于新友，畢寧寧，李天芝，李書光，肖躍強(qiáng)，劉吉山*

(1.山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600；2.山東省濱州市濱城區(qū)行政審批服務(wù)局，山東 濱州 256600；3.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東 濱州 256600)

牛結(jié)節(jié)性皮膚病(Lumpy skin disease，LSD)又稱牛結(jié)節(jié)疹或牛疙瘩皮膚病，是由牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒(LSDV)引起的一種牛急性、亞急性病毒性傳染病。臨床表現(xiàn)主要為發(fā)熱，皮膚出現(xiàn)結(jié)節(jié)，母牛流產(chǎn)、產(chǎn)奶量下降，公牛不育[1]。此外，還可致牛和其產(chǎn)品出口受阻及高額的疾病防控成本，給養(yǎng)牛業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。牛是LSDV的天然宿主，各年齡和品種牛均易感，無特異性治療方法。不是人獸共患病[2]。該病有明顯的季節(jié)性特征，常見于吸血節(jié)肢動物繁殖旺盛的夏、秋季節(jié)。世界動物衛(wèi)生組織將其列為必須報告的動物傳染病，我國將其列為二類動物疫病[3]。1929年，贊比亞首次報道該病[4]，后傳入中東、東歐、中亞等世界其它地區(qū)。2019年8月12日，我國新疆哈薩克自治州首次確診該病存在[5]，隨后福建、安徽、浙江等均有相關(guān)報道。LSDV只有一個血清型，不同毒株的毒力不同。本文對牛結(jié)節(jié)性皮膚病的病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床癥狀及病理變化、診斷、防控措施等方面進(jìn)行了較全而的闡述，以期為該病的診斷和防控工作提供參考。

1 病原學(xué)

LSDV屬于痘病毒科羊痘病毒屬[6]。病毒粒子有無囊膜，呈磚塊狀或橢圓形，直徑約為260～320 nm。病毒基因組為雙鏈DNA，與綿羊痘病毒基因組的同源性高達(dá)96%，大小約151 kb，由156個假定基因組成[7]。病毒只有一種血清型[8]，同綿羊痘病毒和山羊痘病毒間存在一定交叉免疫保護(hù)性。

病毒對外界環(huán)境抵抗力強(qiáng)，尤其在寒冷干燥冬季，可存活較長時間。痂皮中及壞死皮膚結(jié)節(jié)中病毒可存活1個月左右，37 ℃條件下5 d內(nèi)病毒滴度幾乎不變，55 ℃ 2 h或65 ℃ 30 min病毒可被殺活，陽光直射下病毒很快被紫外線殺滅。4℃下組織中病毒可存活6個月，病毒最適存活pH范圍為6.6～8.6[9]，對強(qiáng)酸和強(qiáng)堿耐受性低，對含脂溶劑和去污劑敏感，乙醚、氯仿、十二烷基硫酸鈉均能有效滅活病毒，常規(guī)消毒劑1%甲醛、2%氫氧化鈉、0.5%季按鹽、2%苯酚、2%～3%次氯酸鈉可迅速滅活裸露病毒，脫落伽皮中病毒很難被殺滅[10]。在陰暗潮濕環(huán)境中病毒可存活數(shù)月。

病毒可用羔羊和犢牛腎上腺細(xì)胞、睪丸細(xì)胞等原代細(xì)胞培養(yǎng)，也可在倉鼠腎細(xì)胞、牛腎細(xì)胞等傳代細(xì)胞培養(yǎng)，主要在細(xì)胞漿內(nèi)生長繁殖，病變產(chǎn)生慢，通常在接種后10 d出現(xiàn)。病毒可雞胚培養(yǎng)，經(jīng)絨毛尿囊膜途徑，產(chǎn)生痘斑，但不致死雞胚。該病毒超聲波破壞細(xì)胞后，可釋放病毒到細(xì)胞外。

2 流行病學(xué)

LSDV主要感染牛，各品種和日齡牛均易感，奶牛易感性高， 除牛外，家兔、綿羊、山羊、長頸鹿和黑羚羊等均可感染[11]，尚無人感染病例。該病潛伏期為2～5周，一般為28 d。該病一年四季均可發(fā)生，6～9月份高溫、多雨季節(jié)為疾病高發(fā)期，多為散發(fā)。發(fā)病率在2%～45%，死亡率不超過10%，病牛病毒血癥可持續(xù)12 d，康復(fù)后可獲得終生免疫，血液可帶毒3周以上，公牛感染后精液排毒長達(dá)5個月。病毒隨病牛唾液、眼鼻分泌物、乳汁、精液、脫落伽皮等排出體外，污染周圍環(huán)境及飼草、飲水等，通過消化道感染其它健康牛，也可通過蚊、蠅等吸血昆蟲叮咬傳播或污染的針頭機(jī)械傳播，還可以通過胎盤垂直傳播。因痂皮內(nèi)病毒很難殺滅，養(yǎng)殖場一旦爆發(fā)該病后，撲殺病牛，再次引入無免疫力牛時，半個月內(nèi)很容易再次發(fā)病。

3 臨床癥狀及病理變化

患病牛臨床表現(xiàn)與個體狀況和感染病毒毒株和劑量有關(guān)，臨床表現(xiàn)通常為病牛精神沉郁、食欲減退，消瘦，呼吸困難，口腔有潰瘍灶，流涎，眼鼻分泌物增加，流血性或膿性鼻涕，鼻鏡干燥，眼角膜發(fā)生疼痛性潰瘍病變，嚴(yán)重時導(dǎo)致失明，不愛運動，淺表淋巴結(jié)尤其是肩胛下淋巴結(jié)和股前淋巴結(jié)腫大。四肢及乳房部位水腫，體溫升高至41 ℃以上，呈持續(xù)稽留熱型。體溫升高48 h后，病牛體表頭頸部、乳房、外陰等皮膚出現(xiàn)直徑1～5 cm結(jié)節(jié)，7 d后結(jié)節(jié)明顯，小結(jié)節(jié)可自動消失，大結(jié)節(jié)破潰后可反復(fù)結(jié)痂，一般一月左右可恢復(fù)，個別病例會在皮膚上留下永久性疤痕。奶牛產(chǎn)奶量下降， 母牛出現(xiàn)流產(chǎn)，發(fā)情延遲等，公牛出現(xiàn)暫時或永久性不育。

剖檢可見牛口腔及消化道黏膜出現(xiàn)潰瘍和糜爛，心肌充血、出血，心臟腫大，肝臟腫大，邊緣鈍圓，膽囊腫大3倍，外表有出血點，氣管內(nèi)有黏液，肺臟出血、腫大，胃腸黏膜出血，腎臟表面有出血點，淋巴結(jié)出血、腫大，周圍呈膠凍樣浸潤。

4 診斷

根據(jù)流行情況、臨床癥狀及特征性病變可作出初步診斷，需要注意的是，得和一些類似的疾病做出鑒別診斷，如牛偽結(jié)節(jié)性皮膚病、嗜皮菌病，牛皮蠅感染，蚊蟲叮咬、蕁麻疹，牛丘疹性口炎。牛偽結(jié)節(jié)性皮膚病的結(jié)節(jié)主要是淺表性結(jié)節(jié)，臨床表現(xiàn)一般較溫和，病程短、病變輕微，癥狀與結(jié)節(jié)性型皮膚病早期癥狀類似。嗜皮菌病由剛果嗜皮菌感染引起，潛伏期2～7天，早期病變?yōu)闇\表性非潰瘍性表面結(jié)構(gòu)。精神、食欲基本正常，一般1周內(nèi)可自愈。牛皮蠅感染由牛皮蠅幼蟲引起的疾病，可引起牛消瘦，產(chǎn)奶量下降，病牛瘙癢，恐懼不安和局部疼痛，影響牛的休息和采食在牛背部皮下可摸到長圓形的結(jié)節(jié)，皮膚上有小孔，結(jié)締組織囊內(nèi)可見幼蟲。蚊蟲叮咬和蕁麻疹皮膚病變與LSD相似，但病變更淺、病程較短、病情較輕。牛丘疹性口炎病變僅發(fā)生在口腔黏膜。

如要進(jìn)行確診，最好采用實驗室檢測方法進(jìn)行確診，常用的實驗室檢測方法有病毒分離鑒定、透射電鏡觀察、瓊脂擴(kuò)散試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、分子生物學(xué)檢測方法等。病毒分離時可選取肺、脾、淋巴結(jié)等組織或皮膚結(jié)痂等樣品，樣品與生理鹽水比例為1∶ 5研磨成混懸液，反復(fù)凍融3次，充分釋放病毒，12 000 r/min離心3 min，取上清液0.22 μm濾器過濾除菌，接種易感細(xì)胞，出現(xiàn)細(xì)胞病變后用間接免疫熒光試驗進(jìn)行鑒定，也可用電鏡觀察病毒粒子特征。病毒分離耗時長，成本高。在疾病暴發(fā)期間，可用瓊脂擴(kuò)散試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗等檢測機(jī)體情況進(jìn)行診斷，而在疾病安靜期，很難通過血清學(xué)監(jiān)測動物群狀況，因此時以細(xì)胞免疫為主，并且當(dāng)前可用的血清學(xué)檢測敏感性低。分子生物學(xué)檢測尤其是熒光PCR檢測是當(dāng)前病原臨床快速檢測的方法，已經(jīng)廣泛用于各種疾病快速檢測，應(yīng)用效果好，科研工作者已經(jīng)開發(fā)出牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒熒光PCR檢測試劑盒，檢測時病料可選取皮膚結(jié)痂、唾液、鼻拭子、抗凝血等，樣品要新鮮，及時送達(dá)實驗室。

5 防控措施

對該病目前尚無有效的治療措施，主要以疫苗接種免疫預(yù)防為主，國內(nèi)無商品化LSDV疫苗，但可用山羊痘弱毒疫苗代替進(jìn)行預(yù)防控制，一般5只份羊痘疫苗，皮內(nèi)注射，一年一次，一旦從外地調(diào)牛，要盡快防疫羊痘疫苗。不從疫區(qū)引種，引種后要做好牛群隔離和檢疫工作，隔離30 d，檢驗合格后才能混群飼養(yǎng)。提升牛場生物安全水平，禁止外來無關(guān)訪客進(jìn)場，如確需要進(jìn)場者，至少隔離24小時后再進(jìn)入。人員做好登記和消毒工作。場區(qū)門口設(shè)消毒池，消毒藥定期更換，無關(guān)車輛不許進(jìn)入場區(qū)。加強(qiáng)牛群飼養(yǎng)管理，飼喂優(yōu)質(zhì)營養(yǎng)全價飼料，保證牛只蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素等攝入充足，禁止飼喂霉變飼料，飲用清潔干凈飲水[12]。禁止牛場內(nèi)飼養(yǎng)貓、狗等其他動物，不同日齡牛群不要混養(yǎng)。開展滅蚊、蠅工作，消滅場內(nèi)傳播該病的其他吸血昆蟲及幼蟲，清理節(jié)肢昆蟲易滋生的環(huán)境。場內(nèi)做好防鼠措施，定期請專業(yè)人士開展滅鼠工作。場區(qū)內(nèi)外及周邊環(huán)境定期清理和消毒，減少環(huán)境中病原微生物含量，降低牛場感染率。牛舍以及周圍環(huán)境要定期進(jìn)行消毒，尤其是在發(fā)病高峰期或者存在疫情威脅的情況下，要增加消毒次數(shù)，且要注意定期更換消毒液的種類[13]。養(yǎng)殖生產(chǎn)一線人員定期做好相關(guān)培訓(xùn)，發(fā)現(xiàn)疑似病例后盡快診斷，及早上報。

牛場發(fā)病后，限制牛群移動，牛群全面監(jiān)察排查。挑選病牛并隔離，同時對舍內(nèi)及周圍環(huán)境、器具等進(jìn)行全面消毒，健康牛緊急接種10倍劑量的山羊痘病毒活疫苗皮內(nèi)緊急接種免疫。上報上級獸醫(yī)主管部門，按要求實行區(qū)域封鎖和管制。病牛按規(guī)定撲殺，并進(jìn)行焚燒活深埋等無害化處理。牛場環(huán)境全面徹底消毒。