孫曉媛，李洪祥，馬培，宋顏君，高宇，許利嘉*，肖培根

1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京 100193；2.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥物研究所，北京 100193；3.中草藥物質(zhì)基礎(chǔ)與資源利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193

藤茶是我國(guó)云南、廣東、廣西、江西、貴州、福建、湖南、湖北等地和東南亞一些國(guó)家常用的傳統(tǒng)飲品[1]，為葡萄科蛇葡萄屬植物顯齒蛇葡萄Ampelopsisgrossedentata(Hand.-Mazz.) W.T.Wang的莖葉[2]。藤茶味甘、淡，性涼，具有清熱利濕、平肝降壓、活血通絡(luò)的功效[3-4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，藤茶具有抗癌、抗炎、抗菌、抗氧化、調(diào)血脂、保肝等多種藥理活性[5]。藤茶在民間應(yīng)用比較廣泛，但臨床研究相對(duì)較少。黃酮類化合物為藤茶的主要活性成分，其中雙氫楊梅素含量最高[6]。所以目前對(duì)于藤茶的研究主要集中在雙氫楊梅素上。藤茶的其他黃酮類成分如楊梅素、楊梅苷等均發(fā)揮多種藥理作用[7]。因此，進(jìn)一步探討藤茶中黃酮類成分的藥理作用，發(fā)掘藤茶治療疾病的潛能對(duì)其研究及開發(fā)尤為重要。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合生物信息學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)等技術(shù)，強(qiáng)調(diào)對(duì)信號(hào)通路多成分、多靶點(diǎn)、多途徑調(diào)節(jié)作用的綜合分析，闡釋中藥及復(fù)方的作用靶點(diǎn)及相關(guān)生物過程和通路[8]。因此，本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，通過對(duì)藤茶黃酮類成分潛在作用靶點(diǎn)及其涉及的生物過程和通路的富集分析，推測(cè)藤茶可能干預(yù)的疾病類型，為藤茶的實(shí)驗(yàn)研究及進(jìn)一步開發(fā)提供參考。

1 資料與方法

1.1 藤茶化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫的建立

以“藤茶”“顯齒蛇葡萄”“the Vine tea”“Ampelopsisgrossedentata”作為關(guān)鍵詞，在CNKI、萬方、PubMed數(shù)據(jù)庫中搜索目前藤茶已經(jīng)分離到的化合物，并在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)(TCMSP)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在線數(shù)據(jù)庫(TCMID)等數(shù)據(jù)庫中檢索復(fù)核。

1.2 基于吸收、分布、代謝、排泄(ADME)的藤茶中黃酮類成分篩選

主要以口服生物利用度(OB)和類藥性(DL)作為基本藥動(dòng)學(xué)參數(shù)指標(biāo)。本研究選取OB≥30%和DL≥0.18作為活性化合物的篩選標(biāo)準(zhǔn)[9]。其中，OB值使用OBioavail 1.1計(jì)算機(jī)模型進(jìn)行計(jì)算，DL值采用谷本相似度進(jìn)行計(jì)算，通過Dragon軟件(http：//www.talete.mi.it/index.htm)計(jì)算。采用ChemDraw軟件繪制活性化合物分子結(jié)構(gòu)式，以MDL SDfile.(*sdf)文件格式保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 潛在作用靶點(diǎn)的識(shí)別與確定

利用PubChem(https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)數(shù)據(jù)庫，收集1.2項(xiàng)下得到的活性成分的CID編號(hào)及其BioAssay Results項(xiàng)下的活性測(cè)試數(shù)據(jù)。在BioAssay Results選項(xiàng)下以cvs格式導(dǎo)出該化合物的生物學(xué)測(cè)試文件，潛在作用靶點(diǎn)納入標(biāo)準(zhǔn)：1)總體活性評(píng)估為“active”“inclusive”或“unspecified”；2)潛在作用靶點(diǎn)的物種來源為human。

1.4 基因本體(GO)生物功能富集分析與京都基因與基因組百科全書(KEGG)通路富集分析

將黃酮類成分的潛在作用靶點(diǎn)利用R語言軟件計(jì)算，得到GO和KEGG富集分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。根據(jù)預(yù)測(cè)結(jié)果，繪制氣泡圖。

1.5 藤茶中黃酮類成分可能干預(yù)疾病的類型分析

基因注釋工具M(jìn)etascape(https：//metascape.org/gp/index.html)整合了大量的轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)等數(shù)據(jù)庫信息。其中DisGeNET數(shù)據(jù)庫，收錄了人類疾病相關(guān)的基因與突變位點(diǎn)信息的數(shù)據(jù)庫[10]。將1.3獲得的潛在作用靶點(diǎn)利用Metascape計(jì)算與人類疾病的相關(guān)性，設(shè)定每條目最少覆蓋3個(gè)基因，最小富集值為1.5，顯著性閾值為0.01，進(jìn)行分析。

1.6 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及其可視化

運(yùn)用Cytoscape 3.6.1軟件構(gòu)建“活性成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)，對(duì)藤茶黃酮類成分的潛在作用靶點(diǎn)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)分析與可視化。這些網(wǎng)絡(luò)由節(jié)點(diǎn)(node)與邊(edge)組成，節(jié)點(diǎn)代表化合物、靶點(diǎn)、信號(hào)通路等，邊表示分子間的相互作用，即節(jié)點(diǎn)之間的鏈接[11]。其中具有定量屬性的參數(shù)度(degree)表示該節(jié)點(diǎn)可以連接其他節(jié)點(diǎn)的個(gè)數(shù)或邊數(shù)，度值越大說明節(jié)點(diǎn)所連接的邊越多，在網(wǎng)絡(luò)中的作用也更大。

2 結(jié)果

2.1 藤茶中黃酮類成分篩選

通過文本挖掘方法及檢索相關(guān)數(shù)據(jù)庫，得到目前藤茶中已分離的化合物136個(gè)。以DL≥0.18、OB≥30%作為活性化合物篩選標(biāo)準(zhǔn)，篩選后得到11個(gè)化合物，分別為雙氫楊梅素、橙皮素、山柰酚、芹菜素、楊梅黃酮-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡糖苷、芹菜素、槲皮素、蘆丁、(2R，3S)-丁烷-1，2，3，4-四醇、1，2，3-三羥基苯。由于藤茶總黃酮為其主要活性部位，本研究進(jìn)一步選取9種黃酮類化合物做后續(xù)分析。藤茶黃酮類成分及其ADME信息見表1。

2.2 藤茶黃酮類成分潛作用靶點(diǎn)分析及注釋

藤茶中9個(gè)黃酮類化合物調(diào)控靶點(diǎn)數(shù)目見圖1，各化合物重合靶點(diǎn)以紫線連接，顯著富集在同一GO、KEGG生物功能條目的靶點(diǎn)被認(rèn)為有生物功能上的重合度(P<0.05)，以藍(lán)線連接，其中楊梅素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷沒有對(duì)應(yīng)的潛在作用靶點(diǎn)。因此，最終得到8個(gè)黃酮類活性成分，對(duì)應(yīng)430個(gè)潛在作用靶點(diǎn)(圖2)。由圖2可知，藤茶黃酮類化合物的潛在作用靶點(diǎn)協(xié)同發(fā)揮藥理作用，體現(xiàn)出藤茶多成分、多靶點(diǎn)的藥理特征。

表1 藤茶黃酮類成分及其ADME信息

圖1 藤茶黃酮類成分潛在作用靶點(diǎn)數(shù)目

注：外圈為藤茶中酮黃類成分；內(nèi)圈為各化合物的潛在作用靶點(diǎn)。圖2 藤茶黃酮類成分潛在作用靶點(diǎn)的相互作用

2.3 生物過程與通路富集分析

基于R軟件分析黃酮類成分的所有潛在作用靶點(diǎn)，GO富集的生物過程(BP)、分子功能(MF)、細(xì)胞成分(CC)結(jié)果見圖3(只展示前10個(gè)最主要的條目)。藤茶黃酮類成分的潛在作用靶點(diǎn)主要在突觸后膜、核染色體、氯離子通道、γ-氨基丁酸(GABA)受體等部位發(fā)揮作用。其分子功能主要有蛋白激酶、絲氨酸/蘇氨酸激酶、轉(zhuǎn)錄因子、核受體、GABA受體配體門控的陰離子通道等活性；靶點(diǎn)所參與的生物過程主要有調(diào)節(jié)蛋白激酶活性、對(duì)氧化應(yīng)激反應(yīng)、轉(zhuǎn)移酶活性的正調(diào)控、對(duì)有毒物質(zhì)的反應(yīng)等。綜合以上GO分析可知，藤茶黃酮類成分的潛在作用靶點(diǎn)所具有的調(diào)節(jié)蛋白激酶、抗炎、抗氧化特征等均與腫瘤、精神類疾病、代謝病等的病理相關(guān)，如乳腺癌[12]、抑郁癥[13]、2型糖尿病[14]等。

為了探索藤茶黃酮類成分所調(diào)控的信號(hào)通路，將所有靶點(diǎn)蛋白映射到 KEGG數(shù)據(jù)庫中獲取相關(guān)信號(hào)通路，結(jié)果見表3(P<0.05)。主要的信號(hào)通路有癌癥通路、內(nèi)分泌抵抗、FoxO信號(hào)通路、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)-糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE)信號(hào)通路、腫瘤壞死因子(TNF)信號(hào)通路、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號(hào)通路等。這些信號(hào)通路已被證實(shí)與腫瘤、精神類疾病、代謝類疾病、神經(jīng)退行性疾病相關(guān)。

2.4 靶點(diǎn)相關(guān)疾病的分析

采用基因注釋工具M(jìn)etascape對(duì)所有黃酮類成分的潛在作用靶點(diǎn)做DisGeNET分析，計(jì)算靶點(diǎn)聚集在每個(gè)疾病條目中的數(shù)目和顯著性，并以-lgP值做熱圖分析，結(jié)果見圖4。排名前20種的疾病主要有腫瘤(乳腺腫瘤、肝腫瘤)、精神疾病(抑郁)、肝病(慢性酒精中毒、藥物不良反應(yīng)、藥物誘導(dǎo)肝損傷、肝纖維化)、心血管病(高血壓、心肌肥大、心肌病、動(dòng)脈粥樣硬化)、腦病(缺血再灌注損傷、腦缺血、阿爾茨海默病)、代謝病(糖尿病、胰島素抵抗、肥胖)、痛覺過敏、腎損傷等。覆蓋總黃酮多數(shù)靶點(diǎn)的主要成分依次是芹菜素、山柰酚、槲皮素、楊梅素和橙皮素。以上結(jié)果與藤茶的傳統(tǒng)功效吻合。藤茶平肝降壓、活血通絡(luò)的功效可能對(duì)肝損傷、心腦血管疾病具有潛在作用。目前藤茶中的多數(shù)活性成分已有報(bào)道，芹菜素可以降低糖尿病大鼠的血糖水平，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力[15]；山柰酚可以通過抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信號(hào)通路，促進(jìn)人乳腺癌SUM190細(xì)胞凋亡，顯示出抗腫瘤活性[16]；雙氫楊梅素在抗癌、抗氧化、保肝等方面有顯著療效，并且對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)病變?nèi)绨柎暮Ｄ?、帕金森癥、抑郁癥等具有神經(jīng)保護(hù)作用[17]。

注：GeneRatio表示富集到目的通路的基因數(shù)占基因列表包含基因集總基因比例；下同。圖3 藤茶黃酮類成分潛在作用靶點(diǎn)GO富集結(jié)果

表3 藤茶黃酮類成分潛在作用靶點(diǎn)KEGG富集結(jié)果

圖4 藤茶黃酮類成分疾病富集結(jié)果

2.5 多層次數(shù)據(jù)整合分析藤茶黃酮類成分的潛在作用靶點(diǎn)及可能干預(yù)疾病

2.5.1成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò) 收集活性成分相關(guān)的DisGeNET中前20個(gè)疾病的靶點(diǎn)蛋白，對(duì)其化合物-靶點(diǎn)進(jìn)行可視化處理(圖5)。成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)由219個(gè)節(jié)點(diǎn)(8個(gè)化合物與211個(gè)靶點(diǎn)蛋白)以及489條邊組成，其中平均度(節(jié)點(diǎn)與其他節(jié)點(diǎn)之間的連接數(shù))每個(gè)化合物為54.3，每個(gè)靶點(diǎn)為2.3。其中4個(gè)化合物可作用于≥50個(gè)靶點(diǎn)(自定義為靶點(diǎn)度K，A8 K=150，A1 K=133，A4 K=76，A7 K=63)，表明這些黃酮類成分是藤茶發(fā)揮治療作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。雙氫楊梅素為藤茶的主要活性成分[7]。目前對(duì)藤茶中活性成分的報(bào)道主要集中在雙氫楊梅素上，但本研究分析結(jié)果未顯示雙氫楊梅素占主導(dǎo)地位，分析原因可能是雙氫楊梅素的活性還未被充分研究與開發(fā)，或者因?yàn)槠渌幮睾?，沒有得到廣泛關(guān)注；而槲皮素、芹菜素、山柰酚、楊梅素在植物中分布廣泛，因此相關(guān)的研究和報(bào)道較多，富集到的靶點(diǎn)較多。

2.5.2靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò) 為探索藤茶黃酮類成分的主要靶點(diǎn)蛋白，將藤茶的靶點(diǎn)蛋白映射到 DisGeNET數(shù)據(jù)庫前20個(gè)相關(guān)疾病，并構(gòu)建了靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)(圖6)。靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)由231個(gè)節(jié)點(diǎn)(211個(gè)靶點(diǎn)與20個(gè)疾病)和568個(gè)邊組成。其中 50%以上的靶蛋白(124/211)可作用于多個(gè)疾病，表明這些靶點(diǎn)蛋白可以參與多種疾病的調(diào)節(jié)。其中按照度值排名前6的靶點(diǎn)為TNF、前列腺素內(nèi)環(huán)氧化物合成酶2(PTGS2)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、雌激素受體1(ESR1)、蛋白激酶B1(AKT1)、腫瘤蛋白P53(TP53)，度值分別為18、15、14、9、8、8。這些靶點(diǎn)可能為藤茶黃酮類成分的主要靶點(diǎn)蛋白。

2.6 成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與分析

由圖6可知，這些靶點(diǎn)蛋白主要與腫瘤、代謝病、神經(jīng)精神類疾病、肝損傷有關(guān)。所以推測(cè)藤茶可能對(duì)這些疾病有改善作用。以乳腺腫瘤和抑郁癥為例，構(gòu)建藤茶黃酮類成分與乳腺腫瘤，藤茶黃酮類成分與抑郁癥的“活性成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)，更好地闡釋藤茶黃酮類成分對(duì)疾病的治療作用。如圖7、8所示，乳腺腫瘤相關(guān)的靶點(diǎn)蛋白主要集中在細(xì)胞凋亡、雌激素信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路等，與抑郁癥相關(guān)的靶點(diǎn)主要集中在多巴胺信號(hào)通路、環(huán)磷酸腺苷(cAMP)信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路等。

注：菱形代表化合物；圓圈代表靶點(diǎn)蛋白。圖5 藤茶黃酮類成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)

注：方形代表疾??；圓圈代表靶點(diǎn)蛋白。圖6 藤茶黃酮類成分靶點(diǎn)蛋白-疾病網(wǎng)絡(luò)

注：紫色代表成分；綠色代表靶點(diǎn)；紅色代表疾病。圖7 藤茶成分-靶點(diǎn)-乳腺腫瘤網(wǎng)絡(luò)

注：黃色代表成分；藍(lán)色代表靶點(diǎn)；紅色代表疾病。圖8 藤茶成分-靶點(diǎn)-抑郁癥網(wǎng)絡(luò)

3 討論

本研究建立了藤茶化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫，使用ADME標(biāo)準(zhǔn)篩選后，最終獲取已有活性報(bào)道的藤茶黃酮類化合物8個(gè)，對(duì)應(yīng)的潛在作用靶點(diǎn)430個(gè)。表明藤茶黃酮類成分通過多成分、多靶點(diǎn)的特性協(xié)同發(fā)揮藥理作用。

通過對(duì)藤茶黃酮類成分的潛在作用靶點(diǎn)進(jìn)行GO和KEGG分析發(fā)現(xiàn)，其主要涉及癌癥通路、內(nèi)分泌抵抗、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等，推測(cè)藤茶黃酮類成分干預(yù)腫瘤、神經(jīng)精神類疾病、肝損傷、代謝類疾病。通過構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)”“靶點(diǎn)-疾病”以及藤茶黃酮類成分與乳腺腫瘤、抑郁癥2個(gè)“活性成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖，進(jìn)一步闡釋藤茶黃酮類成分對(duì)腫瘤、神經(jīng)精神類疾病、肝損傷、代謝類疾病的干預(yù)作用。

乳腺癌是一種雌激素依賴性腫瘤，目前認(rèn)為，雌激素在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中起重要作用，因此內(nèi)分泌治療已經(jīng)成為治療乳腺癌的重要手段之一[18]。由圖7可知，有61個(gè)靶點(diǎn)在藤茶抗乳腺腫瘤中發(fā)揮作用，如度值較大的2個(gè)靶點(diǎn)蛋白ESR1、ESR2。雌激素與雌激素受體(ESR1、ESR2)結(jié)合可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，促進(jìn)惡性腫瘤的形成[19]。網(wǎng)絡(luò)中度值最高的活性成分槲皮素可通過調(diào)節(jié)雌激素代謝基因的表達(dá)，減少高致癌性雌激素代謝物的產(chǎn)生，發(fā)揮對(duì)乳腺癌的治療作用[20]。細(xì)胞凋亡過程的異常與腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切。p53是一種腫瘤抑制基因，通過激活線粒體介導(dǎo)凋亡途徑，激活Caspase和Bcl-2蛋白家族，介導(dǎo)細(xì)胞凋亡[21]。TNF和p53參與對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)。TNF-α與其配體腫瘤壞死因子受體1(TNFR1)結(jié)合后，并召集信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子腫瘤壞死因子受體相關(guān)死亡域蛋白(TRADD)募集，活化TNF受體相關(guān)因子，導(dǎo)致核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)激活，從而抑制TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[22]。研究表明，山柰酚可以通過調(diào)節(jié)TNF介導(dǎo)的信號(hào)通路抑制人卵巢癌細(xì)胞凋亡[23]。上述結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道吻合，因此藤茶黃酮類成分可能通過ESR1、ESR2、p53、TNF等靶點(diǎn)蛋白調(diào)控雌激素信號(hào)通路、p53和TNF信號(hào)通路發(fā)揮抗腫瘤作用。

抑郁被認(rèn)為是與特定大腦區(qū)域內(nèi)神經(jīng)元損傷相關(guān)的神經(jīng)精神疾病。PTGS2又稱環(huán)加氧酶(COX-2)是前列腺素E2(PGE2)合成的限速酶。研究表明COX-2在大鼠抑郁模型的海馬齒狀回(DG)中高度表達(dá)，可引發(fā)神經(jīng)炎癥、氧化應(yīng)激和神經(jīng)細(xì)胞凋亡，造成神經(jīng)細(xì)胞損傷，引起抑郁癥的發(fā)生。抑制COX-2可有效保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，抵抗抑郁癥的發(fā)生[24]。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)的表達(dá)可影響神經(jīng)元的可塑性及神經(jīng)遞質(zhì)的合成，是抑郁癥治療中至關(guān)重要的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子[25]。PI3K和Akt是調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的關(guān)鍵蛋白質(zhì)，在PI3K/Akt信號(hào)通路中至關(guān)重要。在小鼠抑郁模型中觀察到，抑郁癥的發(fā)生可能與PI3K/Akt介導(dǎo)的BDNF表達(dá)水平下降有關(guān)[26]。Akt還參與氧化應(yīng)激，氧化應(yīng)激與神經(jīng)退行性疾病、糖尿病、動(dòng)脈硬化等多種疾病的發(fā)病有關(guān)，研究表明，Akt參與過氧化氫誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞的凋亡過程[27]。TNF-α的增多可激活NF-κB，小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)NF-κB的激活產(chǎn)生大量活性氧、興奮性毒素和促炎性細(xì)胞因子，可能導(dǎo)致神經(jīng)元的凋亡[28]。于旭東等[29]研究表明，在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中，雙氫楊梅素可以發(fā)揮抗抑郁樣作用，并且改善應(yīng)激引起的小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷。槲皮素可以提高H2O2誘導(dǎo)帕金森病PC-12細(xì)胞的存活率，并且使細(xì)胞中乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶顯著降低，說明槲皮素可以抑制由氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的PC-12細(xì)胞的凋亡[30]?；诜治鼋Y(jié)果和實(shí)驗(yàn)研究，提示藤茶黃酮類成分主要通過PTGS2、Akt、TNF等靶點(diǎn)蛋白作用于PI3K/Akt信號(hào)通路、TNF等炎癥與氧化應(yīng)激通路發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，可能對(duì)抑郁癥、帕金森、阿爾茨海默病等有治療作用。但是目前對(duì)藤茶發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道比較少，可以進(jìn)一步開展實(shí)驗(yàn)研究。

肝損傷是多種肝臟疾病的癥狀。在慢性濫用酒精的情況下，細(xì)胞色素酶P450 2E1(CYP2E1)上調(diào)，將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛。CYP2E1產(chǎn)生的活性氧通過激活NF-κB，增加促炎細(xì)胞因子的水平、氧化應(yīng)激水平，導(dǎo)致酒精性肝損傷[31]。芹菜素通過下調(diào)IL-1β、IL-6、TNF-α表達(dá)對(duì)缺血-再灌注損傷大鼠發(fā)揮保肝作用[32]。雙氫楊梅素可以通過抗炎和抗氧化應(yīng)激作用，抑制肝細(xì)胞凋亡來保護(hù)乙酰氨基酚(APAP)損傷的小鼠肝臟[33]。以上結(jié)果說明，藤茶黃酮類成分可能通過CYP2E1、IL-1β、TNF等靶點(diǎn)對(duì)酒精性肝損傷、缺血-再灌注肝損傷具有治療作用。

糖尿病是一種以血糖升高為主要癥狀的代謝類疾病。2型糖尿病主要與胰島素抵抗有關(guān)。PI3K/Akt通路屬于胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中重要通路之一。正常生理狀況下，胰島素與受體結(jié)合后可通過活化PI3K/Akt信號(hào)通路啟動(dòng)胰島素通路，維持血糖平衡、脂類代謝，當(dāng)胰島素分泌不足后，PI3K/Akt信號(hào)通路受到抑制，會(huì)導(dǎo)致血糖、血脂代謝紊亂，進(jìn)一步促進(jìn)胰島素抵抗，導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生[34]。吳瑛等[35]研究表明，藤茶提取物雙氫楊梅素可通過上調(diào)p-Akt、成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21)、磷酸化的AMP依賴的蛋白激酶(p-AMPK)的表達(dá)從而改善2型糖尿病大鼠的胰島素抵抗。芹菜素能夠改善大鼠血糖、血脂，降低胰島素抵抗，其機(jī)制可能與激活PI3K/Akt信號(hào)通路有關(guān)[34]。以上文獻(xiàn)報(bào)道證實(shí)了藤茶黃酮類成分可能通過PI3K、Akt作用于PI3K/Akt信號(hào)通路發(fā)揮降血糖作用。

藤茶最初在民間被作為茶飲廣泛應(yīng)用，久而久之也顯示出藥用價(jià)值。民間多用藤茶治療咽喉腫痛、喉舌生瘡等疾病。這些疾病大都與炎癥的發(fā)生有關(guān)，同時(shí)民間也用藤茶解酒毒、治療糖尿病等[1-2]。這也與藤茶抗氧化、保肝、降血糖、調(diào)血脂等藥理作用相吻合。本研究通過對(duì)潛在作用靶點(diǎn)的富集分析，推測(cè)藤茶對(duì)腫瘤、神經(jīng)精神類疾病、肝損傷、代謝類疾病具有治療作用(表4)。

表4 藤茶傳統(tǒng)應(yīng)用、現(xiàn)代應(yīng)用及本文預(yù)測(cè)應(yīng)用

綜上所述，藤茶黃酮類成分通過TNF、PTGS2、IL-1β、ESR1、AKT1、TP53等關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白，參與調(diào)節(jié)蛋白激酶活性、氧化應(yīng)激、炎癥、雌激素信號(hào)通路等，推測(cè)對(duì)腫瘤、神經(jīng)精神類疾病、肝損傷、代謝類疾病具有治療作用。此外，藤茶對(duì)神經(jīng)精神類疾病的潛在作用報(bào)道較少，可以進(jìn)一步研究和開發(fā)。