肖釗明，許廣威，李澤宇，劉暢，吳坤成駱寶華，梁海彬，馬梓瑋，駱世文，駱建恒

南方醫(yī)科大學(xué)人體解剖學(xué)教研室,廣東省醫(yī)學(xué)生物力學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510515

薄層包埋技術(shù)常用于植物花粉、細(xì)胞[1]、組織薄層[2]等不易固定展示的物體，而環(huán)氧樹脂硬度較大，是薄層包埋和塑化常用的材料，包埋后對物體起到良好的保護(hù)效果。以往包埋細(xì)小物體時(shí)總是將其整體包埋成薄片狀，對較大的不規(guī)則物體則將其包埋成柱形或立方形，這也是對鑄型標(biāo)本[3]和顱骨標(biāo)本保存的常見方式。而顱骨整體不規(guī)則，由23 塊骨頭組成，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，其孔、縫、管繁多，是骨學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的重點(diǎn)和難點(diǎn)，而其淚骨、篩骨、犁骨、腭骨、下鼻甲等骨質(zhì)薄，極易損壞。經(jīng)冠狀面切開的顱骨更是把篩骨、犁骨、中鼻甲、下鼻甲等易損骨骼露在表面，更是加快了其損壞速度。為了延長顱骨標(biāo)本的使用壽命，以往常用有機(jī)玻璃盒封裝或整體包埋的方式保存。這兩種方式很好的保護(hù)了顱骨，但也導(dǎo)致了對顱骨的結(jié)構(gòu)研究只能“遠(yuǎn)觀”，不能觸摸。

由于顱骨的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，如果不能觸摸可能會(huì)導(dǎo)致學(xué)生對管道的走向和各結(jié)構(gòu)間的聯(lián)系難以理解。為了既延長顱骨標(biāo)本的使用壽命，又不影響對其結(jié)構(gòu)的觀察研究，筆者使用環(huán)氧樹脂AB 膠對最容易損壞的經(jīng)水平切和冠狀切的后半部分顱骨表面進(jìn)行薄層包埋，使顱骨骨質(zhì)薄的結(jié)構(gòu)變得堅(jiān)硬，且其孔、縫、管保存完好，較好的解決了顱骨在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中要不易損壞，要不不能觸摸的兩難問題，方法介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料

48 個(gè)顱骨標(biāo)本、環(huán)氧樹脂AB 膠（廣東勁華新材料科技有限公司）、電子秤、有機(jī)玻璃盒、硅膠板、玻璃棒。

1.2 方法

1.2.1 鋸切顱骨 將一完整顱骨先用筆畫上鋸切線，即前起自眉弓上緣，經(jīng)兩側(cè)翼點(diǎn)上緣向后至枕外隆凸上方3 cm 左右。鋸開顱骨后，將顱底標(biāo)本放入有機(jī)玻璃盒中，裝水以沒過前半顱，放入-18 ℃冰箱24 h 后取出，稍用水淋澆去掉容器和顱骨表面冰塊，用鋸子從第1、2 磨牙之間沿冠狀面將顱骨垂直向上鋸開，得到經(jīng)水平切和冠狀切的顱骨后半部分標(biāo)本[4]。

1.2.2 配制包埋材料 制作一個(gè)比顱骨稍大的一面不封蓋的有機(jī)玻璃盒，根據(jù)標(biāo)本高度計(jì)算包埋顱標(biāo)本所需的包埋材料基礎(chǔ)重量，環(huán)氧樹脂AB 膠的配膠按硬膠的標(biāo)準(zhǔn)（質(zhì)量比A 膠：B 膠=3：1）配制[3,5,6]，將稱量好的A膠、B 膠混合于有機(jī)玻璃盒，用玻璃棒順時(shí)針方向充分?jǐn)嚢枘z體，直至混合膠體不帶絮狀、完全透明。

1.2.3 包埋 每10 min 為一個(gè)時(shí)間段，將48 個(gè)顱骨標(biāo)本隨機(jī)分成8 組，每組6 個(gè)在不同時(shí)間段逐個(gè)浸沒于有機(jī)玻璃盒的環(huán)氧樹脂AB 膠中，每個(gè)浸泡時(shí)可看見有氣體排出，約1 min 左右，沒有明顯的大氣泡產(chǎn)生，即用止血鉗夾住較厚的顱骨壁邊緣取出顱骨，在有機(jī)玻璃盒上方停留一會(huì)并輕輕晃動(dòng)，待顱骨表面流動(dòng)的膠基本流干后，將顱骨水平切面朝下放置于硅膠板上，靜置24 h。

1.2.4 修潔 待水晶膠完全固化，使用手術(shù)剪或牙科鉆將與硅膠板接觸的顱骨面修剪整齊。

2 結(jié)果

包埋后的標(biāo)本透明度高，顱骨壁光滑，可清楚辨認(rèn)標(biāo)本結(jié)構(gòu)，腭骨垂直板、上中下鼻甲、篩骨的篩竇壁及其垂直板等易碎部分包埋后受力明顯增強(qiáng)，篩骨、犁骨、下鼻甲等較容易脫落骨骼與顱骨整體連接更加緊密（圖1、2），攪拌充分后60 min 內(nèi)包埋的顱骨標(biāo)本的各管、孔沒有明顯堵塞，70 min 內(nèi)包埋的顱骨標(biāo)本表面沒有出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象。60～70 min 階段在不同的包埋標(biāo)本（3/6）上出現(xiàn)了腭大孔、棘孔、視神經(jīng)管等堵塞現(xiàn)象，70～80 min 階段包埋的部分標(biāo)本（3/6）出現(xiàn)巖部、篩板等顱骨表面結(jié)塊現(xiàn)象和全部（6/6）出現(xiàn)管、孔堵塞現(xiàn)象（見表1、圖3）。

圖1 經(jīng)第1、2 磨牙間的顱骨冠狀面前面觀（包埋后）Fig.1 A coronal view of the skull sawed between the first and second molars（after the embedding）

3 討論

3.1 顱骨表面包埋的意義

圖2 篩骨包埋前后比較A：包埋前 B：包埋后Fig.2 Comparison before and after ethmoid embeddingA：Before embedding；B：After embedding

圖3 表面結(jié)塊和管道堵塞情況A:蝶骨巖部結(jié)塊B:視神經(jīng)管堵塞Fig.3 Surface clumping and pipe cloggingA:Agglomerate on the sphenoid; B:The optic canal was blocked

表1 顱骨表面包埋效果Tab.1 Effect of skull surface embedding

顱骨的孔、縫、管繁多，是骨學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的重點(diǎn)和難點(diǎn)，而其淚骨、篩骨、犁骨、腭骨、下鼻甲等骨質(zhì)薄，極易損壞。而經(jīng)冠狀面切開的顱骨更是把篩骨、犁骨、腭骨、下鼻甲等易損骨表露在表面，更是加快了其損壞速度。為了延長顱骨標(biāo)本的使用壽命，常用有機(jī)玻璃盒封裝或整體包埋的方式保存顱骨。這兩種方式很好的保護(hù)了顱骨的完整性，但有機(jī)玻璃盒封裝和整體包埋只能對顱骨的表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察研究，而不能使用穿線的方式對顱骨的孔和管道的走向進(jìn)行整體觀察。由于顱骨的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，這可能導(dǎo)致學(xué)生對鼻淚管、切牙孔、頸動(dòng)脈管、鼻旁竇的開口管道、通向翼腭窩管道等結(jié)構(gòu)難以理解。為了不影響對其結(jié)構(gòu)的觀察研究，以往常涂油漆以保護(hù)，但油漆主要的功能是密封防氧化，沒有加強(qiáng)機(jī)械強(qiáng)度的能力。

環(huán)氧樹脂AB 膠包埋標(biāo)本技術(shù)是近十幾年來新興起的一項(xiàng)標(biāo)本保存技術(shù)，環(huán)氧樹脂具有粘結(jié)力強(qiáng)、固化收縮率低、機(jī)械強(qiáng)度高、化學(xué)穩(wěn)定性強(qiáng)、易保存、透明度高且無毒無污染等優(yōu)點(diǎn)[6]。用環(huán)氧樹脂AB 膠包埋的方法制作的經(jīng)水平切和冠狀切的顱骨后半部分包埋標(biāo)本，使顱骨骨質(zhì)薄的結(jié)構(gòu)變的堅(jiān)硬，且其孔、縫、管保存完好，且延長顱骨標(biāo)本的使用壽命。較好的解決了顱骨在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中要不易損壞，要不不能觸摸的兩難問題。

3.2 環(huán)氧樹脂的配制

注意環(huán)氧樹脂AB 膠混合時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按3:1 比例配制，用玻璃棒順時(shí)針方向充分?jǐn)嚢枘z體，直至混合膠體不帶絮狀、完全透明。A 膠過多，則滴膠凝固時(shí)間會(huì)變長，且硬度不夠，B 膠過多，則滴膠硬度過大，質(zhì)地變脆，易被損壞[5]。

由于每包埋一個(gè)顱骨都會(huì)消耗部分包埋材料，所以根據(jù)標(biāo)本高度計(jì)算包埋顱標(biāo)本所需包埋材料的基礎(chǔ)重量，如果包埋10 個(gè)以內(nèi)的顱骨，則增加總重量的10%，如果更多則相應(yīng)增加。

3.3 環(huán)氧樹脂的包埋與固化

攪拌充分后即可以進(jìn)行包埋。將顱骨浸沒于有機(jī)玻璃盒的環(huán)氧樹脂AB 膠中，可看見有氣體排出，約1 min 左右，沒有明顯的大氣泡產(chǎn)生，即立刻止血鉗夾住較厚的顱骨壁邊緣取出顱骨，不需要長時(shí)間浸泡或放入真空箱抽真空，如果長時(shí)間浸泡或放入真空箱抽真空則容易導(dǎo)致翼管等小管堵塞。

在室溫（25℃）30 min 后樹脂會(huì)開始粘稠并逐漸硬化,隨著粘稠度增加,流動(dòng)性變慢慢變差，包埋的厚度也隨之增厚，60 min 后包埋的標(biāo)本在不同的標(biāo)本上出現(xiàn)了腭大孔、棘孔、視神經(jīng)管等堵塞現(xiàn)象，70 min 后包埋的標(biāo)本部分出現(xiàn)顱骨表面結(jié)塊現(xiàn)象。在室溫下，60 min 以內(nèi)為合適的顱骨表面包埋時(shí)間。

如果需要包埋較多的標(biāo)本，可以將裝混合膠的有機(jī)玻璃盒浸泡于低溫的水中，環(huán)氧樹脂凝膠時(shí)間受使用溫度的影響比較大，隨著使用溫度的降低，凝膠時(shí)間相對變長[7]。