沈雁文

（解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學(xué)中心兒科，北京 100039）

嬰兒嚴(yán)重肌陣攣癲癇（severe myoclonic epilepsy in infancy，SMEI）即德拉韋綜合征（Dravet syndrome），是兒童難治性癲癇的代表性疾病，與鈉通道密切相關(guān)，具有極高的致死率和致殘率。鈉通道是細(xì)胞膜上最重要的離子通道之一，是神經(jīng)、肌肉系統(tǒng)生物電信號(hào)的產(chǎn)生基礎(chǔ)。盡管鈉通道被發(fā)現(xiàn)已70余年，目前已知鈉通道與神經(jīng)、肌肉、心血管系統(tǒng)的很多疾病密切相關(guān)，是眾多藥物的治療靶點(diǎn)，且鈉通道相關(guān)基因的異常尤其常見(jiàn)于癲癇與心率失?；颊?，是導(dǎo)致癲癇患者猝死的重要原因之一[1-3]，然而人們對(duì)鈉通道的了解依舊有限。2018年顏寧團(tuán)隊(duì)揭示了人源電壓門(mén)控鈉通道Nav1.4在3.2 ?分辨率冷凍電鏡下的結(jié)構(gòu)全貌，尤其是電壓感受結(jié)構(gòu)域、離子選擇篩、快速失活原件等關(guān)鍵功能單元的結(jié)構(gòu)，并將Nav1.4相關(guān)的70多個(gè)點(diǎn)突變及其對(duì)應(yīng)疾?。ò?qiáng)直、肌無(wú)力、周期性癱瘓、熱性驚厥附加癥等）與結(jié)構(gòu)進(jìn)行一一對(duì)應(yīng)，重點(diǎn)討論了與電壓感知和快速失活相關(guān)的突變，從而為理解相關(guān)疾病的致病機(jī)制提供了重要的分子依據(jù)[4]。2021年初顏寧團(tuán)隊(duì)再次通過(guò)對(duì)人源鈉通道Nav1.1及Nav1.5進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析及對(duì)比，揭示了鈉通道上的致病熱點(diǎn)變異位置[5]?；诨蚓庉嬆Ｊ缴镅芯康目焖侔l(fā)展，人們對(duì)SCN1A基因相關(guān)疾病譜，尤其是SMEI這一兒童災(zāi)難性的癲癇綜合征開(kāi)始有了新的認(rèn)識(shí)，針對(duì)SMEI的治療研究也開(kāi)始多樣化[6-8]。本文從鈉通道的分子結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)和組織時(shí)序表達(dá)差異方面介紹了SMEI作為聯(lián)絡(luò)神經(jīng)元病的可能性及相關(guān)研究進(jìn)展。

1 鈉通道的種類及進(jìn)化

電壓門(mén)控鈉通道屬于膜蛋白的一種，其編碼基因是基因家族里最古老又高度保守的基因序列之一，因而，人類鈉通道α亞基有超過(guò)50%的跨膜區(qū)與最簡(jiǎn)單的真核生物序列是一樣的[9]。細(xì)菌的鈉通道為同源四聚體結(jié)構(gòu)，而包括人類在內(nèi)的哺乳動(dòng)物及斑馬魚(yú)等則是由一個(gè)α亞基和兩個(gè)β亞基構(gòu)成的異源三聚體復(fù)合物，其中α亞基是最重要的組成。在進(jìn)化過(guò)程中，古生物基因通過(guò)同源重復(fù)拷貝后逐漸分化出不同亞型，以適應(yīng)更復(fù)雜、更精細(xì)的生物功能需求[9-10]。構(gòu)成人類鈉通道的α亞基主要有9種亞型（Nav1.1～1.9），β亞基主要有5種（β1、β1B、β2、β3、β4），其基因位置及分布以及對(duì)應(yīng)蛋白見(jiàn)圖1。

事實(shí)上，人體內(nèi)存在的鈉通道種類十分豐富，除了9種主要α亞基與5種主要β亞基的組合以外，哪怕同一基因編碼的α亞基也存在很多類型[10]。除了突變導(dǎo)致的可能致病的異常鈉通道結(jié)構(gòu)外，正常生物生命過(guò)程中同一基因編碼的α亞基產(chǎn)物也可以通過(guò)選擇性剪切對(duì)前體mRNA（PremRNA）進(jìn)行再加工，最后形成的成熟mRNA并不包含所有外顯子，部分外顯子在選擇性剪切過(guò)程中可被拋棄，形成一個(gè)基因?qū)?yīng)多種不同蛋白的現(xiàn)象。例如SCN2A基因在5號(hào)外顯子部位存在一個(gè)選擇性剪切位點(diǎn)[11]，SCN8A與SCN5A均在6號(hào)外顯子處具有選擇性剪切位點(diǎn)，SCN8A在21號(hào)外顯子處還有另一個(gè)選擇性剪切位點(diǎn)，均分別在胎兒期和成人期選擇不同的外顯子編碼序列[12-14]。這意味著雖然來(lái)自相同的基因，但是胎兒期的Nav1.2、Nav1.5、Nav1.6與成人期的Nav1.2、Nav1.5、Nav1.6實(shí)際上存在功能與結(jié)構(gòu)甚至分布上的差異，而且如果這種選擇性剪切過(guò)程發(fā)生異常，導(dǎo)致胎兒型鈉通道不能成功轉(zhuǎn)化為成人型鈉通道，也可能導(dǎo)致疾病的發(fā)生，這些可能性不僅與癲癇相關(guān)，也與心律失常、腫瘤等其他多種疾病密切相關(guān)[13-16]。這種差異對(duì)生命發(fā)展過(guò)程中的具體意義目前尚不明確，另外，通過(guò)何種機(jī)制啟動(dòng)及關(guān)閉鈉通道從胎兒型向成人型的轉(zhuǎn)化，需要進(jìn)一步深入探索。對(duì)同一突變的基因，若同時(shí)存在其他影響剪切方式選擇的問(wèn)題，最后產(chǎn)生的離子通道的蛋白結(jié)構(gòu)及功能也會(huì)存在差異，選擇性剪切可能是SCN1A基因同一突變可能存在多種臨床表型的原因之一。不同組織細(xì)胞如何制定同一基因內(nèi)在的不同剪切方案及剪切程序也至今不明，但選擇性剪切這一背景為部分內(nèi)部存在高度同源重復(fù)序列的基因發(fā)生異常導(dǎo)致的疾病的進(jìn)一步治療提供了以外顯子跳躍作為治療方法的思路。

2 鈉通道的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

在人類，由不同α亞基與不同β亞基構(gòu)成的鈉通道雖具有同源性，其生理功能卻差異極大，在不同組織細(xì)胞中分布不同，承擔(dān)不同的功能。α亞基是鈉通道的主要構(gòu)成成分，其對(duì)河鲀毒素的敏感性是區(qū)分不同鈉通道蛋白的主要鑒別方法。α亞基長(zhǎng)度約260 kD，存在4個(gè)高度重復(fù)的結(jié)構(gòu)域，每個(gè)結(jié)構(gòu)域含有6個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)（S1～S6），均包含電壓感受器和離子傳遞通道，是動(dòng)作電位的主要承擔(dān)者[6,17]。而α亞基前后連接的β亞基則屬于單跨膜細(xì)胞黏附因子，調(diào)節(jié)細(xì)胞表面蛋白的表達(dá)和引導(dǎo)α亞基的動(dòng)力，對(duì)α亞基在細(xì)胞膜的定位及功能調(diào)節(jié)均有重要作用，對(duì)細(xì)胞的遷移定位和神經(jīng)元的增殖、生長(zhǎng)等亦發(fā)揮重要作用[18-21]。

以Nav1.6為例，α亞基的4個(gè)結(jié)構(gòu)域呈高度同源，在進(jìn)化過(guò)程中高度保守，S1～S6跨膜區(qū)中S1～S5可起到感受壓力的作用，尤其是S4段，常有攜帶正電荷的氨基酸殘基分布，推測(cè)其為電壓門(mén)控的離子通道壓力感受器的主要位置，S4段賴氨酸及精氨酸殘基的變異往往導(dǎo)致其功能發(fā)生改變，而S5和S6是離子傳遞通道[5,22]。SCN1A基因?qū)?yīng)的致病突變多數(shù)發(fā)生在胞外結(jié)構(gòu)及跨膜結(jié)構(gòu)，其中4個(gè)電壓感受域的突變多與SMEI相關(guān)[5]。此外，在結(jié)構(gòu)域I與II，結(jié)構(gòu)域II與III之間均存在較大的疏松環(huán)狀結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)域III及結(jié)構(gòu)域Ⅳ之間存在許多調(diào)控鈉通道活性的配體結(jié)合位點(diǎn)。環(huán)狀結(jié)構(gòu)及α亞基蛋白的N端、長(zhǎng)C端均位于細(xì)胞內(nèi)側(cè)，存在較多配體結(jié)合位點(diǎn)，可對(duì)鈉通道功能產(chǎn)生進(jìn)行調(diào)節(jié)。如胞內(nèi)側(cè)N末端與MAP1B蛋白結(jié)合[23]，C末端與β亞基結(jié)合[5,21]，均可加強(qiáng)牽引鈉通道移動(dòng)并定位至細(xì)胞表面，而Nav1.6 α亞基的結(jié)構(gòu)域I/結(jié)構(gòu)域II環(huán)的551～554位點(diǎn)，胞內(nèi)側(cè)C末端1 943～1 945位點(diǎn)均存在可與泛素連接酶E3（NEDD4）互相作用的結(jié)構(gòu)位點(diǎn)，可導(dǎo)致Nav1.6泛素化出現(xiàn)內(nèi)陷及降解[24]；結(jié)構(gòu)域II與結(jié)構(gòu)域III之間的疏松環(huán)存在AnkG結(jié)合位點(diǎn)，可引導(dǎo)Nav1.6遷移至軸突起始段及郎飛結(jié)處[25]。C末端的鈣調(diào)蛋白也是重要的功能調(diào)節(jié)位點(diǎn)[26]。多數(shù)鈉通道蛋白具有同源性，配體調(diào)節(jié)位點(diǎn)極為相似。鈉通道的離子傳遞通道結(jié)構(gòu)的開(kāi)放與閉合是電壓依賴的激活與失活，鈉通道的快激活與失活可調(diào)節(jié)細(xì)胞電流，通過(guò)細(xì)胞膜除極化進(jìn)而產(chǎn)生動(dòng)作電位；而鈉通道的慢失活，則調(diào)控了可利用的鈉通道數(shù)量，調(diào)節(jié)細(xì)胞的興奮性。不同位置基因突變導(dǎo)致α亞基的不同變化對(duì)最終形成的通道蛋白電生理功能的影響不同。當(dāng)突變發(fā)生于調(diào)控結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)域或位于其他位置的突變干擾了離子通道蛋白的配體結(jié)合位點(diǎn)與配體結(jié)合的能力，疾病的表型嚴(yán)重程度很可能還和與通道蛋白結(jié)合的調(diào)控分子所對(duì)應(yīng)的基因是否也存在異常密切相關(guān)。這可能是SCN1A同一突變并不一定產(chǎn)生SMEI的另一原因。

3 鈉通道的時(shí)空分布

電壓門(mén)控的鈉通道主要分布于興奮性細(xì)胞，其壓力感受器在一定電壓下可使離子傳遞通道打開(kāi)、鈉離子內(nèi)流，觸發(fā)神經(jīng)及肌肉組織細(xì)胞產(chǎn)生動(dòng)作電位，細(xì)胞膜去極化。不同的鈉通道壓力感受器興奮閾值不同，允許鈉離子通過(guò)的能力不同，產(chǎn)生的鈉離子流不同，失活持續(xù)時(shí)間不同，不同細(xì)胞的離子通道數(shù)量亦不同，使細(xì)胞興奮性表現(xiàn)出極大差異，進(jìn)而承擔(dān)并完成不同的生理功能。鈉通道在多種組織細(xì)胞膜有不同程度低表達(dá)，在神經(jīng)及肌肉系統(tǒng)表達(dá)最高，其分布見(jiàn)表1。

表1 鈉通道的分布和表達(dá)[17,23-28]

實(shí)際上，不僅在不同組織器官中不同亞型的鈉通道分布存在差異，在同一器官的不同部位、同一部位的不同細(xì)胞乃至同一細(xì)胞的不同部位，鈉通道的分布也有較大差異。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3及Nav1.6是主要的亞型，Nav1.6主要分布于興奮性神經(jīng)元，Nav1.1主要分布于抑制性神經(jīng)元，在小腦浦肯野纖維、海馬抑制性γ-氨基丁酸(GABA)能神經(jīng)元、下丘腦及大腦皮質(zhì)的中間神經(jīng)元均可檢測(cè)到一定程度的表達(dá)[28]。在細(xì)胞水平，Nav1.1和Nav1.3主要位于細(xì)胞體和軸突起始段；Nav1.2在髓鞘化和未髓鞘化的軸突和樹(shù)突上均有廣泛分布[29]；Nav1.6多數(shù)位于興奮性及抑制性神經(jīng)元軸突起始段的遠(yuǎn)端，負(fù)責(zé)動(dòng)作電位的產(chǎn)生，其興奮閾值最低，在去極化時(shí)最易被激活，20～100 Hz的高頻刺激時(shí)不容易失活，慢失活狀態(tài)時(shí)有更強(qiáng)的電壓依賴性[30]，與Nav1.2相比，在-35～-25 mV時(shí)通過(guò)的電流要增多近10%[31]。Nav1.6是軸突起始段及郎飛結(jié)位置的主要鈉通道成分，也是心臟竇房節(jié)的重要鈉通道成分。而Nav1.1（抑制性神經(jīng)元）及Nav1.2（興奮性神經(jīng)元）多數(shù)位于軸突起始段的近端，可調(diào)節(jié)動(dòng)作電位的反向傳播[31]。在生命的不同階段，同一部位的鈉通道表達(dá)也存在很大的差異。在胎鼠和剛出生的乳鼠，Nav1.3是神經(jīng)細(xì)胞上主要表達(dá)的鈉通道類型，Nav1.1、Nav1.2及Nav1.6則在出生后才逐漸出現(xiàn)升高[32]，而且Nav1.2、Nav1.5及Nav1.6還會(huì)出現(xiàn)由胎兒型向成人型逐漸轉(zhuǎn)換的過(guò)程[13-14]，在剛出生的小鼠，軸突起始段主要表達(dá)Nav1.2，出生后2～4周后才逐漸被Nav1.6取代[33]，不同鈉通道蛋白在生命體的時(shí)間軸及組織部位的空間軸上均呈程序性表達(dá)的時(shí)空差異。

4 鈉通道與SMEI

近年來(lái)模型生物研究的快速發(fā)展極大地促進(jìn)了基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展，Cre/loxP技術(shù)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型鼠的制作，不僅縮短了制作周期，降低了成本，而且制作的模型鼠組織特異性強(qiáng)，存活率高，通過(guò)Cre/loxP技術(shù)對(duì)基因模型鼠的不同類型神經(jīng)元功能進(jìn)行分析，使我們對(duì)鈉通道譜系疾病有了更深的了解，其中對(duì)SMEI模型鼠（DS鼠）的病理生理基礎(chǔ)研究最近幾年來(lái)也有認(rèn)識(shí)的突破，新的認(rèn)識(shí)和了解可能對(duì)SMEI未來(lái)的治療產(chǎn)生重要影響。與人類相似，DS鼠在出生時(shí)與野生型小鼠無(wú)明顯差異，但是生后4～5周開(kāi)始出現(xiàn)熱敏感性癲癇。小鼠出生時(shí)腦組織的鈉通道類型主要以Nav1.3為主，其表達(dá)程度最高，在生后21 d左右降至最低，同時(shí)，Nav1.1在出生時(shí)最低，從生后10 d左右開(kāi)始逐漸升高，持續(xù)至生后30 d；Nav1.1純合缺失的DS鼠多數(shù)于生后15 d左右死亡，Nav1.1雜合缺失的DS鼠多于生后20 d左右發(fā)病，25 d左右達(dá)到死亡高峰期[32]。胎兒型Nav1.3下降、成人型Nav1.1表達(dá)上升并對(duì)Nav1.3進(jìn)行替代的時(shí)間交叉點(diǎn)，與DS鼠與人類SMEI的發(fā)病年齡相一致，猜測(cè)SCN1A基因變異導(dǎo)致Nav1.1單倍體劑量不足、不能完全取代逐漸降低表達(dá)的Nav1.3可能是觸發(fā)SMEI發(fā)病的原因。

對(duì)小鼠大腦的免疫組化染色發(fā)現(xiàn)，Nav1.1主要存在于前腦、大腦皮質(zhì)、小腦中，主要位于SMEI 能抑制性神經(jīng)元。研究發(fā)現(xiàn)，Nav1.1雜合缺失鼠和純合缺失鼠海馬的神經(jīng)元電壓門(mén)控的鈉通道激活與失活均不受影響，但是鈉離子電流均較野生型顯著降低，不同腦組織的抑制性中間神經(jīng)元的鈉離子流也均較野生型鼠下降，其中Nav1.1純合缺失鼠下降更顯著[34]。但以興奮性神經(jīng)元為主的椎體細(xì)胞并未受到影響，DS鼠海馬和腦皮質(zhì)的中間神經(jīng)元鈉電流較野生型鼠明顯減少，無(wú)法產(chǎn)生持續(xù)高頻爆發(fā)的動(dòng)作電位，使GABA能抑制性神經(jīng)元的抑制作用減弱并無(wú)法持續(xù)維持[34]。全細(xì)胞膜膜片鉗記錄DS小鼠的小腦浦肯野神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位閾值顯示動(dòng)作電位閾值未受到影響，但是鈉離子流減少了58%～69%[34]，提示SMEI患者的共濟(jì)失調(diào)癥狀可能與小腦抑制性神經(jīng)元出現(xiàn)Nav1.1單倍體劑量不足導(dǎo)致的浦肯野神經(jīng)纖維功能缺陷有關(guān)。局限性敲除小鼠海馬的Nav1.1則模擬了SMEI的熱敏感性和認(rèn)知缺陷，前頭部GABA神經(jīng)元的功能缺陷也可能參與SMEI患者認(rèn)知缺陷、孤獨(dú)癥樣行為、睡眠障礙的癥狀形成[34-35]?；赟CN1A基因異常導(dǎo)致Nav1.1表達(dá)不足、數(shù)量不足，進(jìn)而使抑制性神經(jīng)元不能以高頻持續(xù)動(dòng)作電位維持抑制功能，興奮性神經(jīng)元失去抑制性神經(jīng)元的抑制，興奮性神經(jīng)元與抑制性神經(jīng)元出現(xiàn)功能失衡，可能是導(dǎo)致SMEI的原因，這一假設(shè)很好地解釋了為何臨床上觀察到SMEI患者口服拉莫三嗪可加重癲癇發(fā)作，而SCN8A基因突變導(dǎo)致的早發(fā)性嬰兒癲癇性腦病13型患者則對(duì)包括拉莫三嗪在內(nèi)的多數(shù)鈉通道阻滯劑有效，二者均為鈉通道病，對(duì)同一種藥物則呈現(xiàn)完全相反的治療策略選擇。以該假設(shè)為基礎(chǔ)，挽救GABA能神經(jīng)元功能或抑制興奮性神經(jīng)元功能以平衡興奮性神經(jīng)元與抑制性神經(jīng)元的作用，應(yīng)能緩解SMEI的癥狀。研究證實(shí)，Nav1.6單倍體劑量不足確實(shí)對(duì)Nav1.1單倍體劑量不足起了保護(hù)作用，同時(shí)敲除SCN8A及SCN1A基因的雙雜合小鼠相比SCN1A及β1亞基突變的小鼠疾病嚴(yán)重程度有所緩解，相比DS小鼠，對(duì)藥物誘發(fā)癲癇的耐受性更好，壽命也相對(duì)延長(zhǎng)[36]。用反義核苷酸使小鼠SCN8A轉(zhuǎn)錄降低25%～50%同樣延遲了SCN8A腦病鼠及SCN8A+/-DS小鼠的癲癇發(fā)作并減少了二者的致死率[37]。但是由于Nav1.6和Nav1.1在小腦浦肯野纖維上都有豐富表達(dá)，Nav1.6減少到50%以下時(shí)就要注意肌張力不足和其他運(yùn)動(dòng)障礙可能加重。小劑量氯硝西泮可使GABA能神經(jīng)元功能得到一定修復(fù)，改善DS小鼠的孤獨(dú)癥行為及認(rèn)知功能[38]，新型鈉通道阻滯劑GS967由于對(duì)聯(lián)絡(luò)神經(jīng)元的鈉通道無(wú)影響，而選擇性作用于椎體神經(jīng)元細(xì)胞并下調(diào)Nav1.6表達(dá)，可減輕DS鼠的癲癇發(fā)作[39]，也說(shuō)明促進(jìn)GABA能神經(jīng)元的功能對(duì)改善SMEI癥狀有所幫助。DS小鼠腦組織免疫組化染色中發(fā)現(xiàn)并非所有GABA能神經(jīng)元受損程度都一致，是該假設(shè)需要解決的問(wèn)題，是否與不同部位神經(jīng)元對(duì)鈉通道的量的需求或使用的轉(zhuǎn)錄本有所不同有關(guān)尚需進(jìn)一步研究。值得注意的是，SCN1A及SCN9A基因異常均可導(dǎo)致熱性驚厥附加癥、熱性驚厥、SMEI，且SCN1A與SCN9A基因位置相鄰，二者由一個(gè)共同的反義RNA調(diào)控基因表達(dá)。目前已知SCN1A存在23種不同轉(zhuǎn)錄異構(gòu)體，SCN9A存在15種不同轉(zhuǎn)錄異構(gòu)體，反義RNA基因SCN1A-SCN9A-AS1則有27種轉(zhuǎn)錄異構(gòu)體。以上均提示SCN9A可能為SCN1A的調(diào)節(jié)因子，在SCN1A缺陷情況下，是否可能通過(guò)SCN9A表達(dá)而代償SCN1A功能是一個(gè)值得思考的假設(shè)。

5 鈉通道致病機(jī)制

鈉通道相關(guān)疾病譜系廣泛，其以9種α亞基及5種β亞基組合成多種多樣類型的鈉通道蛋白，雖然互相之間同源性高、基礎(chǔ)功能相似，但是差異不大的基因編碼產(chǎn)生的電生理功能并不相同，相同的變異可能有不同的疾病發(fā)生，同為鈉通道異常，導(dǎo)致的疾病從熱性驚厥、熱性驚厥附加癥、SMEI、Doose綜合征、多種不同類型嬰兒癲癇性腦病、孤獨(dú)癥、痛覺(jué)異常，瘙癢癥、心律失常等表現(xiàn)各異，治療的方向和策略也有很大不同，同樣的鈉通道異常引起的癲癇，采用的也可以是截然相反的治療策略。

鈉通道致病的主要途徑包括：①基因異常導(dǎo)致肽鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或蛋白的二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，導(dǎo)致離子通道的功能發(fā)生變化，或者鈉通道蛋白量產(chǎn)不足，或與配體結(jié)合并發(fā)揮功能調(diào)節(jié)的能力發(fā)生了改變。②引導(dǎo)鈉通道蛋白定位的基因異常，導(dǎo)致鈉通道蛋白不能定位到目標(biāo)區(qū)域，無(wú)法形成一定量的離子通道簇；或因β亞基基因或β亞基表達(dá)的調(diào)節(jié)基因異常導(dǎo)致α亞基與β亞基表達(dá)不平衡最后無(wú)法很好結(jié)合等原因?qū)е履繕?biāo)位置及總體位置的離子通道簇量產(chǎn)不足，離子通道量的變化導(dǎo)致細(xì)胞興奮性改變。③與鈉通道蛋白結(jié)合并調(diào)節(jié)鈉通道蛋白功能結(jié)構(gòu)的相關(guān)基因異常導(dǎo)致調(diào)節(jié)物量產(chǎn)不足，無(wú)法精確調(diào)節(jié)離子通道的開(kāi)關(guān)。④結(jié)構(gòu)異常的突變體蛋白無(wú)法正常降解或更新，導(dǎo)致異常蛋白聚集和沉積，造成細(xì)胞毒性損害。⑤不同生命時(shí)期的鈉通道不能完成發(fā)育時(shí)間軸上的相互替代，胎兒型產(chǎn)物持續(xù)存在，成人型不能正常出現(xiàn)。⑥生命體不同部位上理應(yīng)出現(xiàn)的不同鈉通道不能按預(yù)定規(guī)律出現(xiàn)在正常部位而出現(xiàn)異位表達(dá)。基于以上6方面的異常也將成為未來(lái)鈉通道疾病治療策略選擇的主要方向。目前，以寡核苷酸化合物靶向封閉SCN1A反義RNA使SCN1A基因高表達(dá)，已在DS小鼠上顯示出緩解病情的效果[40]，在對(duì)發(fā)病機(jī)制研究的基礎(chǔ)上，更多治療方法的出現(xiàn)成為可能。

6 總 結(jié)

作為鈉通道密切相關(guān)的兒童難治性癲癇的一種代表性疾病，SMEI具有極高的致死率及致殘率，SCN1A基因的異常不僅在80%的SMEI患者中檢出，也常見(jiàn)于熱性驚厥附加癥和熱性驚厥患者，其中部分基因突變相同的患者表現(xiàn)出的疾病表型并不完全相同，其原因與以下6種因素相關(guān)：本身的亞基成分對(duì)應(yīng)的基因異常、選擇性剪切程序的異常、配體基因的多態(tài)性、輔助定位蛋白對(duì)應(yīng)的基因多態(tài)性、發(fā)育過(guò)程的表達(dá)調(diào)控異常等多種基因的累積效應(yīng)，以及同一生理過(guò)程產(chǎn)生的通路上其他基因的多態(tài)性形成的功能差異的累積效應(yīng)，可解釋SCN1A同一突變位置的臨床表型存在多樣性，突變位置與臨床表型無(wú)顯著關(guān)聯(lián)。神經(jīng)細(xì)胞的興奮性最終并不取決于單個(gè)離子通道功能的狀態(tài)，而是取決于離子通道蛋白在關(guān)鍵部位聚集形成的離子通道蛋白簇整體的電生理狀態(tài)以及它與其他離子通道或轉(zhuǎn)運(yùn)體的聯(lián)動(dòng)效應(yīng)對(duì)細(xì)胞的興奮性、動(dòng)作電位的產(chǎn)生、傳播的影響。對(duì)鈉通道整體的生理、電生理、解剖、胚胎學(xué)相關(guān)研究，使我們對(duì)SMEI有了新的認(rèn)識(shí)，進(jìn)一步揭示Nav1.1的結(jié)構(gòu)及其功能調(diào)節(jié)的調(diào)節(jié)因子，SCN1A基因表達(dá)的調(diào)控，對(duì)開(kāi)發(fā)SMEI的治療方法具有重要意義。Nav1.1結(jié)構(gòu)的解析及功能調(diào)節(jié)位點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)、SCN1A表達(dá)的調(diào)控是探索SMEI發(fā)病機(jī)制及未來(lái)開(kāi)發(fā)治療方法的關(guān)鍵，相關(guān)研究需要臨床與基礎(chǔ)研究相結(jié)合，功能與結(jié)構(gòu)并重，基因與蛋白同行，未來(lái)SMEI的治療將趨向多元化及個(gè)性化。