路艷霞，陽(yáng) 航，石 妤，李路軍, 2*，胡澤華，鄧雪瑩，易英韜，孫可可

華中枸骨根化學(xué)成分研究

路艷霞1，陽(yáng) 航1，石 妤1，李路軍1, 2*，胡澤華3，鄧雪瑩1，易英韜1，孫可可1

1.藥物高通量篩選國(guó)家與地方聯(lián)合工程研究中心，生物催化與酶工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中藥生物技術(shù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北大學(xué)，湖北 武漢 430062 2.甘肅百草中藥材種植有限公司，甘肅 蘭州 730102 3.湖北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)部，湖北 恩施 445000

研究華中枸骨根的化學(xué)成分。運(yùn)用硅膠、Sephadex LH-20，ODS柱色譜及半制備HPLC等方法進(jìn)行分離純化，并通過(guò)NMR等波譜技術(shù)和理化性質(zhì)鑒定結(jié)構(gòu)。從華中枸骨根中分離得到13個(gè)化合物，分別鑒定為11-羰基-ɑ-香樹醇-3β-棕櫚酸酯（1）、3β-乙酰氧基-28-羥基-12-烯-烏蘇烷（2）、兒茶酚（3）、4-乙基兒茶酚（4）、2,4,6-三甲氧基苯酚（5）、3-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯基)-1,2-丙二醇（6）、3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-1,2-丙二醇（7）、3,4-二甲氧基苯酚（8）、3,4-二羥基苯丙酸甲酯（9）、3β,19α,23-三羥基-20α()-烏蘇-12-烯-28-酸3β--α--吡喃阿拉伯糖（10）、(＋)-1-羥基松脂醇-1--β--葡萄糖苷（11）、3β--[α--吡喃鼠李糖(1→2)-α--吡喃阿拉伯糖]-坡模酸（12）、rotundioic acid（13）。所有化合物均為首次從華中枸骨中分離得到，其中4～9為首次從冬青屬植物中分離得到。

華中枸骨；11-羰基-ɑ-香樹醇-3β-棕櫚酸酯；3-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯基)-1,2-丙二醇；(＋)-1-羥基松脂醇-1--β--葡萄糖苷

華中枸骨S.Y.Hu，又名針齒冬青，為冬青科（Aquifoliaceae）冬青屬L.植物，葉和根入藥，其葉在我國(guó)某些地區(qū)被用作苦丁茶的原料[1]，根具有清熱解毒、祛風(fēng)祛濕作用，為常用土家族藥物，用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[2]。目前對(duì)其葉的研究比較多，林立冬等[3-5]從華中枸骨葉中分離鑒定出多個(gè)三萜和黃酮類化合物。本研究室前期研究證實(shí)其葉具有很強(qiáng)的抗炎和自由基清除作用[6]，并從中分離得到多個(gè)新的黃烷類成分[7-10]。但對(duì)其根的研究鮮有報(bào)道，為了進(jìn)一步深入研究該植物資源，完善其根的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究對(duì)其根的化學(xué)成分進(jìn)行研究，從其95%乙醇提取物中分離得到13個(gè)化合物，分別鑒定為11-羰基-α-香樹醇- 3β-棕櫚酸酯（11-carbonyl-α-amyrin-3β-palmitate，1）、3β-乙酰氧基-28-羥基-12-烯-烏蘇烷（3β-acetoxy- 28-hydroxy-12-ene-urs，2）、兒茶酚（catechol，3）、4-乙基兒茶酚（4-ethyl catechol，4）、2,4,6-三甲氧基苯酚（2,4,6-trimethoxyphenol，5）、3-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯基)-1,2-丙二醇[3-(4-hydroxy-3,5- dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol，6]、3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-1,2-丙二醇[3-(4-hydroxy-3- methoxyphenyl)propane-1,2-diol，7]、3,4-二甲氧基苯酚（3,4-dimethoxyphenol，8）、3,4-二羥基苯丙酸甲酯（3,4-dihydroxybenzenepropionic acid methyl ester，9）、3β,19α,23-三羥基-20α()-烏蘇-12-烯-28-酸3β--α--吡喃阿拉伯糖 [3β,19α,23-trihydroxy- 20α()-urs-12-en-28-oic acid 3β--α--arabinopyra- noside，10]、(＋)-1-羥基松脂醇-1--β--葡萄糖苷[(＋)-1-hydroxypinoresinol-1--β--glucoside，11]、3β--[α--吡喃鼠李糖(1→2)-α--吡喃阿拉伯糖]-坡模酸（3β--[α--rhamnopyranosyl (1→2)-α-- arabinopyranosyl]-pomolic acid，12）、rotundioic acid（13）。所有化合物均為首次從華中枸骨中分離得到，其中化合物4～9為首次從冬青屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker 400M、500M核磁共振儀（瑞士Buruker公司）；Q-Exactive四級(jí)桿-靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜（美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司）；LCMS-8040三重四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀（日本島津）；LC-20AR半制備型高效液相和LC-20AD分析型高效液相（日本島津）；EZ Purifier中低壓制備色譜（利穗科技有限公司）；RE-5298旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器場(chǎng)）、SHZ-D（III）循環(huán)水式真空泵和DLSB-5L/20低溫冷卻液循環(huán)泵（鞏義市予華儀器責(zé)任有限公司）；DTD-6超聲波清洗機(jī)（鼎泰生化科技設(shè)備制造有限公司）；FA2004B電子天平（上海天美天平儀器有限公司）；GF254薄層色譜硅膠板和柱色譜硅膠（青島海洋化工）；0.3 mm毛細(xì)管（華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠）；D-101大孔樹脂（天津市海光化工有限公司）；Sephadex LH-20（GE公司）；分析型色譜柱用Shim-pack GIST C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；半制備型色譜柱用YMC-Pack ODS-A（250 mm×10 mm，5 μm）和Shim-pack GIST（C18，250 mm ×10 mm，5 μm）；有機(jī)溶劑除色譜用甲醇為色譜級(jí)試劑，其余均為分析純。

實(shí)驗(yàn)用華中枸骨根采自湖北省恩施州建始縣，經(jīng)湖北民族大學(xué)郜紅利教授鑒定為華中枸骨S.Y.Hu的干燥根，標(biāo)本（ICR20150615）保存于湖北大學(xué)中藥生物技術(shù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

2 提取與分離

華中枸骨根5 kg，適當(dāng)粉碎后加6倍量95%乙醇浸提3次，每次3 d，合并提取液，減壓濃縮得到總浸膏（255.5 g），用適量水混懸，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇等比例萃取3次，萃取液減壓濃縮旋干后，分別得石油醚部位浸膏（3.2 g）、醋酸乙酯部位浸膏（23.6 g）和正丁醇部位浸膏（138.8 g）。

取醋酸乙酯部位浸膏（23.6 g）經(jīng)（200～300目）硅膠柱色譜進(jìn)行分離，以石油醚-醋酸乙酯（100∶0～83∶17）、二氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）依次進(jìn)行梯度洗脫，得11個(gè)流分Fr.1～11。Fr.1經(jīng)重結(jié)晶（二氯甲烷）得到化合物1（30.0 mg），F(xiàn)r.2經(jīng)硅膠柱分離，以石油醚-醋酸乙酯（20∶1～1∶1）梯度洗脫，得7個(gè)次級(jí)流分（Fr.2.1～2.7），F(xiàn)r.2.4經(jīng)sephadex LH-20凝膠柱二氯甲烷-甲醇（1∶1）洗脫及重結(jié)晶（石油醚-醋酸乙酯）得到化合物2（6.2 mg）。Fr.3經(jīng)HPLC（20%甲醇，R＝35.0 min）制備得到化合物3（6.8 mg）。Fr.4經(jīng)硅膠柱分離，以石油醚-醋酸乙酯（50∶1～1∶1）梯度洗脫，合并得3個(gè)次級(jí)流分（Fr.4.1～4.3），F(xiàn)r.4.3經(jīng)HPLC（45%甲醇，R＝37.5 min）制備得到化合物4（27.0 mg）。Fr.5經(jīng)硅膠柱色譜，以石油醚-醋酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脫得4個(gè)次級(jí)流分（Fr.5.1～5.4），F(xiàn)r.5.1經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜甲醇洗脫得24個(gè)流分（Fr.5.1.1～5.1.24），F(xiàn)r.5.1.17經(jīng)HPLC（30%甲醇，R＝45.0 min）制備得到化合物5（35.1 mg）。Fr.6經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（40∶1～15∶1）梯度洗脫，得到4個(gè)組分（Fr.6.1～6.4），F(xiàn)r.6.1經(jīng)HPLC（17%甲醇）制備得到化合物6（10.7 mg，R＝54.5 min）和7（12.8 mg，R＝41.5 min）。Fr.7經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（80∶1～50∶1）梯度洗脫得到5個(gè)次級(jí)流分（Fr.7.1～7.5），F(xiàn)r.7.4經(jīng)HPLC（27%甲醇，R＝36.0 min）制備得化合物8（9.5 mg）。Fr.8經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜甲醇洗脫得25個(gè)次級(jí)流分（Fr.8.1～8.25），F(xiàn)r.8.11經(jīng)HPLC（29%甲醇，R＝44.5min）制備得到化合物9（12.4 mg）。Fr.9經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜甲醇洗脫得20個(gè)流分（Fr.9.1～9.20），F(xiàn)r.9.7經(jīng)甲醇重結(jié)晶得到化合物10（6.2 mg），F(xiàn)r.9.8經(jīng)HPLC（36%甲醇，R＝54.5 min）制備得到化合物11（5.6 mg）。Fr.10經(jīng)反相C18硅膠柱色譜，以甲醇-水（90∶10～10∶90）梯度洗脫得3個(gè)次級(jí)流分（Fr.10.1～10.3），F(xiàn)r.10.3經(jīng)半制備HPLC（69%甲醇，R＝22.5 min）制備得到化合物12（7.0 mg）。正丁醇部位（138.8 g）通過(guò)大孔樹脂柱色譜，以乙醇-水（30∶70、50∶50、90∶10）洗脫得到3個(gè)流分（Sr.1～3），將Sr.2過(guò)硅膠色譜柱，以甲醇-水（10∶1～1∶1）梯度洗脫，得6個(gè)次級(jí)流分（Sr.2.1～2.6），Sr.2.1經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜甲醇洗脫，得到化合物13（12.3 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無(wú)色針晶（二氯甲烷）。ESI-MS/: 701 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 5.54 (1H, s, H-12), 4.52 (1H, dd,= 11.7, 4.7 Hz, H-3), 1.29, 1.19, 1.16, 0.94, 0.88, 0.87, 0.81, 0.81, 0.79 (3H, s, CH3×9)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 38.2 (C-1), 25.3 (C-2), 80.4 (C-3), 39.0 (C-4), 55.1 (C-5), 17.6 (C-6), 32.9 (C-7), 41.1 (C-8), 61.6(C-9), 37.0 (C-10), 199.8 (C-11), 130.5 (C-12), 165.1 (C-13), 45.3 (C-14), 23.8 (C-15), 25.3 (C-16), 34.1 (C-17), 59.0 (C-18), 39.4 (C-19), 39.4 (C-20), 31.0 (C-21), 41.1 (C-22), 27.6 (C-23), 16.7 (C-24), 18.7 (C-25), 16.9 (C-26), 20.7 (C-27), 28.2 (C-28), 17.6 (C-29), 21.3 (C-30), 173.8 (C-1′), 35.0 (C-2′), 32.1 (C-3′), 29.8 (C-4′), 29.8 (C-5′), 29.8 (C-6′), 29.7 (C-7′), 29.6 (C-8′), 29.5 (C-9′), 29.5 (C-10′), 29.4 (C-11′), 29.3 (C-12′), 29.0 (C-13′), 27.4 (C-14′), 22.8 (C-15′), 14.3 (C-16′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)照基本一致[11]，故鑒定化合物1為11-羰基-α-香樹醇- 3β-棕櫚酸酯。

化合物2：白色絮狀晶體（石油醚-醋酸乙酯）。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 5.13 (1H, t,3.6 Hz, H-12), 4.50 (1H, m, H-3), 3.51 (1H, d,11.0 Hz, H-28b), 3.20 (1H, d,11.0 Hz, H-28a), 2.05 (3H, s, OCOCH3), 1.09, 0.99, 0.97, 0.93, 0.87, 0.86, 0.81 (各3H, s, 7×CH3)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3):38.6 (C-1), 28.2 (C-2), 81.1 (C-3), 37.9 (C-4), 55.4 (C-5), 18.4 (C-6), 32.9 (C-7), 40.2 (C-8), 47.7 (C-9), 36.9 (C-10), 23.7 (C-11), 125.1 (C-12), 138.9 (C-13), 42.2 (C-14), 26.1 (C-15), 23.5 (C-16), 38.2 (C-17), 54.2 (C-18), 39.5 (C-19), 39.6 (C-20), 30.8 (C-21), 35.3 (C-22), 29.9 (C-23), 16.9 (C-24), 15.9 (C-25), 17.5 (C-26), 23.4 (C-27), 70.1 (C-28), 16.9 (C-29), 21.5 (C-30), 21.5 (OCOCH3), 171.2 (CO)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物2為3β-乙酰氧基-28-羥基-12-烯-烏蘇烷。

化合物3：黃色油狀物。ESI-MS/: 109 [M－H]?。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.75 (2H, dd,5.9, 3.5 Hz, H-4, 5), 6.65 (2H, dd,5.8, 3.6 Hz, H-3, 6)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 146.3 (C-1, 2), 116.4 (C-3, 6), 120.9 (C-4, 5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[13]，故鑒定化合物3為兒茶酚。

化合物4：黃色油狀物。ESI-MS/: 137 [M－H]?。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 6.71 (1H, d,= 7.9 Hz, H-6), 6.68 (1H, s, H-3), 6.51 (1H, d,= 7.3Hz, H-5), 2.47 (2H, q,= 7.6 Hz, H-7), 1.13 (3H, t,= 7.6 Hz, H-8)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3):143.8 (C-1), 145.8 (C-2), 115.8 (C-3), 136.6 (C-4), 119.7 (C-5), 116.0 (C-6), 28.8 (C-7), 16.4 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[14-15]，故鑒定化合物4為4-乙基兒茶酚。

化合物5：白色無(wú)定形粉末。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.10 (2H, s, H-3, 5), 3.77 (6H, s, 2, 6-OCH3), 3.67 (3H, s, 4-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 132.0 (C-1), 93.9 (C-3, 5), 154.9 (C-2, 6), 155.6 (C-4), 61.3 (4-OCH3), 56.3 (2, 6-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[16]，故鑒定化合物5為2,4,6-三甲氧基苯酚。

化合物6：棕黃色無(wú)定形粉末。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.53 (2H, s, H-2, 6), 4.00 (1H, s, H-8), 3.51 (1H, dd,11.1, 4.4 Hz, H-9b), 3.45 (1H, dd,11.1, 6.2 Hz, H-9a), 2.74 (1H, dd,13.8, 5.6 Hz, H-7b), 2.60 (1H, dd,13.7, 7.4 Hz, H-7a)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 130.7 (C-1), 107.6 (C-2, 6), 149.1 (C-3, 5), 135.0 (C-4), 41.0 (C-7), 74.6 (C-8), 66.5 (C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[17]，故鑒定化合物6為3-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯基)- 1,2-丙二醇。

化合物7：黃色油狀物。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.82 (1H, d,1.7 Hz, H-2′), 6.72 (1H, d,8.0 Hz, H-5′), 6.66 (1H, dd,8.0, 1.7 Hz, H-6′), 3.84 (3H, s, 3′-OCH3), 3.80 (1H, s, H-2), 3.51 (1H, dd,11.2, 4.3 Hz, H-1b), 3.44 (1H, dd,11.1, 6.2 Hz, H-1a), 2.73 (1H, dd,13.8, 5.8 Hz, H-3b), 2.61 (1H, dd,13.8, 7.4 Hz, H-3a)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)131.5 (C-1′), 114.1 (C-2′), 148.8 (C-3′), 145.9 (C-4′), 116.1 (C-5′), 122.9 (C-6′), 66.5 (C-1), 74.7 (C-2), 40.5 (C-3), 56.3 (OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[18]，故鑒定化合物7為3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-1,2-丙二醇。

化合物8：無(wú)色油狀物。1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 6.77 (1H, d,= 8.6 Hz, H-5), 6.46 (1H, d,= 2.7 Hz, H-2), 6.30 (1H, dd,= 8.6, 2.7 Hz, H-6), 3.78 (3H, s, 3-OCH3), 3.74 (3H, s, 4-OCH3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)153.4 (C-1), 101.9 (C-2), 151.5 (C-3), 143.7 (C-4), 115.1 (C-5), 107.2 (C-6), 57.6 (4-OCH3), 56.3 (3-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[19]，故鑒定化合物8為3,4-二甲氧基苯酚。

化合物9：棕黑色油狀物。1H-NMR (400 MHz, CD3OD):6.66 (1H, d,8.0 Hz, H-5), 6.62 (1H, d,2.0 Hz, H-2), 6.50 (1H , dd,8.0, 2.0 Hz, H-6), 3.63 (3H, s, OCH3), 2.75 (2H, t,7.6 Hz, H-8), 2.55 (2H, t,7.6 Hz, H-7)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD): 133.5 (C-1), 116.3 (C-2), 144.6 (C-3), 146.2 (C-4), 116.4 (C-5), 120.5 (C-6), 31.4 (C-7), 37.0 (C-8), 175.4 (C-9), 52.0 (10-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[20]，故鑒定化合物9為3,4-二羥基苯丙酸甲酯。

化合物10：無(wú)色針晶（甲醇）。1H-NMR (400 MHz, DMSO-6): 11.82 (1H, s, COOH), 5.13 (1H, s, H-12 ), 4.78 (1H, s, Ara-H-1 ), 4.36 (1H, brs, H-23b ), 4.19 (1H, d,6.5 Hz, H-3), 3.60 (1H, brs, H-23a), 1.27, 1.04, 0.90, 0.89, 0.69, 0.59 (各3H, s, CH3×6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-6): 38.0 (C-1), 25.2 (C-2), 79.9 (C-3), 42.4 (C-4), 46.5 (C-5), 17.3 (C-6), 32.2 (C-7), 39.2 (C-8), 45.9 (C-9), 36.0 (C-10), 23.1 (C-11), 126.0 (C-12), 138.2 (C-13), 41.2 (C-14), 28.0 (C-15), 25.8 (C-16), 46.7 (C-17), 46.1 (C-18), 72.3 (C-19), 41.4 (C-20), 23.9 (C-21), 31.3 (C-22), 62.7 (C-23), 13.0 (C-24), 15.6 (C-25), 16.7 (C-26), 23.6 (C-27), 179.0 (C-28), 28.9 (C-29), 15.6 (C-30), 104.8 (Ara-C-1), 71.1 (Ara-C-2), 72.7 (Ara-C-3), 67.6 (Ara-C-4), 65.0 (Ara-C-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[21]，故鑒定化合物10為3β,19α,23-三羥基- 20α()-烏蘇-12-烯-28-酸3β--α--吡喃阿拉伯糖。

化合物11：白色無(wú)定形粉末。1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 7.11 (1H, d,1.7 Hz, H-2′), 7.04 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2′′), 6.88 (2H, td,= 8.1, 1.8 Hz, H-6′, 6′′), 6.81 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5′′), 6.73 (1H, d,8.1 Hz, H-5′), 4.70 (1H, s, H-2), 4.50 (1H, t,8.6 Hz, H-4a), 4.40 (1H, d,10.4 Hz, H-8a), 4.34 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1′′′), 3.94 (1H, d,10.4 Hz, H-8b), 3.89 (3H, s, 3′-OCH3), 3.85 (3H, s, 3′′-OCH3), 3.81 (1H, dd,9.1, 5.9 Hz, H-4b), 3.69 (1H, dd,= 12.0, 2.2 Hz, H-6a′′′), 3.52 (1H, dd,12.0, 5.7 Hz, H-6b′′′), 3.41 (1H, m, H-5), 3.15 (2H, dd,6.8, 2.5 Hz, H-3′′′, 4′′′), 3.03 (1H, m, H-2′′′), 2.89 (1H, m, H-5′′′), 1.29 (1H, s, H-6)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD):99.2 (C-1), 90.0 (C-2), 72.2 (C-4), 60.3 (C-5), 86.8 (C-6), 73.2 (C-8), 128.5 (C-1′), 114.0 (C-2′), 148.4 (C-3′), 147.4 (C-4′), 115.2 (C-5′), 122.4 (C-6′), 133.1 (C-1′′), 110.7 (C-2′′), 149.3 (C-3′′), 147.5 (C-4′′), 116.3 (C-5′′), 119.9 (C-6′′), 100.1 (C-1′′′), 74.8 (C-2′′′), 78.3 (C-3′′′), 71.2 (C-4′′′), 78.0 (C-5′′′), 62.4 (C-6′′′), 56.6 (3′-OCH3), 56.5 (3′′-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[22]，故鑒定化合物11為(＋)-1-羥基松脂醇-1--β--葡萄糖苷。

化合物12：白色無(wú)定形粉末。HR-ESI-MS/:773.444 40 [M＋Na]+（C41H66O12Na，計(jì)算值773.769 58），推測(cè)其分子式為C41H66O12。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 5.25 (1H, s, H-12), 5.10 (1H, d,1.3 Hz, Rha-H-1), 4.55 (1H, d,4.5 Hz, Ara-H-1), 3.12 (1H, dd,11.6, 4.2 Hz, H-3), 1.32 (3H, s, H-24), 1.23 (3H, d,6.2 Hz, Rha-H-6), 1.14 (3H, s, H-27), 1.02 (3H, s, H-23), 0.99 (3H, d,5.4 Hz, H-30), 0.96 (3H, s, H-25), 0.85 (3H, s, H-26), 0.81 (3H, d,10.3 Hz, H-29)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 39.9 (C-1), 27.0 (C-2), 90.7 (C-3), 40.3 (C-4), 57.1 (C-5), 17.1 (C-6), 33.0 (C-7), 43.3 (C-8), 49.6 (C-9), 37.9 (C-10), 24.7 (C-11), 128.4 (C-12), 139.8 (C-13), 42.6 (C-14), 29.7 (C-15), 28.7 (C-16), 49.9 (C-17), 54.8 (C-18), 74.4 (C-19), 41.0 (C-20), 29.7 (C-21), 34.3 (C-22), 24.5 (C-23), 17.7 (C-24), 16.0 (C-25), 16.3 (C-26), 25.4 (C-27), 27.4 (C-29), 19.5 (C-30), 104.8 (Ara-C-1), 76.8 (Ara-C-2), 73.1 (Ara-C-3), 68.4 (Ara-C-4), 63.7 (Ara-C-5), 102.0 (Rha-C-1), 72.2 (Rha-C-2), 72.2 (Rha-C-3), 73.9 (Rha-C-4), 70.2 (Rha-C-5), 18.0 (Rha-C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[23]，故鑒定化合物12為3β--[α--吡喃鼠李糖(1→2)-α--吡喃阿拉伯糖]-坡模酸。

化合物13：白色無(wú)定形粉末。ESI-MS/: 501 [M－H]?。1H-NMR (400 MHz, CD3OD):5.24 (1H, s, H-12 ), 3.98 (1H, m, H-3), 2.83 (1H, s, H-18), 1.01 (3H, d,= 7.2 Hz, H-30), 1.30, 1.15, 1.05, 0.93, 0.83 (各3H, s, 5×CH3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD):39.8 (C-1), 27.6 (C-2), 77.2 (C-3), 56.7 (C-4), 52.4 (C-5), 22.3 (C-6), 33.2 (C-7), 41.2 (C-8), 43.4 (C-9), 37.6 (C-10), 24.7 (C-11), 128.0 (C-12), 140.4 (C-13), 42.7 (C-14), 30.0 (C-15), 25.5 (C-16), 49.3 (C-17), 52.4 (C-18), 74.8 (C-19), 42.7 (C-20), 27.5 (C-21), 37.6 (C-22), 180.8 (C-23), 12.8 (C-24), 16.2 (C-25), 17.9 (C-26), 24.7 (C-27), 180.8 (C-28), 29.8 (C-29), 16.4 (C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[24]，故鑒定化合物13為rotundioic acid。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents from roots of

LU Yan-xia1, YANG Hang1, SHI Yu1, LI Lu-jun1, 2, HU Ze-hua3, DENG Xue-ying1, YI Ying-tao1, SUN Ke-ke1

1.National & Local Joint Engineering Research Center of High-throughput Drug Screening technology, State Key Laboratory of Biocatalysis and Enzyme Engineering, Hubei Key Laboratory of Biotechnology of Chinese Traditional Medicine, Hubei University, Wuhan 430062, China 2.Gansu Herbal Medicine Planting Co., Ltd., Lanzhou 730102, China 3.Medical School, Hubei Minzu University, Enshi 445000, China

To investigate the chemical constituents from the roots of.The chemical constituents were isolated and purified by silica gel, Sephadex LH-20, ODS and semi-prepared high performance liquid chromatography and their structures were elucidated on the basis of NMR technique and physicochemical property.Thirteen compounds were obtained from the roots of, and named as 11-carbonyl-ɑ-amyrin-3β-palmitate (1), 3β-acetoxy-28-hydroxy-12-ene-urs (2), catechol (3), 4-ethyl catechol (4), 2,4,6-trimethoxyphenol (5), 3-(4-hydroxy-3,5- dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol (6), 3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)propane-1,2-diol (7), 3,4-dimethoxyphenol (8), 3,4- dihydroxybenzenepropionic acid methyl ester (9), 3β,19α,23-trihydroxy-20α()-urs-12-en-28-oic acid 3β--α--arabinopyranoside (10), (+)-1-hydroxypinoresinol-1--β--glucoside (11), 3β--[α--rhamnopyranosyl(1→2)-α--arabinopyranosyl]-pomolic acid (12), rotundioic acid (13).All compounds were isolated fromfor the first time, and compounds 4—9 were isolated fromfor the first time.

S.Y.Hu; 11-carbonyl-α-amyrin-3β-palmitate; 3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol; (＋)-1-hydroxypinoresinol-1--β--glucoside

R284.1

A

0253 - 2670(2021)22 - 6790 - 06

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.22.003

2021-03-12

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81560703）；深圳市基礎(chǔ)研究計(jì)劃自由探索項(xiàng)目（JCYJ20170306171157738）；藥物高通量篩選技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心開放基金（M20181007，M20202003）；藥學(xué)“荊楚卓越人才”協(xié)同育人計(jì)劃大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目（M20191002）

路艷霞（1996—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物活性成分研究。

通信作者：李路軍（1974—），副教授。E-mail: lilujunhuda@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]