韓竹平，王永茂

（貴州省綏陽縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州綏陽 563301）

在我國生豬飼養(yǎng)行業(yè)中，容易引起仔豬腹瀉的病毒性病原，是十分復雜多樣的，其中包含了豬細小病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬德塔冠狀病毒、豬偽狂犬病病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬輪狀病毒以及豬圓環(huán)病毒等，這些流行性腹瀉病毒感染仔豬后，所造成的病理變化以及臨床癥狀都是十分相似的。同時，需要注意的是，使用傳統(tǒng)的臨床診斷方法是無法對這些變異性病毒進行確診的，對于相關疾病的預防也不夠及時。伴隨著生物技術的迅速發(fā)展，豬場以及相關工作人員一定要加強對于豬流行性腹瀉病毒變異株引起仔豬腹瀉的防控，進而減少經(jīng)濟損失。

2020年10月初，某養(yǎng)殖場內(nèi)的仔豬爆發(fā)腹瀉疫情，臨床癥狀表現(xiàn)為極度消瘦、持續(xù)性嘔吐、腹瀉。排便呈黃色，后期呈黑色，死亡率極高。依據(jù)仔豬表現(xiàn)出的臨床特征，并對仔豬的小腸組織樣品進行采集實驗診斷后顯示，該疫情的爆發(fā)是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）變異株感染所引起的，關于該疾病的診斷以及治療過程筆者將分點來闡釋。

1 發(fā)病情況及病情介紹

1.1 發(fā)病情況

某養(yǎng)殖場內(nèi)存欄母豬50 頭左右，在2020年10月初，部分欄舍仔豬出現(xiàn)了水樣腹瀉、嘔吐、食欲差等臨床癥狀，在當時，養(yǎng)殖戶認為是細菌感染造成的相關疾病產(chǎn)生，因而使用了恩羅沙星這種抗菌藥物進行了治療，但是，起到的效果并不明顯，且在10日齡內(nèi)的仔豬死亡率達到90%以上[1]。且經(jīng)過筆者的調查了解，發(fā)現(xiàn)在該養(yǎng)殖場內(nèi)，其他發(fā)育階段的豬群并未表現(xiàn)出相關的臨床癥狀，這就說明在該養(yǎng)殖場內(nèi)并不存在繁殖障礙性傳染病，如豬繁殖與呼吸綜合征或豬偽狂犬病等。

1.2 病情介紹

1.2.1 臨床癥狀和病理變化

發(fā)病豬群中，保育豬及仔豬所占比例較大，在發(fā)病時表現(xiàn)出脫水、腹瀉、畏寒以及消瘦等癥狀，在產(chǎn)床上仔豬的水樣糞便以及嘔吐物也較為常見。而相關工作人員通過對于瀕臨死亡或已經(jīng)死亡的仔豬進行病理性解剖發(fā)現(xiàn)，仔豬出現(xiàn)了如腸內(nèi)有未消化的凝乳塊、腸壁變薄等明顯的病理性變化，但是這些變化主要體現(xiàn)在腸道上，其他的臟器并沒有明顯臨床癥狀的體現(xiàn)。通過對養(yǎng)殖場內(nèi)豬群的臨床癥狀、病理變化以及發(fā)病特點等進行觀察可以初步判定，在該養(yǎng)殖場內(nèi)部爆發(fā)的腹瀉病可能由于傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒、流行性腹瀉病毒等導致的[2]。為了進一步確認養(yǎng)殖場內(nèi)暴發(fā)疾病的真正原因，養(yǎng)殖場內(nèi)的相關工作人員將腹瀉仔豬送至當?shù)啬侈r(nóng)業(yè)大學的動物醫(yī)學實驗室進行了病原性診斷。

1.2.2 實驗室病原診斷

在該動物實驗室內(nèi)，將發(fā)病仔豬進行了無菌解剖，將發(fā)病仔豬的小腸內(nèi)容物放入到無菌試管中，加入適量的PBS 滅菌溶液進行充分混合，在混合均勻后，進行反復3 次的凍融，然后進行4℃的高速離心（13 000 r/min）5 min，取上清液，依照試劑盒的說明進行DNA 以及RNA 的提取，在經(jīng)過逆轉錄入后得到cDNA（互補脫氧核糖核酸）。最后再將RT-PCR（逆轉錄-聚合酶鏈反應）進行應用，對樣品進行病原檢測發(fā)現(xiàn)，檢測結果為PEDV（豬流行性腹瀉病毒）陽性，而關于PRoV（豬輪狀病毒）以及TGEV（豬傳染性胃腸炎病毒）的檢測則呈現(xiàn)陰性。為了進一步確認養(yǎng)殖場內(nèi)的PEDV（豬流行性腹瀉病毒）病毒是否是變異毒株，實驗室的工作人員挑選了1 個樣品，將這個樣品中的S1 基因高變區(qū)序列進行了測序和擴增，同時，把獲得的序列進行了Blast（同源性分析）分析。分析結果顯示，擴增后的PEDV（豬流行性腹瀉病毒）毒株，它的S1 基因部分片段大小為1503 bp。Blast（同源性分析）分析顯示，擴增后的PEDV（豬流行性腹瀉病毒）毒株與GenBank 中收錄的變異株，相似度達到97.2%到99.7%左右，而和PEDV CV777 疫苗株的同源性較低，僅有93%左右，這種結果的出現(xiàn)正說明了該養(yǎng)殖場內(nèi)流行的PEDV（豬流行性腹瀉病毒）毒株是變異株，養(yǎng)殖場內(nèi)的工作人員一定要對該毒株的防控與治療進行及時的重視，進而開展相關的技術研究工作。

2 治療與防控

2.1 及時接種疫苗

經(jīng)過Blast（同源性分析）分析可以得出，在該養(yǎng)殖場內(nèi)部的仔豬腹瀉是由于感染了PEDV（豬流行性腹瀉病毒）變異株所引起的，要有針對性的采取緊急措施進行處理，進而將豬群的死亡率進行進一步降低，以減少和挽回養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟損失[3]。疫苗接種的迅速開展是十分重要的，在該養(yǎng)殖場內(nèi)部給豬群接種的免疫腹瀉疫苗為腹瀉三聯(lián)活疫苗，而PEDV（豬流行性腹瀉病毒）疫苗株的來源是CV777毒株。但是，需要注意的是，當前該養(yǎng)殖場內(nèi)部爆發(fā)的是PEDV（豬流行性腹瀉病毒）變異株，這就說明CV777 疫苗株對于變異株的限制以及對于豬群的保護是十分有限的。而如果在這個時候，豬群繼發(fā)其他類型的免疫抑制性疾病，就會使相關疫苗的接種效果較差，甚至會產(chǎn)生豬群在接種CV777 疫苗株后，仍然出現(xiàn)爆發(fā)PED （豬流行性腹瀉）的現(xiàn)象。

因此，針對這種情況，明顯采用傳統(tǒng)的CV777疫苗株是不可行的，所以，養(yǎng)殖場內(nèi)采用了由武漢科前生物股份有限公司研發(fā)生產(chǎn)，專門針對PEDV（豬流行性腹瀉病毒）變異株的兩種疫苗，即科腹凈（豬傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)弱毒疫苗）以及科瀉寧（豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗）。這兩種疫苗經(jīng)過臨床實驗顯示，對于PEDV（豬流行性腹瀉病毒）變異株的防治有良好的效果，具體的免疫防控措施，要及時參考疫苗生產(chǎn)廠家的建議，以便于促進后續(xù)工作的進行。

2.2 落實防控措施

養(yǎng)殖場要將相應防控措施進行貫徹落實，要及時對已經(jīng)無法挽回和救治的發(fā)病豬群進行撲殺，然后進行無害化處理。同時，要將健康豬群與發(fā)病豬群進行隔離處置，并且要及時進行免疫疫苗的注射。隨后要對整個養(yǎng)殖場進行衛(wèi)生與消殺處理，采用不同類型的消毒機進行消毒制劑的拌和，及時對養(yǎng)殖器具、豬舍地面墻面、運輸車、墊料等定期地進行消殺工作的開展。此外還要注意及時對養(yǎng)殖場內(nèi)所有的飲水與飼料進行病原檢測，在確保沒有PEDV（豬流行性腹瀉病毒）感染后，再進行豬群的投飲和飼喂。在進行投飲和飼喂的過程中，可以在飲用水中放入適量的食鹽或者多維，進而防治豬群因腹瀉脫水而亡，也能夠促進養(yǎng)殖場內(nèi)豬群免疫力的進一步提升。而在飼料中進行適量阿莫西林類抗生素的拌入，也有助于防治繼發(fā)細菌感染的產(chǎn)生。

該養(yǎng)殖場在將以上的防控治療措施進行充分落實后，回訪發(fā)現(xiàn)該養(yǎng)殖場內(nèi)的PED （豬流行性腹瀉）的現(xiàn)象明顯出現(xiàn)了改善，豬群中仔豬的感染率、發(fā)病率以及死亡率均呈現(xiàn)大幅下降的趨勢[4]。1 個月后，該養(yǎng)殖場的負責人表示在養(yǎng)殖場內(nèi)，豬群出現(xiàn)腹瀉、嘔吐的情況明顯變少，即便出現(xiàn)腹瀉，一般也是由于細菌感染造成的，與PEDV（豬流行性腹瀉病毒）并無關聯(lián)。

3 結束語

養(yǎng)殖戶在進行生豬養(yǎng)殖的過程中，仔豬其實是極易出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉等情況的，這些臨床癥狀在產(chǎn)生時，如果養(yǎng)殖人員沒有進行及時的重視、干預與治療，疾病就會迅速蔓延至整個仔豬群中，進而造成仔豬死亡率的上升。而導致仔豬產(chǎn)生腹瀉的原因是比較多的，如病毒感染、細菌感染等都會誘發(fā)此類癥狀。但是，大部分情況下，都是由于病原性感染所導致的，其中尤以病毒性感染最為常見，而其中能夠導致仔豬腹瀉的病毒多為PEDV（豬流行性腹瀉病毒）的感染。仔豬腹瀉在我國的養(yǎng)殖戶中分布是較為廣泛的，危害性也是極強的。我國在2010年將PEDV（豬流行性腹瀉病毒）變異株從暴發(fā)豬流行性腹瀉的養(yǎng)殖場中進行了分離，它的基因序列與傳統(tǒng)的PEDV CV777 疫苗株存在著明顯的不同，使得即使接種了疫苗，養(yǎng)殖場內(nèi)部仍然會爆發(fā)流行性腹瀉，十分不利于養(yǎng)殖行業(yè)的發(fā)展。因此，為有效防治豬流行性腹瀉的產(chǎn)生，養(yǎng)殖場可以選擇專門針對PEDV 變異株進行研發(fā)生產(chǎn)的疫苗進行免疫接種，以減少養(yǎng)殖場的損失。