郭濤 孟靚靚 陳曉云 陳燕 張承芳

1濰坊市婦幼保健院眼耳鼻喉科 261011；2濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院新生兒科 272000；3泰安市中心醫(yī)院兒科 271000；4新泰市人民醫(yī)院兒童保健科 271200

早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變（retinopathy of prematurity，ROP）是常見(jiàn)于低出生體質(zhì)量、胎齡小早產(chǎn)兒的一種視網(wǎng)膜血管增生性疾病，病理改變以病理性新生血管形成、視網(wǎng)膜血管發(fā)育不良等為主，可對(duì)新生兒視功能造成損傷，降低其生存質(zhì)量，并增加家庭、社會(huì)負(fù)擔(dān)［1-2］。妊娠16周，胎兒視網(wǎng)膜中的血管開(kāi)始進(jìn)行發(fā)育，小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌VEGF，促進(jìn)視網(wǎng)膜血管發(fā)育，早產(chǎn)兒出生時(shí)，視網(wǎng)膜血管發(fā)育尚未完成，視網(wǎng)膜無(wú)血管區(qū)存在缺氧現(xiàn)象，可誘導(dǎo)VEGF 水平上升［3］。另外，早產(chǎn)兒出生后多需予以供氧，視網(wǎng)膜組織氧氣增多，可導(dǎo)致VEGF 異常分泌，增加ROP 風(fēng)險(xiǎn)［4］。此次研究分別對(duì)不同胎齡早產(chǎn)兒、ROP 患兒實(shí)施血清VEGF 檢測(cè)，旨在前瞻性研究早產(chǎn)兒、ROP 患兒與VEGF 之間的關(guān)聯(lián)性，現(xiàn)報(bào)道研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 于2018 年9 月至2019 年9 月在濰坊市婦幼保健院出生的＜32周早產(chǎn)兒中隨機(jī)選取60例設(shè)為A組，男31 例（51.67%），女29 例（48.33%）；胎齡范圍為29～31周，胎齡（30.21±0.35）周。于同期在濰坊市婦幼保健院出生的32～36 周早產(chǎn)兒中隨機(jī)選取60 例設(shè)為B 組，男32 例（53.33%），女28 例（46.67%）；胎齡范圍為32～36 周，胎齡（34.10±1.23）周。于同期在濰坊市婦幼保健院出生的足月兒中隨機(jī)選取60 例設(shè)為C 組，男29 例（48.33%），女31 例（51.67%）；胎齡范圍為37～41 周，胎齡（39.01±0.53）周。于同期在本院出生且存在ROP的患兒中隨機(jī)選取60例設(shè)為D組，男32 例（53.33%），女28 例（46.67%）；胎齡范圍為30～36周，胎齡（33.02±1.35）周。此次研究已通過(guò)濰坊市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批，且入選新生兒性別、年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），可對(duì)比研究。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：早產(chǎn)兒均為出生時(shí)胎齡＜37周；ROP經(jīng)《中國(guó)早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變篩查指南（2014 年）》［5］確診；家屬同意參與研究并配合進(jìn)行簽字。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他眼底疾病者；存在其他先天性疾病者；相關(guān)醫(yī)學(xué)信息不全者；家屬依從性差無(wú)法配合完成研究者。

1.3 方法 于出生第1周、第3周、第5周時(shí)，分別予以4 組新生兒采集0.5 ml 外周靜脈血液標(biāo)本，進(jìn)行30～60 min靜置凝固后，予以2 000 r/min×15 min 離心處理，分離血清，保存于-20℃環(huán)境中。VEGF試劑盒由上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司提供，酶標(biāo)儀（Well Scan MK2）購(gòu)自芬蘭雷勃公司。通過(guò)雙抗夾心ABC-ELISA 法對(duì)VEGF 水平進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)步驟參考按照儀器、試劑說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4 觀察指標(biāo)（1）4組新生兒VEGF水平。（2）A、B、D組有無(wú)吸氧新生兒VEGF 水平。（3）早產(chǎn)兒與ROP 患兒相同糾正胎齡VEGF 水平。對(duì)A 組、B 組、D 組糾正胎齡進(jìn)行計(jì)算，A 組與B 組均視為早產(chǎn)兒，D 組視為ROP 患兒，對(duì)比其VEGF水平。吸氧情況依照新生兒實(shí)際情況進(jìn)行選擇。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 研究數(shù)據(jù)以SPSS20.0 處理，VEGF水平計(jì)量資料符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用n（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料組間比較采用重復(fù)測(cè)量方差分析，兩組間比較采用SNK-q檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組新生兒VEGF水平比較 出生第1周、第3周、第5 周時(shí)，D 組VEGF 水平均較A 組、B 組、C 組高，且A 組、B組均較C 組高，A 組較B 組高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），具體見(jiàn)表1。

表1 4組新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表1 4組新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經(jīng)SNK-q 檢驗(yàn)，與C 組比較，aP＜0.05；與B 組比較，bP＜0.05；與A組比較，cP＜0.05

2.2 各組有無(wú)吸氧新生兒VEGF 水平比較 出生第1 周、第3 周、第5 周時(shí)，A 組、C 組有無(wú)吸氧新生兒的VEGF水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；B 組吸氧新生兒VEGF 水平均較未吸氧者低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見(jiàn)表2～4。

表2 A組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表2 A組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析得出，F(xiàn)時(shí)間=1.641，P時(shí)間=0.584；F組間=6.264，P組間=0.067；F交互=0.264，P交互=0.510

表3 B組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表3 B組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析得出，F(xiàn)時(shí)間=0.264，P時(shí)間=0.487；F組間=3.841，P組間=0.095；F交互=2.064，P交互=0.822

2.3 早產(chǎn)兒與ROP 患兒相同糾正胎齡VEGF 水平比較 ROP 患兒各糾正胎齡VEGF 水平均較早產(chǎn)兒高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），詳見(jiàn)表5。

3 討論

ROP 是早產(chǎn)兒眼部疾病的一種，在我國(guó)發(fā)病率約為15.0%～20.0%，相較于足月兒，早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜血管的發(fā)育狀況尚不成熟，在多種因素共同作用下，可致使視網(wǎng)膜血管異常增生，引發(fā)ROP，增加兒童致盲風(fēng)險(xiǎn)［6-7］。近年來(lái)，大量臨床研究表明［8-9］，關(guān)于ROP 的發(fā)生，臨床研究認(rèn)為分兩個(gè)階段：其一為出生后矯正胎齡30 周以后，此階段，新生兒視網(wǎng)膜未正常發(fā)育，娩出后視網(wǎng)膜于高氧分壓環(huán)境中暴露，低氧誘導(dǎo)的VEGF 水平下降，視網(wǎng)膜生長(zhǎng)進(jìn)程緩慢，此階段新生兒出生后視網(wǎng)膜可繼續(xù)生長(zhǎng)，一般無(wú)須予以治療。其二為矯正胎齡31～42 周，此階段，新生兒視網(wǎng)膜發(fā)育對(duì)氧氣的需求量增大，而未血管化的視網(wǎng)膜處于缺氧狀況，VEGF 水平上調(diào)，促進(jìn)視網(wǎng)膜血管大量生長(zhǎng)，進(jìn)入玻璃體腔，進(jìn)而對(duì)患兒視力造成影響。因此，對(duì)于ROP，盡早篩查并予以干預(yù)對(duì)減輕新生兒視功能損害意義重大。

表4 C組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

表4 C組吸氧與未吸氧新生兒VEGF水平比較（，ng/L）

注：經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析得出，F(xiàn)時(shí)間=0.341，P時(shí)間=0.474；F組間=5.975，P組間=0.066；F交互=3.541，P交互=0.206

在ROP發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程中，視網(wǎng)膜新生血管發(fā)揮主導(dǎo)作用。孕16 周后，胎兒視網(wǎng)膜血管開(kāi)始從視盤生長(zhǎng)向前部，孕32 周達(dá)到鼻側(cè)的視網(wǎng)膜鋸齒緣，足月時(shí)才會(huì)達(dá)到顳側(cè)的鋸齒緣處，并完成視網(wǎng)膜血管化。而早產(chǎn)兒出生時(shí)，視網(wǎng)膜血管化尚未完成，存在視網(wǎng)膜無(wú)血管區(qū)，且此區(qū)域處于缺氧狀態(tài)，可對(duì)VEGF 產(chǎn)生誘導(dǎo)作用，使其水平上升。因此，VEGF 在ROP 發(fā)展中有重要作用，VEGF 是血管形成、發(fā)育的必要物質(zhì)之一，可對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂、增殖進(jìn)行促進(jìn)，使血管通透性增加，其水平異常上升可致使ROP風(fēng)險(xiǎn)增大。本次研究對(duì)不同胎齡新生兒、ROP 患兒展開(kāi)VEGF 水平檢測(cè)，結(jié)果顯示：出生第1周、第3周、第5周時(shí)，D組VEGF水平均較A組、B組、C組高，且A組、B組均較C組高，A組較B 組高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），提示與早產(chǎn)兒、足月兒對(duì)比，ROP 患兒VEGF 水平較高，且新生兒胎齡越低，VEGF 水平越高。妊娠后期，胎兒組織器官發(fā)育速度加大，VEGF需維持在較高的水平，胎兒娩出后，其生長(zhǎng)發(fā)育逐漸完善，VEGF水平隨之降低。另外，研究表明，ROP早期階段，在高氧環(huán)境影響下，VEGF生產(chǎn)被抑制，致使視網(wǎng)膜血管無(wú)法正常生長(zhǎng)，無(wú)血管化區(qū)、毛細(xì)血管化區(qū)形成，視網(wǎng)膜組織缺氧，對(duì)病理性VEGF 產(chǎn)生刺激作用，使其表達(dá)上調(diào)，進(jìn)一步促進(jìn)病理性新生血管形成［10］。

同時(shí)，出生第1周、第3周、第5周時(shí)，A組、C組有無(wú)吸氧新生兒VEGF水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；B組吸氧新生兒均較未吸氧者低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），提示＜32周、足月兒有無(wú)吸氧者VEGF水平無(wú)明顯差異，而32～36 周早產(chǎn)兒吸氧新生兒VEGF 水平較未吸氧者低。相關(guān)研究表明，視網(wǎng)膜中VEGF的生成主要通過(guò)氧氣進(jìn)行調(diào)節(jié)［11］。本次研究中，僅32～36周早產(chǎn)兒吸氧、未吸氧者的VEGF 水平存在差異，因此尚無(wú)法證實(shí)吸氧對(duì)血清VEGF的影響作用，且早產(chǎn)兒若合并窒息、貧血、呼吸窘迫綜合征等也可能致使血清VEGF 出現(xiàn)異常表達(dá)。ROP 患兒各糾正胎齡VEGF 水平均較早產(chǎn)兒高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），提示早產(chǎn)兒血清VEGF 水平異常上升可能會(huì)致使ROP 風(fēng)險(xiǎn)增大，對(duì)于早產(chǎn)兒，臨床上可積極予以血清VEGF水平動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，以便于及時(shí)發(fā)現(xiàn)ROP。大量臨床研究認(rèn)為，處于發(fā)病第一階段時(shí)，ROP患兒血清VEGF水平下降，第二階段時(shí)，ROP患兒血清VEGF水平上升［12-13］。ROP最早于糾正胎齡32 周時(shí)出現(xiàn)，早期準(zhǔn)確篩查并予以干預(yù)可使此病的發(fā)展得到有效控制，減輕對(duì)患兒視功能的損害［14］。Vanderveen 等［15］研究發(fā)現(xiàn)，出生后4～6 周，ROP 患兒血清VEGF 水平較無(wú)ROP 的早產(chǎn)兒高，與本文的研究結(jié)果相似，進(jìn)一步表明，ROP 患兒存在血清VEGF 水平異常上升的現(xiàn)象，對(duì)早產(chǎn)兒實(shí)施ROP篩查時(shí)，可予以其血清VEGF檢測(cè)。

綜上所述，相較于無(wú)ROP 的早產(chǎn)兒，ROP 患兒血清VEGF 水平顯著上升，早產(chǎn)兒胎齡越小，VEGF 水平越高，吸氧對(duì)早產(chǎn)兒血清VEGF 水平的影響尚不明確。但此次研究存在樣本量小、未予以長(zhǎng)期隨訪等不足，可能會(huì)致使數(shù)據(jù)離散度增大，致使偏差結(jié)果出現(xiàn)，需展開(kāi)進(jìn)一步研究，以探討早產(chǎn)兒、ROP患兒血清VEGF水平的變化情況及相關(guān)性。

表5 早產(chǎn)兒與ROP患兒相同糾正胎齡VEGF水平比較（，ng/L）

表5 早產(chǎn)兒與ROP患兒相同糾正胎齡VEGF水平比較（，ng/L）

注：括號(hào)內(nèi)為例數(shù)，僅有1 例者未納入t 檢驗(yàn)；經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析得出，F(xiàn)時(shí)間=2.645，P時(shí)間=0.085；F組間=8.574，P組間=0.057；F交互=4.991，P交互=0.076

利益沖突：作者已申明文章無(wú)相關(guān)利益沖突。