任天鳳

異常Hb 病是因珠蛋白肽鏈異常合成或異常Hb 分子結構所引起的血液疾病,有遺傳性質,可通過染色體進行遺傳,目前已發(fā)現的類型有700 多種,約30%的患者存在Hb 功能的異常,從而出現各種不同程度的癥狀［1-3］。我國廣東、云貴川等地是該疾病的高發(fā)地區(qū),對育齡期人群進行異常Hb 病的篩查可提高優(yōu)生優(yōu)育工作的質量［4-6］,基于此,本文回顧性分析了近2 年本地區(qū)13249 例育齡期人群的篩查結果,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2019 年1 月～2020 年10 月在本院進行Hb 電泳篩查及地中海貧血基因診斷的婚育人群共13249例,其中男6124例,年齡18～55歲；女7125 例,年齡18～48 歲。其中異常Hb 病確診75 例。納入標準［7］：所有研究對象均進行Hb 電泳篩查提示有異常變異體區(qū)帶。所有研究對象均簽署知情書。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所有研究對象空腹抽取兩支2 ml EDTA-K2 抗凝劑的靜脈血,一支標本用于Hb 電泳的檢測,另一支用于α 地中海貧血及β 地中海貧血基因診斷分析及珠蛋白測序。

1.2.2 儀器與試劑 樣本全血中血紅蛋白A2(HbA2)的含量測定以sebia Caplillarys2 全自動毛細管血紅蛋白電泳儀及配套試劑進行。α 及β 地中海貧血基因型的檢測選用杭州博日科技有限公司TC-96/G/H(b)基因擴增儀、廣東凱普生物科技股份有限公司HB-2012A醫(yī)用核酸分子雜交儀及配套試劑進行檢測。若Hb 電泳檢測提示有異常Hb 區(qū)帶,則將樣本送至凱普公司進行進一步的珠蛋白基因序列測定。

1.2.3 α 地中海貧血檢測范圍 α 地中海貧血基因的常規(guī)檢測選擇多聚酶鏈式反應(PCR)電泳法和PCR反向斑點雜交法,主要針對我國居民最為常見的3 種缺失型α 地中海貧血進行檢測,即-α3.7、-α4.2以及--SEA,同時針對我國居民最為常見的3 種突變型α地中海貧血進行檢測,即CS、QS 以及WS。

1.2.4 β 地中海貧血檢測范圍 β 地中海貧血基因的常規(guī)檢測選擇PCR 反向斑點雜交法和導流雜交法進行,主要對17 個位點的19 種突變情況進行檢測,具體包括：CD41-42、CD43、IVS-Ⅱ-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVS-Ⅰ-1、CD27/28、IVS-Ⅰ-5、Cap、Int、CD31、-30、-32。

1.2.5 珠蛋白基因序列測定 采用PCR 方法對α1珠蛋白基因、α2珠蛋白基因以及β 珠蛋白基因進行擴增后再進行測定。

1.3 觀察指標 統(tǒng)計異常Hb 病篩查結果。

2 結果

13249 例婚育人群中,其中確診為異常Hb 病攜帶者75 例。本地區(qū)異常Hb 病攜帶率為0.566%(75/13249)。其中異常Hb 基因型為α 鏈的共12 例,6 例為Hb Q-Thailand,1 例為Hb Wexham,1 例為Hb Handsworth,1 例為HBA1∶C.343 C＞G(異常區(qū)帶在Z11),1 例為HBA1∶C.49A＞C(異常區(qū)帶在Z12),1 例為HBA2∶C.91G＞C(異常區(qū)帶在Z6),1 例為αα/αααanti4.2(異常區(qū)帶在Z1)；異常Hb 基因型為β鏈的共有63 例,48 例為Hb E,2 例為Hb J-Bangkok,1 例為HBB∶C.113G＞A(異常區(qū)帶在Z3),5 例為Hb NewYork,2 例為Southeast Asian thalassaemia,5 例為Chinese (Aγδβ)0 thalassaemia。見表1。

表1 75 例廣東信宜地區(qū)異常Hb 病篩查結果(n,%)

3 討論

異常Hb 病是臨床常見疾病,是因遺傳缺陷所導致珠蛋白肽鏈在合成或是結構上出現異常,引起一種或一種以上異常結構Hb,并或多或少的代替了正常的Hb,進而致病,該疾病可經染色體進行遺傳,并為顯性遺傳,即母親或父親任意一方或是雙方患有此病,則孩子的患病率為50%～100%。目前,臨床范圍內已發(fā)現異常Hb 病400 余種以及100 余種珠蛋白生成障礙性貧血疾病,但僅少數患者表現出病態(tài)［8］。臨床上常見的異常Hb 病主要包括以下4 種：①不穩(wěn)定Hb；②氧親和力增高Hb；家族性紫紺癥(Hb M)；④鐮狀細胞綜合征(Hb S 病)。

超過90%的異常Hb 病是因單個氨基酸被其他氨基酸替代所致,其余患者為較為少見的雙氨基酸缺失、插入、被替代,或是鏈融合、鏈延伸所致。肽鏈結構發(fā)生改變可對Hb 的理化性質及功能造成影響,任一珠蛋白鏈均可出現結構異常的情況,但其中最為常見的是β 珠蛋白鏈,基因變異是異常Hb 病蛋白表型的基礎。世界衛(wèi)生組織(WHO)估計,在全球范圍內超過1 億人存在異常Hb 病的基因,我國調查顯示,異常Hb病在我國的發(fā)生率約為0.337%,在幾十個民族群體中均有發(fā)?。?］。

異常Hb 病是一種珠蛋白肽鏈結構異常而引起的一種疾病,因此盡早進行篩查可促進優(yōu)生優(yōu)育工作的開展［10］。本次研究采用毛細管電泳技術對13249 例育齡期人群進行異常Hb 病的篩查,共篩查出75 例患者,檢出率為0.566%,較廣州地區(qū)報道的1.14%明顯更低,但高于深圳地區(qū)報道的0.405%,且較我國平均發(fā)病率0.337%明顯更高。信宜地區(qū)主要常見的異常Hb占比排序依次為Hb E(64%)、Hb Q-Thailand(8%)、Hb NewYork(6.6%)、Hb J-Bangkok(2.6%)。

異常Hb 分型中,本次統(tǒng)計發(fā)現,信宜地區(qū)α 鏈異常Hb 基因型以Hb Q-Thailand 為主,占比為8%,另外發(fā)現3 例未命名的α 鏈異常Hb。Hb Q-Thailand 的發(fā)生是因為α 珠蛋白肽鏈中α1基因的第74 位密碼子發(fā)生突變(由GAC 變至CAC)所引起的,該分型的出現與缺失型α 地中海貧血中缺失-α4.2有關。單純Hb Q-Thailand 雜合子時患者Hb 濃度處于正常水平,如Hb Q-Thailand 合并缺失型α 地中海貧血時,其Hb濃度會出現不同程度的降低。β 鏈異常Hb 基因型以Hb E 數量最多,共48 例,占比為64%,發(fā)生率為0.36%(48/13249),這與深圳、廣州以及貴州地區(qū)篩查的數據相差不大,但較廣州地區(qū)占比(76.12%)明顯更低,這是因為有研究指出在異常Hb 病的分布中Hb E 型主要分布于我國南方地區(qū)［11］。其病理基礎是因賴氨酸替代了珠蛋白β 鏈中第26 位的谷氨酸,進而引發(fā)一種緩慢進程的異常Hb 疾病。Hb E 合并缺失型α 地中海貧血時HbA2 水平處于正常水平,但患者Hb 濃度也出現一定程度的降低［12］。Hb NewYork、Hb J-Bangkok 是因珠蛋白基因發(fā)生點突變,造成β-珠蛋白鏈上氨基酸的變化,進而對Hb 的正常功能、性質造成影響,進而引起此兩種分型的異常Hb 病。另外發(fā)現1 例未命名的β 鏈異常Hb,2 例Southeast Asian 罕見型地中海貧血,5 例Chinese (Aγδβ)0罕見型地中海貧血?？梢娦乓说貐^(qū)異常Hb 病種類多,應引起重視［13］。

綜上所述,本地區(qū)異常Hb 病攜帶率為0.566%,雖低于南方廣州地區(qū),但明顯高出我國平均水平,此次共檢出異常Hb 病12 種,其中占比最高的為Hb E,占比為64%,其次為Hb Q-Thailand、Hb NewYork、Hb J-Bangkok 等類型。異常Hb 個別異常Hb 變異體如合并輕型或中間型地中海貧血,臨床表型可能會出現中重度貧血,或育齡夫婦如共同患有同種異常Hb,那么將有可能生出雙重珠蛋白鏈結構異常的貧血孩子。在異常Hb 病的篩查中,單一的血細胞分析的篩查效果不佳,而以Hb 電泳的手段,可有效進行異常Hb 病的篩查,指導婚育人群遺傳咨詢,可顯著提高我國人口的綜合素質,因此應用及推廣價值高。