洪穩(wěn)穩(wěn),周良云,謝若男,劉守金,周建理
(1.安徽中醫(yī)藥大學藥學院,安徽 合肥 230012;2.廣東藥科大學中藥學院,廣東 廣州 300193;3.安徽中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院,安徽 合肥 230061)
鴨跖草Commelina
communis
Linn.為鴨跖草科鴨跖草屬植物,其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上屬于一種田間惡性雜草,危害較強。在中醫(yī)臨床上,鴨跖草全草洗凈切段干燥后可入藥使用。其性味甘、淡,寒,可歸肺、胃、小腸經(jīng),臨床上常用于用于感冒發(fā)熱,熱病煩渴,咽喉腫痛,水腫尿少,熱淋澀痛,癰腫疔毒等病癥。鴨跖草主要分布于中國云南、四川、甘肅等省及其以東的南北各省區(qū),常見生于濕地。鴨跖草主要含黃酮類、生物堿類、多糖、有機酸等多種成分,其水提取物有抗流感病毒、抗炎、抗氧化作用,其乙醇提取物有抗炎鎮(zhèn)痛作用。鴨跖草的形態(tài)鑒別研究較少。有研究表明,通過分子條形碼psbA-trnH序列能夠快速準確地鑒定鴨跖草及其易混偽品。張曉玲等應(yīng)用光學顯微鏡、掃描電子顯微鏡觀察鴨跖草藥材粉末,確定了以導(dǎo)管、非腺毛、種皮等為特征的鑒別依據(jù)。馬紅等對不同葉齡鴨跖草的顯微構(gòu)造進行比較。本研究通過徒手組織切片制片對不同產(chǎn)地的鴨跖草進行微觀形態(tài)鑒別研究,為臨床一線簡便、迅速、準確鑒別以及完善現(xiàn)行鴨跖草相關(guān)鑒別標準提供參考依據(jù)。1.1 儀器 DM2700P光學顯微鏡:德國萊卡;薄層板加熱器:瑞士CAMAG。
1.2 材料 鴨跖草樣品共6批,樣品均經(jīng)鑒定為鴨跖草科植物鴨跖草Commelina
communis
Linn的干燥全草。樣品詳細信息見表1。按照顯微鑒定方法,從6批鴨跖草樣品選取同等大小的莖、葉稍稍潤濕,用立式手法對其進行徒手切片并制片觀察,利用細砂紙輕輕刮去葉鞘與葉片中葉肉細胞,保留上下表皮,并用水合氯醛透化,裝片后觀察。對鴨跖草的主要顯微特征進行顯微拍攝。將樣品總苞潤濕展平后,利用光學顯微鏡的金相光源(頂光)對其總苞部位進行觀察。對鴨跖草的主要微性狀特征進行圖片拍攝,并利用顯微鏡的自動景深合成軟件對圖片進行景深合成。
表1 鴨跖草樣品信息
3.1 莖橫切面特征 表皮細胞一列,外側(cè)角質(zhì)增厚明顯,偶爾可見非腺毛,2~3個細胞。表皮內(nèi)側(cè)有3~4層厚角組織。邊緣維管束纖維連續(xù)排列成環(huán),維管束間斷排列。維管束為外韌型,木質(zhì)部導(dǎo)管排成“V”字形狀。莖中部薄壁組織中具散在維管束,導(dǎo)管孔徑較大,60~70 μm,導(dǎo)管壁較薄。見圖1。
注:A.莖橫切面觀(×5倍);B.局部(×10倍,示維管束);C.局部(×10倍,示非腺毛);D.局部(×10倍,示中部維管束);1.表皮;2.邊緣維管束;3.厚角組織;4.中部維管束;5.韌皮部;6.導(dǎo)管;7.木纖維圖1 鴨跖草莖橫切面
3.2 葉組織顯微特征 葉橫切面觀:上下表皮細胞大小不一,葉脈處上下表皮細胞較小。維管束鞘細胞兩層,外層細胞大,內(nèi)層較小。葉肉組織中柵狀細胞一列。上下表皮可見兩種類型的非腺毛,一種呈長錐形;另一種呈棒狀,基部細胞較厚,頂端細胞較粗長呈棒狀,先端鈍圓,細胞壁薄,常脫落。葉表面觀:葉上表皮細胞表面觀略呈四邊形,沿一側(cè)細胞壁分布有草酸鈣針晶束;氣孔稀疏排列成行,副衛(wèi)細胞兩兩相對;表面可見長錐形非腺毛和棒狀非腺毛,均由2個細胞組成,葉邊緣具單細胞的乳頭狀非腺毛。葉下表皮細胞不規(guī)則,可見大量草酸鈣方晶與柱晶散在,氣孔排列較密;表面可見長錐形非腺毛,由2個或3個細胞組成,棒狀非腺毛由2個細胞組成。葉鞘表面觀:表皮細胞多邊形,草酸鈣針晶束沿軸縱向排列,有黃色油細胞散在。非腺毛類型兩種,棒狀非腺毛2個細胞,錐狀非腺毛2~7個細胞。見圖2。
注:A.葉橫切面觀(×10倍);B.葉橫切局部(×50倍,示棒狀非腺毛);C.葉邊緣(×50倍,示非腺毛);D.葉下表面觀(×20倍);E.葉上表面觀(×5倍);F.葉上表面局部(×50倍,示草酸鈣針晶束);G.葉鞘外表面觀(×5倍);H.葉鞘邊緣(示非腺毛);1.上表皮細胞;2.維管束鞘;3.韌皮部;4.木質(zhì)部;5.柵欄組織;6.下表皮細胞;7.氣孔;8.棒狀非腺毛;9.草酸鈣方晶、柱晶;10.非腺毛;11.草酸鈣針晶束;12.油細胞圖2 鴨跖草葉組織顯微圖
3.3 總苞片表面特征 表面可見眾多點狀凹陷與白色氣孔,表面及邊緣均被較密集的短硬毛,硬毛倒伏狀,為2~3個細胞組成的非腺毛。見圖3。
在2015年版及2020年版《中華人民共和國藥典》中均只有葉上表面觀特征,筆者對鴨跖草莖、葉、苞片的組織微觀形態(tài)進行觀察研究,確定了主要的鑒別特征,補充完善了現(xiàn)行鴨跖草相關(guān)顯微標準。筆者通過對不同產(chǎn)地鴨跖草的深入研究,發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的鴨跖草在毛被密度上與非腺毛類型上存在差異,在同一地區(qū)的不同葉齡鴨跖草亦不相同,葉片上表皮非腺毛的數(shù)目隨葉齡的增大而增多。不同產(chǎn)地鴨跖草之間的莖橫斷面特征未發(fā)現(xiàn)明顯區(qū)別,但在葉片被毛類型上存在差異。根據(jù)地理位置和緯度,采用非加權(quán)平均法可將中國從東北到南方劃分為3組。低緯度貴州的高海拔地區(qū)以及較高緯度的山海關(guān)地區(qū)所采鴨跖草樣品葉表面被毛較多,且非腺毛常見3個細胞,其他地區(qū)所采集的鴨跖草則均為2個細胞。出現(xiàn)這一特征可能與植物的環(huán)境脅迫有關(guān),具體影響因素可能包括緯度、海拔等。同時,不同產(chǎn)地的鴨跖草葉緣均可見單細胞非腺毛,與藥典中描述的“非腺毛有兩種,均為2個細胞”存在差異。不同地區(qū)的鴨跖草在成分類型和含量高低方面是否存在差異仍需進一步研究。
注:A.總苞片表面觀(×10倍,示非腺毛);B.總苞片邊緣(×10倍,示非腺毛)圖3 鴨跖草總苞片表面觀