(yǎng)物性狀與菌株YZS 相同，證明菌株YZS 為椰子果腐病的病原菌。

2.1.2 寄主范圍 用菌株YZS 接種13 種植物，其中菠蘿蜜、甘蔗、木薯、香蕉、豆薯、龍血樹、芒果和菠蘿8 種植物在接種部位形成病斑，引起發(fā)病。

圖1 椰子果腐病癥狀Fig.1 Symptoms of fruit rot on Cocos nucifera

2.2 病原菌鑒定

2.2.1 形態(tài)特征 在PDA平板上，病原菌生長(zhǎng)迅速，25 ℃恒溫培養(yǎng)菌落直徑 73.7（±0.5）mm，3 d后長(zhǎng)滿9.00 cm的培養(yǎng)皿，菌落初期白色，后變黑（圖2A、B），散發(fā)出果香味。氣生菌絲棉絮狀，菌絲無色，有分隔，分生孢子有大、小兩型。大型分生孢子串生于菌絲頂端的孢子梗上（圖2C、D），鏈狀排列（圖2E、F），單胞，橢圓形，壁較厚，初為無色透明至棕黃色，老熟時(shí)為黑褐色，大小為17.3～25.6 μm×9.3～14.6 μm〔平均為20.9（±2.0）μm×11.9（±1.1）μm〕（圖2G）。小型分生孢子內(nèi)生于瓶梗狀產(chǎn)孢細(xì)胞中，孢子排列成串，成熟后自梗末端的孔口依次釋放（圖2 H～J），孢子圓柱形，薄壁，無色，平滑，老熟時(shí)為棕褐色，大小為6.9～11.7 μm×3.3～4.9 μm〔平均為9.3（±1.0）μm×4.2（±0.4）μm〕（圖2K）。

2.2.2 ITS 序列分析 椰子果腐病菌的ITS 序列長(zhǎng)約為520 bp，經(jīng)BLAST 分析，與Thielaviopsis ethacetica（KU377506）、T.paradoxa（MG062870）、T.musarum（JX5183250）、Ceratocystis paradoxa（KJ881375）的同源性為100%。利用MEGA6.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，顯示椰子果腐病原菌與它們處于同一分支的自舉值為100%（圖3）。根據(jù)形態(tài)學(xué)特征（差異分析見表1）及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，將椰子果腐病原菌鑒定為Thielaviopsis paradoxa［20-21］。

圖2 椰子果腐病病原菌形態(tài)Fig.2 Morphology of Thielaviopsis paradoxa

2.3 生物學(xué)特性

2.3.1 溫度 溫度對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)影響差異顯著。在PDA 培養(yǎng)基上，椰子果腐病菌的生長(zhǎng)溫度為5～35 ℃；在5、10、35 ℃菌絲生長(zhǎng)直徑和產(chǎn)孢量為0，5、10 ℃孢子萌發(fā)率低，而35℃孢子萌發(fā)率為47.08%。在15～30 ℃病原菌可生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)，25、30 ℃菌落直徑為88.0 mm，25 ℃時(shí)產(chǎn)孢量最大，達(dá)190.00×106個(gè)/皿；在5～35 ℃孢子均能萌發(fā)，25 ℃孢子萌發(fā)率最高達(dá)49.76%（表2）。

2.3.2 光照 光照對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)的影響有顯著差異（表3）。24 h 光照條件下菌落生長(zhǎng)最快、孢子萌發(fā)率最高，菌落直徑和萌發(fā)率分別為88.0 mm 和70.28%，光照有利于菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)；24 h 黑暗培養(yǎng)病原菌產(chǎn)孢量最大，產(chǎn)孢量最大，達(dá)13.50×106個(gè)/皿；紫外線對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)均有顯著的抑制作用。24 h 黑暗或24 h 光照培養(yǎng)時(shí)，增加10 minUV 照射，可顯著減小菌落直徑，降低產(chǎn)孢量和孢子萌發(fā)率（表3）。

圖3 基于椰子果腐病菌ITS 序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 Phylogenetic tree of based on the ITS sequences of Thielaviopsis paradoxa

表1 椰子果腐病菌與其近源種形態(tài)特征比較Table 1 Morphological comparison of Thielaviopsis paradoxa with the relative Thielaviopsis spp.

表2 溫度對(duì)椰子果腐病菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響Table 2 Effect of temperature on the mycelial growth,spore production and spore germination of Thielaviopsis paradoxa

2.3.3 pH 由表4 可知，病原菌在pH 2～10 范圍內(nèi)均可生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，pH 6 時(shí)菌落直徑和產(chǎn)孢量最大，分別為79.8 mm 和10.42×107個(gè)/皿，最適合菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢。孢子在pH 2～11 均能萌發(fā)，pH 5 時(shí)萌發(fā)率最高，達(dá)32.07%，pH 2 時(shí)萌發(fā)率最低，僅為0.13%。

2.3.4 碳源對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響 由表5 可知，病原菌可利用不同碳源物質(zhì)進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)。碳源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)影響差異顯著，除阿拉伯樹膠，其余碳源對(duì)病原菌產(chǎn)孢影響差異不顯著。以阿拉伯樹膠作物碳源物質(zhì)，菌絲生長(zhǎng)速度之快，產(chǎn)孢量最大，培養(yǎng)3 d 后菌落直徑達(dá)88.0 mm，產(chǎn)孢量達(dá)18.33×105個(gè)/皿。以淀粉為碳源時(shí)有利于孢子萌發(fā)，萌發(fā)率最高為5.03%。

2.3.5 氮源對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響 氮源對(duì)病原菌生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)影響差異顯著。以酵母粉為氮源時(shí)病原菌的菌絲生長(zhǎng)最快，菌落直徑達(dá)63.7 mm；最容易產(chǎn)孢，產(chǎn)孢量為52.09×106個(gè)/皿；孢子萌發(fā)率最高。硝酸鈉、硫酸銨、水解乳蛋白、明膠、甘氨酸和尿素對(duì)孢子形成影響差異不顯著，產(chǎn)孢量明顯低于牛肉膏和酵母粉（表6）。

2.3.6 培養(yǎng)基對(duì)菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響 病原菌在測(cè)試的7 種培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)。在PDA、PSA 和GTYA 培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)差異不顯著，但在PDA 培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最快，菌落直徑達(dá)74.7 mm；在PSA 培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最大，達(dá)12.56×107個(gè)/皿，在OMA、MCL、CM 和CMM 培養(yǎng)基上產(chǎn)孢結(jié)差異不顯著；OMA 最適合病原菌孢子萌發(fā)，萌發(fā)率達(dá)41.46%，MCL 萌發(fā)率最低，僅為0.07%（表7）。

2.6 6 種殺菌劑對(duì)病原菌的影響

對(duì)250 g/L 戊唑醇乳油、400 g/L 氟硅唑乳油、300 g/L 苯甲·丙環(huán)唑乳油、30%苯甲·吡唑酯乳油、60%唑醚·代森聯(lián)水分散粒劑、40%氟硅唑·吡唑乳6 種殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，結(jié)果表明，6 種殺菌劑均對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)有抑制作用，其EC50分別為0.499、0.020、0.024、0.045、27.200、0.005 mg/L。氟硅唑·吡唑抑制菌絲生長(zhǎng)效果最好，氟硅唑和苯甲·丙環(huán)唑次之。

表3 光照對(duì)椰子果腐病菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響Table 3 Effects of light treatments on mycelia growth,spore production and spore germination of Thielaviopsis paradoxa

表4 pH 對(duì)椰子果腐病菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響Table 4 Effect of pH on the mycelia growth,spore production and spore germination of Thielaviopsis paradoxa

表5 碳源對(duì)椰子果腐病菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響Table 5 Effects of carbon sources on the mycelia growth,spore production and spore germination of Thielaviopsis paradoxa

表6 氮源對(duì)椰子果腐病菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響Table 6 Effects of nitrogen sources on the mycelial growth,spore production and spore germination of Thielaviopsis paradoxa

表7 培養(yǎng)基對(duì)椰子果腐病菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的影響Table 7 Effects of media on the mycelial growth,spore production and spore germination of Thielaviopsis paradoxa

250g/L 戊唑醇乳油、400 g/L 氟硅唑乳油、300 g/L 苯甲·丙環(huán)唑乳油、30%苯甲·吡唑酯乳油、40%氟硅唑·吡唑乳5 種殺菌劑對(duì)病原菌孢子萌發(fā)有抑制作用，EC50分別為9.411、38.340、11.777、8.864、3.657 mg/L，氟硅唑·吡唑抑制孢子萌發(fā)效果最好，苯甲·吡唑酯次之。

3 討論

奇異根串珠霉菌（T.paradoxa）是一個(gè)從受傷寄主組織侵入的土傳植物病原真菌，寄主范圍廣，可侵染30 多種寄主，對(duì)重要的經(jīng)濟(jì)作物如菠蘿、甘蔗和椰子等造成很大損失［4］。在華南地區(qū)可侵染椰子、菠蘿、香龍血樹、甘蔗、棕櫚等植物引起病害［8,23-26］，本研究致病性侵染結(jié)果表明該病原物還可以侵染香蕉、芒果、豆薯、菠蘿蜜和木薯等多種作物。該病菌可引起菠蘿黑腐病、香蕉冠腐病和椰果內(nèi)部腐爛等病害［27］，是重要的采后病害病原菌。

椰子果腐病菌（T.paradoxa）在25～30 ℃生長(zhǎng)速度快、產(chǎn)孢量大和孢子萌發(fā)率高，具有較好的耐熱性，病原菌在弱酸條件（pH=6）下菌絲生長(zhǎng)速度最快和產(chǎn)孢量最大，與谷會(huì)等［19］和余鳳玉等［8］研究結(jié)果一致。病原菌生長(zhǎng)速度快、產(chǎn)孢量大、孢子萌發(fā)率高和耐熱性好等特性意味著病原菌具有較好適應(yīng)環(huán)境變化的能力，加大了椰子果腐病病害的防控難度。紫外線對(duì)該病原菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)有抑制作用，光照對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)、孢子產(chǎn)生和孢子萌發(fā)有促進(jìn)作用，這與谷會(huì)等［19］報(bào)道的結(jié)果不同。奇異根串珠霉菌生物學(xué)特性研究結(jié)果不同反映該病原菌在自然界中存在一定的遺傳多樣性，是否存在致病性分化，還需要進(jìn)一步研究。

椰果采收后易受病原菌的侵染，選用合適的藥劑進(jìn)行防腐保鮮是非常必要的。本試驗(yàn)的氟硅唑·吡唑?qū)σ庸【z生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的EC50值分別為0.005 mg/L 和3.657 mg/L，苯甲·吡唑酯則分別為0.045 mg/L 和8.864 mg/L，兩種殺菌劑均有較明顯的抑菌效果。谷會(huì)等測(cè)定咪鮮胺和苯醚甲環(huán)唑殺菌劑對(duì)奇異根串珠霉菌絲生長(zhǎng)有很好的抑菌效果［19］，其EC50分別為0.0111、0.0126 mg/L。這些殺菌劑對(duì)椰子果腐病菌抑菌都有很好的抑制作用，可用于椰子貯藏期的病害防控。

4 結(jié)論

通過致病性測(cè)定、形態(tài)學(xué)特征和系統(tǒng)發(fā)育分析，確定椰子果腐病的病原菌為奇異根串珠霉菌（Thielaviopsis paradoxa），病原物通過人工接種還可以侵染龍血樹、香蕉、芒果、豆薯、菠蘿蜜和木薯等植物。

環(huán)境因子影響病原菌的生長(zhǎng)。在25～30 ℃菌絲生長(zhǎng)速度快，產(chǎn)孢量大，孢子萌發(fā)率高；光暗交替和紫外線可抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)、孢子產(chǎn)生和萌發(fā)；弱酸環(huán)境（pH=6）有利于菌絲生長(zhǎng)和孢子形成，而酸性環(huán)境（pH=4、5）更適合孢子萌發(fā)。

氟硅唑·吡唑和苯甲·吡唑酯對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)均有很好的抑制作用，可用于該病害的化學(xué)防治。