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        密蒙花膠囊對慢性阻塞性肺疾病模型大鼠氣道重塑的影響

        2021-04-06 03:50:48金韜胡田魁張建宏
        云南中醫(yī)中藥雜志 2021年3期
        關(guān)鍵詞:慢性阻塞性肺病

        金韜 胡田魁 張建宏

        摘要:目的 觀察密蒙花膠囊對慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠氣道重塑的影響。方法 用煙熏和大鼠氣管內(nèi)注入脂多糖(LPS)的方法建立COPD模型,將雄性SD大鼠隨機分為正常對照組、模型對照組、密蒙花膠囊高、中、低劑量組,共5組。正常對照組、模型對照組給予0.9%生理鹽水灌胃,各給藥組給予與0.9%生理鹽水同體積的密蒙花膠囊灌胃,4周后進行支氣管形態(tài)學(xué)觀察、肺功能測量。結(jié)果 模型對照組大鼠支氣管、肺組織改變符合COPD病理表現(xiàn),與模型組比較,密蒙花膠囊高、中劑量組小支氣管壁及平滑肌層厚度顯著降低,F(xiàn)EV0.3/FVC顯著升高(P<0.01),Re 、Ri顯著降低(P<0.01)。結(jié)論 密蒙花膠囊能夠減緩COPD大鼠氣道重構(gòu),延緩或阻止COPD疾病的發(fā)生。

        關(guān)鍵詞:慢性阻塞性肺病;密蒙花膠囊;氣道炎癥;氣道重塑

        中圖分類號:R285.5 文獻標志碼:A 文章編號:1007-2349(2021)03-0079-03

        慢性阻塞性肺疾病(Chronic obsturctive pulmonary Disease,COPD.簡稱慢阻肺)是一種以不完全可逆性氣流受阻為特征的漸進性疾病,氣流受阻呈進行式發(fā)展,多與肺部對有害顆粒與氣體的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)[1]。慢阻肺是一種嚴重的呼吸系統(tǒng)疾病,患病人數(shù)多,病死率高,由于其緩慢進行性發(fā)展,嚴重影響患者的勞動力和生活質(zhì)量。2018年中國成人肺部健康研究(CPHS)調(diào)查結(jié)果顯示,我國慢阻肺患者人數(shù)9990萬,已成為與高血壓、糖尿病“等量齊觀”的慢性疾病,構(gòu)成我國重大疾病負擔(dān)[2]。

        目前,治療慢阻肺以排痰,保持氣道通暢為主要治療手段,臨床上以排痰劑(黏液溶解劑)、支氣管舒張劑、糖皮質(zhì)激素等藥物治療及吸氧、機械通氣等療法為主,雖然在一定程度上延遲疾病的發(fā)展,但不能從根本上改變患者的預(yù)后。由于COPD是多因素導(dǎo)致的復(fù)合疾病,現(xiàn)有單一活性成分的西藥都無法逆轉(zhuǎn)COPD的進程,療效不能讓人滿意。因此,從中國傳統(tǒng)中醫(yī)藥中開發(fā),探尋治療COPD的藥物具有重大的現(xiàn)實意義。

        在進行民族民間醫(yī)藥調(diào)研中,我們發(fā)現(xiàn)中藥密蒙花(Buddleja officinlis Maxim)對COPO患者具有較好的治療作用,經(jīng)對患者疾病診斷,用藥情況進行核實,確認密蒙花在改善COPD患者癥狀方面具有顯著的療效,且無密蒙花在慢阻肺疾病治療的文獻報到。因此立項開展密蒙花治療COPD的藥理實驗,以評價該藥治療COPD的療效和治療前景。

        1 材料與方法

        1.1 試劑與藥物 密蒙花膠囊 本公司自制。香煙:市售紅河牌香煙,焦油量13mg,氣煙堿量1.3mg。脂多糖(LPS):上海源葉生物有限公司。戊巴比妥鈉:北京索萊寶科技有限公司。

        1.2 儀器 試驗動物肺功能分析系統(tǒng):北京貝蘭博科技有限公司;光學(xué)顯微鏡:上海光學(xué)儀器一廠;輪轉(zhuǎn)式石蠟切片機:深圳市匯沃科技有限公司。

        1.3 分組及方法 健康SD大鼠50只,雄性,體重(200±23)g,購自昆明醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。將大鼠隨機分為組5組,即正常對照組、模型組及密蒙花膠囊高、中、低計量組,每組各10只。參照文獻[3]煙熏加LPS造模,于模型復(fù)制的第1、14 d,除正常對照組外,其余各組用戊巴比妥鈉麻醉大鼠后,打開其頸部,暴露氣管,用1 mL注射器向氣管內(nèi)注入脂多糖(LPS)各0.2mL,(200μg/200mL),在皮膚傷口處滴入青霉素注射液,然后縫合皮膚并用碘酒棉球消毒。第2~13 d,15~28 d每日上午在75L密閉箱內(nèi)熏紅河牌香煙0.5h。給藥,正常對照組、模型對照組灌服0.9%生理鹽水10mL/kg,1次/d;密蒙花膠囊高劑量組灌服密蒙花膠囊(相當于臨床成人劑量的10倍):22.8 g/kg,2.28 g/mL;密蒙花膠囊中劑量組灌服密蒙花膠囊(相當于臨床成人劑量的5倍):11.4 g/kg,1.14 g/mL;密蒙花膠囊低劑量組灌服密蒙花膠囊(相當于臨床成人劑量的2.5倍):5.7 g/kg,0.57 g/mL。5組均連續(xù)灌胃28 d,灌胃結(jié)束第2 d,測定各項指標。

        1.4 觀察指標

        1.4.1 支氣管形態(tài)學(xué)測量 大鼠處死后,取左肺上葉位置于10%中性福爾馬林溶液中固定。酒精梯度脫水,二甲苯透明標本,浸蠟,包埋,切片,HE染色,用圖像分析系統(tǒng)測量小支氣管管徑、管壁及平滑肌層厚度。

        1.4.2 肺功能測定 以戊巴比妥鈉麻醉大鼠,氣管插管,放入箱內(nèi),記錄大鼠8個自主呼吸周期,獲得氣道壓力(P)、容積(V)變化,相應(yīng)計算得到肺呼氣阻力(Re)、肺吸氣阻力(Ri)。之后,經(jīng)三通管快速向大鼠氣道內(nèi)注入6mL空氣造成大鼠被動深呼吸,即可測定用力肺活量(FVC)、第0.3用力呼氣量(FEV0.3,相應(yīng)于人的FEV1),得出其比值FEV0.3/FVC。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理,數(shù)據(jù)以x2±s表示,多組間比較用方差分析,兩組間比較采用LSD-t檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 支氣管形態(tài)學(xué)測量 隨機選取支氣管HE切片中較規(guī)整的小支氣管,每個標本選3~6個支氣管橫切面積,采用圖像分析系統(tǒng)進行計算:管壁總面積(WAt)=氣道外壁所圍面積(Ao)-管壁內(nèi)側(cè)的面積(Ai);平滑肌層面積(WAsm)=平滑肌層外側(cè)面積(Asmo)-平滑肌層內(nèi)側(cè)面積(Asmi)。以管壁內(nèi)周長(Pi)進行標準化,結(jié)果以單位長度的管壁面積(WAt/Pi)表示管壁厚度,以單位長度的平滑肌層面積(WAsm/Pi)表示平滑肌層厚度。結(jié)果模型組大鼠小支氣管壁和平滑肌層較對照組明顯增厚(P<0.01),并伴有肺氣腫的發(fā)生,說明COPD大鼠存在小氣道組織結(jié)構(gòu)的改變。經(jīng)治療后,密蒙花膠囊高、中劑量組大鼠小支氣管壁及平滑肌層厚度較模型組顯著降低(P<0.01)。支氣管形態(tài)學(xué)測量結(jié)果見表1。

        2.2 肺功能測量 與正常對照組比較,模型組大鼠FEV0.3/FVC顯著降低(P<0.01),Re、Ri顯著升高(P<0.01),提示模型大鼠有氣流阻塞。與模型組比較,密蒙花膠囊高、中劑量組大鼠FEV0.3/FVC顯著升高(P<0.01),Re 、Ri顯著降低(P<0.01)。大鼠肺功能測定結(jié)果見表2。

        3 討論

        本研究以香煙煙熏加氣管注入脂多糖(LPS)建立COPD模型,結(jié)果發(fā)現(xiàn):氣道重塑主要的病理形態(tài)學(xué)改變是以膠原為主的細胞外基質(zhì)沉積[3],本實驗中,模型組大鼠小支氣管壁和平滑肌層較空白對照組明顯增厚(P<0.01),并伴有肺氣腫的發(fā)生,說明COPD大鼠存在小氣道組織結(jié)構(gòu)的改變。治療組中,密蒙花膠囊高、中劑量組大鼠小支氣管壁及平滑肌層厚度較模型組顯著降低,提示其具有明顯的抑制膠原合成減少氣道周圍膠原沉積,干預(yù)COPD大鼠氣道重塑的作用。

        密蒙花為馬錢科植物,又名小錦花、黃飯花、雞骨頭花、染飯花等[5],主要分布于我國西南及中南地區(qū),資源十分豐富。該藥始載于《開寶本草》,為中國藥典收載品種,主要用于目赤腫痛,多淚羞明,眼生翳膜,肝虛目暗,視物昏花等癥[6],是傳統(tǒng)中藥材中重要的眼科用藥?,F(xiàn)代研究表明,密蒙花主要化學(xué)成分為刺槐苷、密蒙花苷、密蒙花萜苷A、B梓苷等類化合物[7],具有抗炎、抗氧化、抑制醛糖還原酶及乙酰膽堿酯酶等作用及潛在預(yù)防和延緩糖尿病并發(fā)癥的效果[8]。通過本研究證實,密蒙花對COPD具有潛在治療作用。鑒于COPD的形成是由多因素參與的、復(fù)雜的慢性病理改變過程,任何針對單一因素的治療不會有力地改變COPD病理進程,而中藥具有多靶點、多因素、多環(huán)節(jié)的作用特點,使得中藥在治療COPD上具有天然優(yōu)勢。密蒙花治療COPD值得進一步深入研究開發(fā)。

        參考文獻:

        [1]中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007 年修訂版)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2007,30(1):8-17.

        [2]Wang C,Xu J,Yang L,et al.Prevalence and Risk Factors of Chronic Obstructive Pulmonary Disease in China(the China Pulmonary Health[Cph]Study):A National Cross-Sectional Study.The Lancet,2018,391:1706-17.

        [3]宋一平,崔德健,茅培英,等.慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立及藥物干預(yù)的影響[J].中華內(nèi)科雜志,2000,39(8):556-557.

        [4]GONZALEZ-AVILA G,BAZAN-PERKINS B,SANDOVAL C,et al.interstitial collagen turnover during airway remodeling in acute and chronic experimental asthma[J].Experimental and Therapeutic Med-icine,2016,12(3):1419-1427.

        [5]郭雷,朱文成,劉超,等.密蒙花化學(xué)成分及生物活性研究進展[J].食品研究與開發(fā),2012,33(7):222-225.

        [6]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:329.

        [7]李經(jīng)緯.《中醫(yī)大詞典》[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004.1659.

        [8]HAN P,CUI Y J,GUO H Z,et al.Chemical constituents ofBuddleia officinalis and their bioactivities[J].Chin Tradit HerbDrugs(中草藥),2004,35(10):1086-1090.

        (收稿日期:2020-09-10)

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