王蔚 李慧艷 劉華

肝細(xì)胞癌(HCC)是全球第六大常見(jiàn)惡性腫瘤類(lèi)型和第四大腫瘤相關(guān)死亡原因，造成HCC患者高死亡率的原因是早期檢出率低[1]。血清甲胎蛋白(AFP)是HCC患者常見(jiàn)的血清學(xué)標(biāo)志物，這其中30%～40% HCC患者AFP低于正常水平(<20 ng/mL)，它們被稱(chēng)為甲胎蛋白陰性肝細(xì)胞癌(AFP-N HCC)[2]。雖然現(xiàn)有的影像技術(shù)能夠極大地提高HCC的診斷效能，但研究稱(chēng)它們的診斷表現(xiàn)并不滿(mǎn)意，有報(bào)道稱(chēng)CT對(duì)AFP-N HCC的診斷率僅為10.4%[3-4]。有不少研究嘗試應(yīng)用多種腫瘤生物標(biāo)志物來(lái)篩查HCC患者，例如高爾基蛋白73，Glypican-3以及microRNAs等[5-8]。然而這些昂貴標(biāo)志物也并不能表現(xiàn)出足夠的敏感性或特異性來(lái)滿(mǎn)足HCC診斷要求。因此，迫切需要新的生物標(biāo)志物來(lái)預(yù)測(cè)HCC特別是AFP陰性的AFP-NHCC的發(fā)生。先前研究業(yè)已證明一些血清學(xué)指標(biāo)例如纖維蛋白原(FIB)、前白蛋白(PA)、血小板(PLT)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)等與HCC診斷和進(jìn)展是相關(guān)的。研究表明FIB、PA比值即FPR是多種惡性腫瘤的有效預(yù)測(cè)指標(biāo)[9]。術(shù)前FPR可以獨(dú)立預(yù)測(cè)HCC患者生存率，并有助于識(shí)別HCC患者是否能從輔助化療中獲益[10]。Lemoine等[11]報(bào)道稱(chēng)γ-GT與PLT比值即GPR是一種新的肝病預(yù)測(cè)因子。大量證據(jù)表明，GPR對(duì)肝炎、肝纖維化和肝細(xì)胞癌的診斷和預(yù)后有較好的預(yù)測(cè)作用[12]。經(jīng)文獻(xiàn)檢索可知，而尚缺乏FPR和GPR應(yīng)用于對(duì)AFP-NHCC診斷的臨床資料。本研究旨在評(píng)估FPR、GPR在AFP-N HCC患者中的應(yīng)用價(jià)值。

資料與方法

一、研究對(duì)象

2018年3月至2020年3月AFP-N HCC患者(AFP-N HCC組)80例(男58例、女22例)，年齡(50.2±9.8)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：>18歲；新診斷為HCC；無(wú)血液系統(tǒng)疾病或免疫相關(guān)疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并感染其他類(lèi)型肝炎病毒或HIV；代償性或失代償性肝硬化；合并其他類(lèi)型肝病。另選取同期健康體檢患者(健康組)100例(男60例、女40例)，平均年齡(49.8±6.2)歲。

二、研究方法

LH780型血細(xì)胞分析儀(Beckman-Coulter，USA)測(cè)定白細(xì)胞(WBC)、PLT、血紅蛋白(Hb)；CA7000型凝血分析儀(SYSMEX，日本)測(cè)定FIB；C8000型生化分析儀(Abbott，美國(guó))檢測(cè)PA、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(TBil)和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)。以下公式計(jì)算FPR和GPR：FPR=FIB/PA；GPR=GGT/PLT。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。Logistic回歸分析確定影響AFP-N HCC獨(dú)立預(yù)測(cè)因素；ROC曲線(xiàn)確定診斷AFP-N HCC的截?cái)帱c(diǎn)，計(jì)算診斷效能。α=0.05。

結(jié) 果

一、一般資料

AFP-N HCC組、健康組PLT、Hb、FIB、PA、ALT、AST、TBil、γ-GT、FPR及GPR具有顯著性差異(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 AFP-N HCC、AFP-N CHB及健康組患者一般資料比較(±s)

二、影響因素分析

以患者是否存在AFP-N HCC為分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)，將上述具有差異性指標(biāo)納入多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，ALT、FPR、GPR是評(píng)估是否存在AFP-N HCC的獨(dú)立影響因素(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 影響AFP-N HCC是否存在的多因素Logistic回歸分析

三、 診斷效能

表3為FPR、GPR及聯(lián)合診斷AFP-N HCC時(shí)的診斷效能表現(xiàn)。

表3 FPR、GPR對(duì)AFP-N HCC的診斷效能表現(xiàn)

討 論

研究證明凝血和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)可能會(huì)影響HCC患者的進(jìn)展。FIB作為重要的凝血因子，由肝臟合成。Zhu等[13]研究表明FIB mRNA水平在細(xì)胞和組織均升高，其水平升高與腫瘤血栓形成有關(guān)。另外，研究稱(chēng)PA減少與包括HCC在內(nèi)的多種惡性腫瘤密切相關(guān)。因此能夠推測(cè)出惡性腫瘤腫瘤患者中的FPR水平可能上升。此項(xiàng)研究得出AFP-NHCC組FPR水平明顯高于健康組。這也與先前的研究結(jié)果相似[14]。此外，多項(xiàng)研究對(duì)FPR在腫瘤患者預(yù)后評(píng)價(jià)作出了報(bào)道。Zhang等[15]觀察到低水平FPR胃癌患者生存期更長(zhǎng)，另外低水平FPR III期胃癌患者接受化療后其預(yù)后明顯優(yōu)于未接受化療的。Huang等[16]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)PR水平隨AFP-N HCC腫瘤大小和BCLC分期增加而增加，提示該生物學(xué)指標(biāo)可能與AFP-N HCC的腫瘤侵襲性相關(guān)。

γ-GT作為谷胱甘肽代謝的關(guān)鍵酶，在代謝性肝損傷中持續(xù)升高[17]。Moreira等[18]研究表明，雄性Wistar大鼠肝癌動(dòng)物模型中血清γ-GT水平隨HCC發(fā)生發(fā)展而逐步升高，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。Carr等[19]發(fā)現(xiàn)在低AFP的HCC病例中，γ-GT水平較高的患者總體生存率較低。PLT減少常發(fā)生在慢性肝病中，主要原因是脾功能亢進(jìn)引起的血小板加速破壞和肝細(xì)胞損傷導(dǎo)致血小板生成減少[20]。Park等[21]發(fā)現(xiàn)低GPR水平的高危HCC患者發(fā)生HCC的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)顯著低于高GPR水平的。另外與GPR水平低的患者相比，GPR高肝病患者發(fā)生肝硬化的可能性更高，預(yù)后結(jié)局也更差[22]。以上研究表明，GPR水平隨肝損傷程度的加重而升高，這也與本研究的結(jié)果相一致。此次研究發(fā)現(xiàn)在AFP-N HCC的發(fā)生過(guò)程中，GPR水平顯著升高。同時(shí)Huang 等[16]表示GPR水平隨著腫瘤大小和癌癥分期(包括Edmondson-Steiner分級(jí)和BCLC分期)的進(jìn)展而增加。

本研究評(píng)估術(shù)前FPR和GPR水平，以評(píng)估它們?cè)贏FP-N HCC診斷中診斷表現(xiàn)。FRP和GPR均隨AFP-N HCC的進(jìn)展、腫瘤大小和分期的增加而顯著增加。多變量Logistic回歸分析表示高FPR和GPR水平是影響AFP-NHCC發(fā)生的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。這些結(jié)果提示FPR和GPR可能是AFP-N HCC患者病情進(jìn)展的重要生物標(biāo)志物。FPR和GPR在鑒別AFP-N HCC時(shí)具有較好敏感度和特異度。經(jīng)文獻(xiàn)檢索表明眾多生物標(biāo)志物可以幫助診斷AFP-N HCC，例如GP73、AFP-L3和PIVKAII鑒別AFP-N HCC時(shí)的AUC值分別為0.78、0.61和0.86，敏感度分別為66%、50%和76%[23-24]。通過(guò)與本次研究相比可知，F(xiàn)PR、GPR在診斷AFP-N HCC時(shí)的診斷效能要優(yōu)于上述生物標(biāo)志物。此外，在鑒別AFP-N HCC時(shí)，F(xiàn)PR、GPR聯(lián)合診斷時(shí)的AUC值顯著高于單獨(dú)使用時(shí)的。

綜上所述，F(xiàn)PR、GPR可作為AFP-N HCC診斷的生物學(xué)指標(biāo)，兩者聯(lián)合診斷時(shí)效能優(yōu)異。