周躍華，路金才，周 娟，宋宗華

·專 論·

關(guān)于中藥新藥復(fù)方制劑“整體鑒別”新模式的思考

周躍華1，路金才2，周 娟3，宋宗華4

1. 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局 藥品審評(píng)中心，北京 100022 2. 沈陽(yáng)藥科大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110016 3. 四川省食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院，四川 成都 611731 4. 國(guó)家藥典委員會(huì)，北京 100061

中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)設(shè)置薄層色譜（thin layer chromatography，TLC）鑒別的目的既是檢驗(yàn)制劑是否按規(guī)定的處方藥味投料，也是反映制劑的整體質(zhì)量特征進(jìn)行真?zhèn)舞b別。在此基礎(chǔ)上，提出中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)TLC研究可按“整體鑒別”的新模式開展，并對(duì)TLC“整體鑒別”的思路、方法等提出建議，對(duì)TLC的處方藥味鑒別與制劑整體鑒別進(jìn)行了對(duì)比分析。TLC整體鑒別具有以下優(yōu)勢(shì)或特點(diǎn)：可充分利用樣品展開后的斑點(diǎn)信息，可提高結(jié)果判斷的準(zhǔn)確性，鑒別試驗(yàn)次數(shù)相對(duì)較少。TLC“整體鑒別”為中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)研究提供了可反映中藥制劑整體質(zhì)量特征的新模式。

中藥復(fù)方制劑；薄層色譜；處方藥味鑒別；整體鑒別；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

薄層色譜（thin layer chromatography，TLC）法具有設(shè)備簡(jiǎn)單、鑒別專屬性強(qiáng)等特點(diǎn)。20世紀(jì)80年代以來，TLC板、點(diǎn)樣技術(shù)、展開技術(shù)、儀器設(shè)備等方面快速發(fā)展。目前TLC法已成為中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中定性鑒別的主要手段，是中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的重要組成部分，在提高中藥制劑質(zhì)量可控性方面發(fā)揮了積極作用。但是，在TLC鑒別研究的思路及方法等方面仍有一些內(nèi)容值得進(jìn)一步探討。本文提出中藥新藥復(fù)方制劑TLC“整體鑒別”的設(shè)想，并對(duì)相關(guān)問題進(jìn)行討論，供同行參考。

1 TLC鑒別的目的

1.1 檢驗(yàn)中藥復(fù)方制劑是否按規(guī)定處方藥味投料

業(yè)內(nèi)一般認(rèn)為：中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)TLC鑒別的目的在于檢驗(yàn)中藥制劑是否按規(guī)定的處方藥味進(jìn)行投料。包括《中國(guó)藥典》在內(nèi)的中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)的設(shè)置大多按鑒別藥味分列，1個(gè)處方藥味1個(gè)鑒別項(xiàng)。鑒別研究多以對(duì)照藥材或化學(xué)對(duì)照品為對(duì)照，同時(shí)，以不含相應(yīng)處方藥味的樣品為陰性對(duì)照?！吨兴幮滤幯芯康募夹g(shù)要求》中“中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的起草說明”【鑒別】項(xiàng)下要求：“可根據(jù)處方組成及研究資料確定建立相應(yīng)的鑒別項(xiàng)目，原則上處方各藥味均應(yīng)進(jìn)行試驗(yàn)研究，根據(jù)試驗(yàn)情況，選擇列入標(biāo)準(zhǔn)中。首選君藥、貴重藥、毒性藥。因鑒別特征不明顯，或處方中用量較小而不能檢出者應(yīng)予說明，再選其他藥材鑒別”。從上述內(nèi)容看，中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)一般是針對(duì)處方藥味進(jìn)行研究。

從處方藥味投料的管理看，不按國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的處方投料，應(yīng)屬于“藥品所含成分與國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的成分不符”，所生產(chǎn)的藥品為假藥。《藥品管理法》（2019年版）規(guī)定“生產(chǎn)、銷售假藥的，沒收違法生產(chǎn)、銷售的藥品和違法所得，責(zé)令停產(chǎn)停業(yè)整頓，吊銷藥品批準(zhǔn)證明文件，并處違法生產(chǎn)、銷售的藥品貨值金額十五倍以上三十倍以下的罰款……”?！端幤飞a(chǎn)監(jiān)督管理辦法》（2020年版）要求“從事藥品生產(chǎn)活動(dòng)，應(yīng)當(dāng)遵守藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，按照國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)、經(jīng)藥品監(jiān)督管理部門核準(zhǔn)的藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)和生產(chǎn)工藝進(jìn)行生產(chǎn)……，對(duì)質(zhì)量體系運(yùn)行過程進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和持續(xù)改進(jìn)，保證藥品生產(chǎn)全過程持續(xù)符合法定要求。生產(chǎn)、檢驗(yàn)等記錄應(yīng)當(dāng)完整準(zhǔn)確，不得編造和篡改”?！端幤飞a(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》也要求企業(yè)必須建立質(zhì)量保證系統(tǒng)，同時(shí)建立完整的文件體系，保證系統(tǒng)有效運(yùn)行。在中藥制劑的生產(chǎn)過程中，藥材、飲片、中間體、制劑的接受、發(fā)放、生產(chǎn)等均有完整記錄及檢驗(yàn)報(bào)告。生產(chǎn)企業(yè)還應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理，建立追溯體系，防止可能的差錯(cuò)和混淆。此外，省級(jí)藥品監(jiān)管部門負(fù)責(zé)對(duì)轄區(qū)內(nèi)的藥品生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行監(jiān)督檢查。依據(jù)現(xiàn)行法規(guī)，如果不按規(guī)定的處方藥味投料生產(chǎn)屬于嚴(yán)重的違法行為，而不僅是藥品質(zhì)量不合格的問題。根據(jù)上述制度設(shè)計(jì)，是否按規(guī)定處方藥味投料的監(jiān)管并非主要通過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)的檢驗(yàn)來實(shí)現(xiàn)。

目前，已上市中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，鑒別的藥味數(shù)一般僅占處方的1/4～1/3，大多數(shù)品種未能覆蓋處方的全部藥味（處方較小的復(fù)方制劑除外），尤其是處方藥味數(shù)較多的品種。如采用TLC鑒別對(duì)中藥復(fù)方制劑處方藥味實(shí)現(xiàn)基本全覆蓋，所需的試驗(yàn)次數(shù)往往較多，操作繁瑣，時(shí)間較長(zhǎng)，成本較高。此外，由于中藥復(fù)方制劑所含成分的種類復(fù)雜、含量較低，給鑒別帶來不少困難?？陀^上通過處方藥味鑒別來檢驗(yàn)中藥制劑是否按規(guī)定的處方藥味投料存在一定困難。

1.2 反映中藥復(fù)方制劑的整體質(zhì)量特征，進(jìn)行真?zhèn)舞b別

從“鑒別”這一名詞的釋義看，為“未知物通過比較試驗(yàn)或用其他方法試驗(yàn)后，確認(rèn)某種特定物質(zhì)的操作；藥品標(biāo)準(zhǔn)中通過化學(xué)或物理方法對(duì)待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行真?zhèn)舞b定的試驗(yàn)”[1]；或鑒別指“辨別真假好壞”[2]。即鑒別是對(duì)待測(cè)藥品進(jìn)行真?zhèn)舞b定的試驗(yàn)。如藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的【鑒別】項(xiàng)是檢驗(yàn)藥材的質(zhì)量特點(diǎn)，辨別其真?zhèn)?。化學(xué)藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的【鑒別】項(xiàng)主要是檢驗(yàn)活性化合物的理化性質(zhì)特征，辨別其真?zhèn)?。疫苗檢定規(guī)程中的鑒別試驗(yàn)可采用與相應(yīng)血清的凝集試驗(yàn)，血清則采用動(dòng)物中和試驗(yàn)或利用免疫反應(yīng)鑒別真?zhèn)?。同理，中藥?fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)的TLC鑒別，也可以是通過檢驗(yàn)該中藥制劑的整體質(zhì)量特征來辨別其真?zhèn)危l(fā)揮與同列于【鑒別】項(xiàng)下的理化鑒別相似的作用。

中藥復(fù)方制劑與化學(xué)藥不同，其特征往往不是所含有的某個(gè)特殊成分，而是含有若干種成分的特定組合，這些成分可能分別存在于多個(gè)不同的中藥制劑中。如三黃片的質(zhì)量特征是同時(shí)含有且僅含有源自黃芩、黃連、大黃的相關(guān)成分，這些成分在其他中藥制劑中不同時(shí)存在或同時(shí)含有源自其他藥味的成分。中藥新藥的“新”在于處方藥味組成的“新”，而不是處方中特定藥味的“新”（首次在人體暴露）。大多數(shù)情況下，中藥新藥處方中的藥味已在多個(gè)已上市品種中出現(xiàn)過，但其處方組成是獨(dú)特的。目前，已上市中成藥品種約有6萬個(gè)批準(zhǔn)文號(hào)，9000多個(gè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，而常用中藥材有500～600種。中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量特征為源自處方藥味的多種成分的特定組合，其真?zhèn)舞b別也可以此為依據(jù)。

反映中藥復(fù)方制劑的整體質(zhì)量特征進(jìn)行真?zhèn)舞b別是質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)TLC試驗(yàn)的目的之一。檢驗(yàn)中藥制劑是否按規(guī)定的處方藥味投料與反映其整體質(zhì)量特征二者密切相關(guān)，不可分割，并符合整體與局部關(guān)系的規(guī)律。中藥復(fù)方制劑的整體質(zhì)量特征由源自處方各藥味的特征組成。源自各處方藥味個(gè)體的質(zhì)量特征整合起來形成了不同于各藥味的整體質(zhì)量特征，具備了各藥味沒有的特點(diǎn)。整體鑒別更有利于反映中藥復(fù)方制劑質(zhì)量的特點(diǎn)。

2 整體鑒別的思路

中藥新藥復(fù)方制劑TLC整體鑒別以反映中藥復(fù)方制劑整體質(zhì)量特征為研究重點(diǎn)，以辨識(shí)中藥復(fù)方制劑的真?zhèn)螢槟康??？砂丛撍悸愤M(jìn)行中藥制劑整體鑒別試驗(yàn)的設(shè)計(jì)、研究及驗(yàn)證。中藥制劑處方藥味所含成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、生物活性等研究結(jié)果，中藥復(fù)方制劑提取純化后可能在制劑中保留的成分以及藥物代謝研究發(fā)現(xiàn)的血液移行成分等的理化性質(zhì)，都是中藥制劑整體鑒別研究的重要參考。

2.1 試驗(yàn)的設(shè)計(jì)

TLC整體鑒別應(yīng)體現(xiàn)中藥新藥復(fù)方制劑的整體質(zhì)量特征。應(yīng)盡可能多地反映處方各藥味進(jìn)入制劑的有效成分、指標(biāo)成分等信息，尤其是具有專屬性、特征性的成分?？蓪⒋b別中藥制劑作為一個(gè)整體，以不同的方法制備成多個(gè)供試品溶液，分別選用適宜的展開劑展開，并以合適條件顯色、檢視，建立多個(gè)TLC鑒別試驗(yàn)項(xiàng)。這樣，可通過多個(gè)TLC試驗(yàn)，從不同的角度反映出中藥新藥復(fù)方制劑的整體質(zhì)量特征，達(dá)到有效鑒別的目的。

2.2 樣品預(yù)處理

可根據(jù)中藥復(fù)方制劑所含成分的極性分組，以不同極性的溶劑按極性大小梯度提取或分別提取，制成幾種供試品溶液，分別進(jìn)行TLC試驗(yàn)，以展現(xiàn)待檢制劑中不同極性成分的整體質(zhì)量特點(diǎn)。

中藥復(fù)方制劑所含成分較復(fù)雜，而TLC展開距離有限，如采用不同極性的溶劑提取后，樣品中含有的成分較多，TLC難以有效分離，可根據(jù)所含黃酮、皂苷、三萜、香豆素、生物堿等不同結(jié)構(gòu)類型成分的理化性質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化，建立多個(gè)TLC鑒別項(xiàng)，分別反映制劑中不同結(jié)構(gòu)類型成分的特點(diǎn)。

2.3 對(duì)照物選擇

中藥對(duì)照制劑是中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)發(fā)展的新形式[3]。對(duì)照制劑對(duì)照有利于充分利用TLC薄層斑點(diǎn)信息，反映制劑的整體質(zhì)量特點(diǎn)，可作為鑒別相應(yīng)中藥制劑用標(biāo)準(zhǔn)參照物，也可用以評(píng)價(jià)不同批次中藥制劑質(zhì)量的一致性。如果說對(duì)照藥材對(duì)照相對(duì)于對(duì)照品對(duì)照是薄層鑒別研究在適應(yīng)中藥特點(diǎn)方面的一個(gè)進(jìn)步，那么，對(duì)照制劑對(duì)照在中藥制劑薄層鑒別中的應(yīng)用相對(duì)于對(duì)照藥材對(duì)照也是一個(gè)進(jìn)步。

中藥新藥復(fù)方制劑的整體鑒別一般以對(duì)照制劑為對(duì)照。可直接以臨床試驗(yàn)用中藥新藥復(fù)方制劑樣品或申請(qǐng)生產(chǎn)時(shí)符合要求的樣品為對(duì)照制劑。參照《中藥對(duì)照制劑研制指導(dǎo)原則和技術(shù)要求》[3]進(jìn)行研究。應(yīng)在中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高，研究建立對(duì)照制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，建立必要的檢測(cè)項(xiàng)目，規(guī)定更嚴(yán)格的質(zhì)量要求，保證不同批次對(duì)照制劑質(zhì)量特征的穩(wěn)定。應(yīng)規(guī)定對(duì)照制劑所用飲片的基原、產(chǎn)地及質(zhì)量要求，并按規(guī)定的生產(chǎn)工藝制備。應(yīng)開展對(duì)照制劑的穩(wěn)定性研究，確定合理的包裝、貯存條件及有效期。在更換新批號(hào)時(shí)應(yīng)進(jìn)行全面的對(duì)比研究，確保新舊批號(hào)對(duì)照制劑TLC行為的一致。此外，為提高對(duì)照物的可及性，可根據(jù)品種的具體情況，選用復(fù)方制劑處方藥味相應(yīng)的對(duì)照藥材為原料，按照處方與制法臨用時(shí)制備對(duì)照物；如制法影響不大的，也可簡(jiǎn)化制備方法。

一般情況下，中藥復(fù)方制劑的TLC圖譜中，制劑樣品的薄層斑點(diǎn)數(shù)比對(duì)照藥材多。如連花清瘟膠囊、牛黃解毒片[4]的TLC鑒別圖譜（圖1、2）中，與對(duì)照藥材不對(duì)應(yīng)的薄層斑點(diǎn)未能充分利用?？紤]到中藥新藥多為獨(dú)家生產(chǎn)，從原料來源、生產(chǎn)工藝、過程控制到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等方面相對(duì)穩(wěn)定。如以對(duì)照制劑為對(duì)照，應(yīng)能比對(duì)照藥材更充分地利用展開的斑點(diǎn)信息，較充分展現(xiàn)產(chǎn)品的質(zhì)量特征，更好反映不同批次產(chǎn)品質(zhì)量的一致性。

2.4 檢視與顯色

可參考文獻(xiàn)并根據(jù)品種的實(shí)際情況針對(duì)制劑中所含不同結(jié)構(gòu)類型成分的特點(diǎn)選擇顯色與檢視條件。除日光或熒光下檢視外，可采用針對(duì)不同結(jié)構(gòu)類型成分的多種顯色劑分別噴在其中幾個(gè)樣品展開后的斑點(diǎn)上（遮蓋薄層板不需要顯色的部分），觀察其顏色改變。1次展開、多次顯色，可鑒別多種不同結(jié)構(gòu)類型的成分，提高檢驗(yàn)效率，縮短試驗(yàn)時(shí)間。多個(gè)鑒別試驗(yàn)可分別從不同角度反映出制劑的整體特征。

S-綠原酸對(duì)照品 1-金銀花對(duì)照藥材 2～6-連花清瘟膠囊樣品

S-膽酸對(duì)照品 1-人工牛黃對(duì)照藥材 2～7-牛黃解毒片樣品

生物自顯影技術(shù)等可將TLC成分分離的作用與中藥成分藥效作用機(jī)制較好地結(jié)合起來，反映中藥制劑特定作用機(jī)制方面的整體質(zhì)量特征，是與制劑有效性相關(guān)的檢測(cè)方法。已有人將生物自顯影技術(shù)用于抗菌活性成分、葡萄糖苷酶抑制劑、抗氧化劑、脂酶抑制劑、酪氨酸酶抑制劑等的篩選。相關(guān)方法也可用于中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的【鑒別】項(xiàng)研究。

2.5 結(jié)果的判定

以對(duì)照藥材為對(duì)照進(jìn)行TLC鑒別試驗(yàn)時(shí)，大多數(shù)情況下按“同法制成對(duì)照藥材溶液”的方式制備，即采用與待檢制劑相同的方法制備供試品溶液，或采用加溶媒（甲醇、乙醇或水等）簡(jiǎn)單提取的方式制備。由于對(duì)照藥材的制備與制劑樣品相比，缺少了飲片提取純化制成制劑的工藝過程（或二者不同）。而提取純化等過程對(duì)飲片進(jìn)入制劑的成分有明顯影響，故TLC鑒別試驗(yàn)時(shí)，對(duì)照藥材的TLC斑點(diǎn)與制劑中相應(yīng)藥味成分的斑點(diǎn)常常不完全相同。

以對(duì)照制劑為對(duì)照進(jìn)行TLC鑒別試驗(yàn)時(shí)，同樣按“同法制成對(duì)照制劑溶液”的方式制備，即采用與待檢制劑相同的方法制備供試品溶液。由于對(duì)照制劑的提取純化工藝與待檢中藥復(fù)方制劑基本相同，除反映處方藥味所含成分信息外，也反映了制備工藝的影響。因而，在二者以相同的樣品預(yù)處理方法處理后，所得供試品溶液所含成分種類應(yīng)基本相同。TLC鑒別時(shí)，待檢制劑樣品與對(duì)照制劑的斑點(diǎn)信息基本相同，如斑點(diǎn)的個(gè)數(shù)、位置（比移值）、顏色、顯色后改變，以及拖尾、斑點(diǎn)形態(tài)等。展開后更容易判斷待檢樣品與對(duì)照制劑薄層斑點(diǎn)的一致性。此外，在不同試驗(yàn)條件下，由不同人員操作，待檢制劑與對(duì)照制劑大多也能顯示出更為相近的色譜行為，可在一定程度上提高鑒別結(jié)果判斷的準(zhǔn)確性。

考慮到中藥制劑所含成分的復(fù)雜性，以及TLC試驗(yàn)的影響因素較多等原因，待檢制劑與對(duì)照制劑的薄層斑點(diǎn)可能仍有些差異。在對(duì)照制劑與待檢中藥制劑中，含量較低（尤其是在檢出限附近的成分）、具有揮發(fā)性、穩(wěn)定性較差等成分的TLC斑點(diǎn)的重現(xiàn)性有時(shí)可能較差。必要時(shí)，可在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)下表述為：“在與對(duì)照制劑相應(yīng)的位置顯相同顏色的**個(gè)主斑點(diǎn)”，同時(shí)，對(duì)主斑點(diǎn)的個(gè)數(shù)、位置、顏色等進(jìn)行描述。

2.6 方法學(xué)研究

中藥復(fù)方制劑TLC整體鑒別的方法學(xué)研究與處方藥味鑒別有一定差異。制劑整體鑒別一般以輔料為陰性對(duì)照，并對(duì)處方中每個(gè)處方藥味與對(duì)照制劑進(jìn)行平行對(duì)比。將每個(gè)處方藥味按制劑的制法處理后，再按與對(duì)照制劑相同的樣品制備方法制成供試品溶液。對(duì)照制劑中的TLC斑點(diǎn)應(yīng)溯源到相應(yīng)的處方藥味。除處方藥味的TLC鑒別特征不明顯或處方用量很小等特殊情況外，每個(gè)處方藥味的信息都應(yīng)在制劑整體鑒別的TLC斑點(diǎn)中有所反映。此外，TLC條件選擇時(shí)，應(yīng)盡可能多地展現(xiàn)制劑的整體質(zhì)量特征。

如果對(duì)照制劑與多個(gè)處方藥味在相同的位置上的TLC斑點(diǎn)相同，應(yīng)考察斑點(diǎn)中是否混雜有多個(gè)成分?？刹捎枚S色譜、變更展開劑等方法進(jìn)行分離研究。必要時(shí)，可聯(lián)用表面增強(qiáng)拉曼光、顯微紅外光譜、刮下斑點(diǎn)進(jìn)行分離和結(jié)構(gòu)確證等方法，比較對(duì)照制劑中特定斑點(diǎn)與處方藥味在相同位置斑點(diǎn)所含成分的一致性。盡可能避免同一個(gè)斑點(diǎn)中混雜多種不同成分的情況，減少干擾，提高專屬性。如對(duì)照制劑與多個(gè)處方藥味在相同位置出現(xiàn)相同成分的斑點(diǎn)，考慮到該斑點(diǎn)代表的成分也是相應(yīng)制劑的組成成分，與其他斑點(diǎn)一起構(gòu)成該制劑的整體質(zhì)量特征，可認(rèn)為該斑點(diǎn)仍有鑒別意義。如小檗堿、槲皮素、黃芩苷等可能普遍存在于多個(gè)處方藥味中，在處方藥味鑒別時(shí)其專屬性較差，但就制劑的整體鑒別而言，同時(shí)含有3者的特點(diǎn)仍可作為特定中藥制劑的質(zhì)量特征，具有一定鑒別價(jià)值。

3 整體鑒別

TLC法作為中藥鑒別的經(jīng)典方法已有較長(zhǎng)應(yīng)用歷史。在利用同一種展開條件同時(shí)鑒別多個(gè)處方藥味方面已有不少有益的探索。趙曉春[5]用同一種展開劑，分別以熒光顯色及5%香草醛硫酸溶液顯色同時(shí)鑒別了羅莫丹中的元胡和白芍。付莉等[6]采用同一樣品溶液，在3塊薄層板上分別同時(shí)鑒別了強(qiáng)肝膠囊中的木香、白術(shù)、姜黃和甘草；胃康靈膠囊中的甘草、延胡索和三七；祛風(fēng)止痛膠囊中的羌活、當(dāng)歸、僵蠶和川芎；在3塊薄層板上完成了11味藥材的TLC鑒別。伍柏堅(jiān)等[7]在同一薄層板上同時(shí)鑒別了更年樂膠囊中的制何首烏、首烏藤、補(bǔ)骨脂。陳向前[8]用1種展開劑，檢出知柏地黃丸中的澤瀉、茯苓、山茱萸。漆立軍等[9]在同一薄層系統(tǒng)下，以紫丁香苷、大黃素、槲皮素、人參皂苷Rb1和三七皂苷R1混合對(duì)照品溶液對(duì)照，同時(shí)鑒別了銀杏活腦膠囊中的銀杏提取物、刺五加、何首烏、三七?！吨袊?guó)藥典》2020年版“牛黃解毒片”項(xiàng)下，以不同極性溶媒分步提取制成3種供試品溶液，用3個(gè)薄層試驗(yàn)鑒別了5個(gè)處方藥味[10]。如以對(duì)照制劑替換上述試驗(yàn)的對(duì)照藥材或?qū)φ掌?，也同樣可?次鑒別同時(shí)反映制劑中源自多個(gè)處方藥味的質(zhì)量信息。上述以同一種展開條件同時(shí)鑒別多個(gè)處方藥味的研究為中藥制劑整體鑒別奠定了良好基礎(chǔ)。

現(xiàn)代高效TLC的多種固定相（如C18、二醇醚改性、丙氨基改性、丙基腈改性、非晶無定形硅膠、整體硅膠等）為中藥制劑TLC鑒別的高效分離提供了更多選擇；微乳TLC、膠束TLC（假相TLC）等使用表面活性劑、助溶劑等，減少有機(jī)溶劑的使用[11-15]；低共熔溶劑價(jià)格低廉、環(huán)境友好。新技術(shù)、新方法的不斷涌現(xiàn)，為中藥制劑整體鑒別研究提供了有利條件。

4 2種鑒別的對(duì)比

處方藥味鑒別與制劑整體鑒別在諸多方面存在差異。中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)TLC試驗(yàn)按處方藥味鑒別與制劑整體鑒別研究的差異見表1。

表1 中藥復(fù)方制劑處方藥味鑒別與制劑整體鑒別的差異

目前，中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中處方藥味鑒別研究的模式多是1塊薄層板，展開1次，鑒別1個(gè)處方藥味。鑒別次數(shù)相對(duì)較多，樣品前處理方法繁瑣、費(fèi)時(shí)。而整體鑒別可以用較少的鑒別次數(shù)，反映源自多個(gè)處方藥味的質(zhì)量信息，展現(xiàn)中藥制劑的整體質(zhì)量特征。

5 結(jié)語(yǔ)

薄層鑒別是中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)的重要組成部分。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置TLC鑒別的目的，一方面是檢驗(yàn)制劑是否按規(guī)定的處方藥味投料，同時(shí)也是反映制劑的整體質(zhì)量特征進(jìn)行真?zhèn)舞b別。

與處方藥味鑒別相比，制劑整體鑒別在信息利用、結(jié)果判斷、鑒別次數(shù)等方面具有一定優(yōu)勢(shì)?？杀苊庖詫?duì)照藥材、單一化學(xué)對(duì)照品為對(duì)照時(shí)，展開的制劑斑點(diǎn)信息不能得到充分利用等問題；結(jié)果判斷時(shí)，可在一定程度上減少制劑樣品斑點(diǎn)與對(duì)照藥材不能一一對(duì)應(yīng)、判斷標(biāo)準(zhǔn)不清晰等問題；由于一次鑒別試驗(yàn)可反映多個(gè)藥味的質(zhì)量信息，鑒別次數(shù)相對(duì)較少。

每種研究方法或模式都各有其優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍。中藥制劑的整體鑒別研究也一樣。由于中藥復(fù)方制劑所含成分復(fù)雜，TLC試驗(yàn)的影響因素較多等原因，有些情況下，待檢制劑與對(duì)照制劑的薄層斑點(diǎn)可能存在一定差異，尤其是含量較低、具有揮發(fā)性、穩(wěn)定性較差成分的薄層斑點(diǎn)重現(xiàn)性有時(shí)較差。

建議在中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【鑒別】項(xiàng)研究中，按照整體鑒別的模式開展研究，以相對(duì)較少的薄層試驗(yàn)次數(shù)，反映制劑的整體質(zhì)量特征，進(jìn)行有效鑒別。建議在中藥制劑整體鑒別研究中，積極吸納相關(guān)研究成果，完善試驗(yàn)方法。

綜上所述，“整體鑒別”為中藥新藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的鑒別研究提供了一種新模式。對(duì)于提高中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的可控性、提高檢驗(yàn)效率，體現(xiàn)中藥整體質(zhì)量控制理念具有積極的意義。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Consideration of novel model of holistic identification for compound preparation of new traditional Chinese medicine

ZHOU Yue-hua1, LU Jin-cai2, ZHOU Juan3, SONG Zong-hua4

1. Center for Drug Evaluation, National Medical Products Administration, Beijing 100022, China 2. Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China 3. Sichuan Food and Drug Inspection and Testing Institute, Chengdu 611731, China 4. Chinese Pharmacopoeia Committee, Beijing 100061, China

The purpose of thin layer chromatography (TLC) identification in the specification of compound preparation of new traditional Chinese medicine (TCM) is to test whether the batch charging is according to the recipe, as well as to reflect the overall quality characteristics of the products for authenticity identification. Based on this, it is proposed that the TLC study on specification of TCM compound preparation can be carried out according to the novel model of “holistic identification”. The ideas and methods of TLC “holistic identification” are put forward, and the comparison and analysis of prescription medicines identification and holistic identification are carried out. The holistic identification method has the following advantages or characteristics: It can make full use of the spot information, increase the accuracy of the results, and decrease the number of identification tests. TLC “holistic identification” provides a novel model for the study of specification of TCM compound preparations, which can reflect the overall quality characteristics of TCM compound preparations.

traditional Chinese medicine compound preparation;TLC; prescription medicines identification; holistic identification; quality standard

R283.69；R288.4

A

0253 - 2670(2021)08 - 2199 - 06

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.08.001

2020-10-16

周躍華，男，主任藥師，主要從事中藥新藥的藥學(xué)評(píng)價(jià)工作。Tel: (010)68585566-2879 E-mail: zhouyh@cde.org.cn

[責(zé)任編輯 崔艷麗]