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        枳椇果序軸水提取液對(duì)NASH的預(yù)防和治療研究

        2021-04-11 18:14:04周敏吳琪珍
        當(dāng)代化工研究 2021年15期
        關(guān)鍵詞:枳椇過(guò)氧化脂質(zhì)

        *周敏 吳琪珍

        (贛南衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院 江西 341000)

        引言

        枳椇又名雞爪子、拐棗、萬(wàn)子果、南枳椇,是鼠李科枳椇屬的高大落葉喬木。分布于安徽、江蘇、浙江、江西、福建、廣東、廣西、湖南、湖北等地。野生枳椇在江西廣泛分布于峰山、九連山、五指峰,吉安等贛南地區(qū)。

        枳椇含有大量的葡萄糖和蘋(píng)果酸鈣,具有較強(qiáng)的利尿作用,能促進(jìn)乙醇的分解,顯著降低血液中的乙醇濃度,并能清除體內(nèi)由乙醇產(chǎn)生的自由基,防止過(guò)氧化氫酶的形成,從而減少酒精對(duì)肝組織的損害,避免因酒精中毒而導(dǎo)致的各種代謝異常。

        中藥枳椇性平、入脾、胃經(jīng),具有止渴功能,一直被世代醫(yī)家用于止渴解酒,適用于過(guò)度飲酒、醉不醒、口干煩渴等?!侗静菥V目》稱之為“甘平無(wú)毒,治頭風(fēng),小腹拘急”?!短票静荨酚涊d其“止渴除煩,潤(rùn)五臟,利大小便,去膈上熱,功用如蜜”。《滇南本草》稱其“治一切左癱右瘓,風(fēng)濕麻木,能解酒毒”。《本草拾遺》記載“木蜜樹(shù)生南方,人呼白石木,枝、葉俱甜。嫩葉可生啖,味如蜜。老枝細(xì)破,煎汁成蜜,倍甜,止渴解煩也”?!兜崮媳静輬D說(shuō)》記載“補(bǔ)中益氣。痰火閉結(jié)于胸中,用此可解”。煮粥服食之,對(duì)飲酒過(guò)量、口干煩渴者尤其適宜。

        關(guān)于枳椇的藥用部位,古今文獻(xiàn)有不同的記載,如《廣東中藥》指出枳椇藥用部位為果實(shí),《中藥材手冊(cè)》規(guī)定藥用部位為“果實(shí)及肉質(zhì)膨大的花序軸”,《陜西中草藥》提出枳椇藥用“果?;蚍N子”等。目前對(duì)枳椇抗乙醇作用的研究主要集中在種子部位,研究表明枳椇子乙酸乙酯提取物具有明顯的抗乙醇作用,但對(duì)其他部位抗乙醇作用機(jī)理的研究較少。

        脂質(zhì)過(guò)氧化損傷導(dǎo)致的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的發(fā)病機(jī)制尚未完全弄清。但是研究表明脂質(zhì)過(guò)氧化是納什均衡中最重要的因素。本研究旨在建立高脂飲食致NASH模型,檢測(cè)肝組織中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的含量,探討脂質(zhì)過(guò)氧化損傷對(duì)NASH的影響,研究枳椇不同部位水提物對(duì)肝組織中SOD含量的影響。

        1.實(shí)驗(yàn)分析材料

        (1)實(shí)驗(yàn)分析動(dòng)物

        60只雄性SD大鼠,清潔級(jí),重200-250g,由浙江省實(shí)驗(yàn)分析動(dòng)物中心提供,許可證號(hào)為SYXK(浙江)2005-0074,存放于浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)分析動(dòng)物中心。

        (2)主要試劑

        超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)試劑盒(ADL),購(gòu)自上海浙北生物科技有限公司。

        (3)藥物制備

        制備枳椇不同部位的水提取物:取自江西產(chǎn)枳椇不同部位壓平,放入小萃取器中,加水,萃取兩次,合并濾液,得到枳椇不同部位的水提取物0.2g/ml;制備聚烯磷脂酰膽堿和硫普羅寧的混合物:硫普羅寧片(凱西萊,批號(hào):061207)和多烯磷脂酰膽堿片(易善復(fù),批號(hào):d8096,賽諾菲(北京)制藥有限公司。)制成粉末,加入蒸餾水,制備出含鈣石6mg和易善復(fù)13.68mg的混合溶液。

        2.實(shí)驗(yàn)分析方法

        (1)造模

        用高脂飼料(100g/kg豬油+膽固醇)喂養(yǎng)正常大鼠12周,建立實(shí)驗(yàn)分析NASH模型。

        (2)給藥及分組

        將四十只SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、對(duì)照組、枳椇不同部位組。模型組每天給予10ml/kg蒸餾水,喂養(yǎng)2次;正常組每天給予標(biāo)準(zhǔn)飼料和10ml/kg蒸餾水,喂養(yǎng)2次;枳椇不同部位每天給予10ml/kg水提取物,然后服用2次。對(duì)照組給予多烯磷脂酰膽堿和硫普羅寧的混合物,每天10ml/kg,連續(xù)12周。

        (3)觀察指標(biāo)

        處死大鼠,取肝組織上清液和生理鹽水(1:9)勻漿?;瘜W(xué)比色法測(cè)定谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。采用He染色法對(duì)肝組織進(jìn)行染色,根據(jù)脂肪肝和酒精性肝?。ㄖ咀冃裕┰\斷標(biāo)準(zhǔn)觀察肝組織病理變化。

        (4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        資料用(±s)表示,用spss13.0軟件包處理,用單因素方差分析。

        3.實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果

        (1)肝組織脂肪變性、炎癥程度積分

        模型組肝組織脂肪變性及炎癥程度積分較正常組明顯增高,差異有顯著性意義(p&;1t;0.01),提示造模成功。不同部位枳椇果序軸組、對(duì)照組肝組織脂肪變性及炎癥程度積分較模型組明顯減輕,差異有顯著性意義(p&;1t;0.01)。不同部位枳椇果序組脂肪變性及炎癥程度與對(duì)照組比較,差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。

        (2)肝組織MDA、SOD、GSH-Px含量

        模型組肝組織MDA較正常組明顯增高,SOD、GSH-Px較正常組明顯減低,差異有顯著性意義(p&;1t;0.01);不同部位枳椇果序軸組、對(duì)照組肝組織MDA較模型組明顯減低,SOD、GSH-Px較模型組明顯增高,差異有顯著性意義(p&;1t;0.01)。不同部位枳椇果序軸組MDA、SOD、GSH-Px與對(duì)照組比較,差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。

        4.討論

        目前對(duì)NASH的治療主要采用降脂藥、抗氧化劑、保肝藥和胰島素增敏劑等方法。由于病機(jī)復(fù)雜,診斷特異性差,療效不佳。

        枳椇可以用作食物和藥物?!跋闾?,本草甘露,無(wú)毒”。解渴、清熱、滋潤(rùn)五臟、緩解便秘。也可以用來(lái)滋養(yǎng)和保護(hù)肝臟。結(jié)果表明,枳椇不同部位對(duì)脂肪肝有較好的防治效果。近年來(lái),筆者采用不同部位的枳椇治療非酒精性脂肪性肝炎,取得了良好的療效。結(jié)果表明,脂質(zhì)過(guò)氧化在非酒精性脂肪性肝炎的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,枳椇果序軸水提物對(duì)非酒精性脂肪性肝炎有良好的預(yù)防作用,其機(jī)制可能與阻斷脂質(zhì)過(guò)氧化鏈反應(yīng)、降低丙二醛生成、提高肝組織SOD水平和GSH-Px活性有關(guān)。

        此外,在肝臟保護(hù)方面,也有不少學(xué)者進(jìn)行了深入的研究。劉秀玲等研究了枳椇子提取物對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)和金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)表達(dá)的影響。趙燕平等研究了枳椇子對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)脂肪變性大鼠肝損傷的防治作用。宋娟觀察枳椇子對(duì)肝纖維化大鼠血脂脂質(zhì)過(guò)氧化的動(dòng)態(tài)影響。HASEK研究了長(zhǎng)期乙醇喂養(yǎng)大鼠脂多糖(LPS)誘發(fā)的肝損傷。

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