川崎?。↘awasaki disease）是一種以全身血管炎為主要病變的急性自限性發(fā)熱性疾病，主要累及中小動脈，尤其是冠狀動脈，多發(fā)于5歲以下兒童，常見并發(fā)癥為冠狀動脈病變（Coronary arteries lesions，CAL），包括冠狀動脈擴張（Coronary arteries dilation，CAD）或冠狀動脈瘤（Coronary arteries aneurysm，CAA），后期則可發(fā)生冠狀動脈狹窄或血栓，甚至發(fā)生心肌梗死。目前，川崎病已取代風濕熱，成為兒童后天性心臟病的首位病因?？箖绕ぜ毎贵w（anti-endothelial cell antibody，AECA）是存在于循環(huán)中的一組異質性自身抗體，與炎癥介導的血管壁損傷相關的多種自身免疫病的發(fā)生、發(fā)展及預后轉歸密切相關。近年來，關于AECA在川崎病中的臨床意義的研究并未得到廣泛深入的開展，鑒于研究樣本大小及檢測方法不同，國內外文獻報道對此存在較大分歧。本研究采用間接免疫熒光法（indirect immunofluorescence analysis，IIF）檢測川崎病病兒外周血中IgG型AECA（IgG-AECA）水平，以期探討IgG-AECA在川崎病診斷中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

80例于2019年1—5月在南京醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院明確診斷為川崎病病兒，所有病例臨床診斷符合日本川崎病委員會修訂的診斷標準（2002年修訂第5版）。所有病兒就診前均未使用過免疫抑制劑或免疫調節(jié)劑，并除外先天性或遺傳性疾病，其中，合并冠狀動脈損傷者29例、未合并冠狀動脈損傷者51例。同時選取該院同期就診的40例因呼吸道感染發(fā)熱病兒（一般發(fā)熱組）和30例擇期手術病兒（正常對照組）作為對照組，各組兒童性別、年齡差異無統(tǒng)計學意義（

P

＞0.05）。以上標本的收集均獲得病兒近親屬知情同意，本研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關要求。

表1 兒童川崎病80例各組性別、年齡情況分析

1.2 標本采集

分別于川崎病急性期（病程范圍為1～10 d）和恢復期（病程范圍為21～60 d）采集病兒靜脈血3 mL，同時抽取對照組兒童等量靜脈血，常規(guī)分離血清，-70℃凍存待用。

1.3 血清IgG

-

AECA檢測

采用間接免疫熒光試劑盒（德國歐蒙醫(yī)學診斷有限公司），以人臍靜脈內皮細胞（Human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）為底物，樣本1∶10稀釋后檢測血清中IgGAECA，熒光顯微鏡下在細胞質中可見綠色顆粒熒光判定為陽性，顆粒型熒光在靠近細胞核的位置上顆粒顯得更豐富。同時分別設置陰、陽性對照用于判斷實驗的有效性。

2 結果

2.1 各組血清IgG

-

AECA陽性率

川崎病病兒急性期IgG-AECA陽性率為41.2%（33/80），明顯高于一般發(fā)熱組［15.0%（6/40）］和（

χ

=8.376，

P

=0.004）正常對照組［0%（0/30）］（

χ

=17.680，

P

＜0.001）。川崎病病兒恢復期IgG-AECA陽性率為20.0%（16/80），較急性期明顯下降（

χ

=8.502，

P

=0.004）。

2.2 川崎病病兒合并CAL與否IgG

-

AENA陽性率的比較

結果顯示，川崎病合并CAL時IgG-AECA陽性率為55.2%（16/29），不合并CAL病兒IgG-AECA陽性率為29.0%（15/51），差異有統(tǒng)計學意義（

χ

=5.169，

P

=0.023）。

2.3 川崎病急性期IgG

-

AECA陽性組與IgG

-

AECA陰性組常見炎性指標的比較

IgG-AECA陽性組急性期川崎病病兒外周血白細胞總數(shù)（WBC）、C反應蛋白（CRP）和血細胞沉降率（ESR）均高于IgG-AECA陰性組病兒（

P

＜0.05），結果見表2。

表2 兒童川崎病80例急性期IgG型抗內皮細胞抗體（IgG-AECA）水平不同者炎性指標的比較/±s

2.4 IgG

-

AECA不同滴度組川崎病急性期病兒外周血WBC、CRP和ESR結果比較

將IgG-AECA陽性病兒根據(jù)其滴度不同分組，分析IgG-AECA滴度與常見炎性指標的關系，可見不同滴度組兒童WBC、CRP和ESR結果差異有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05）。IgG-AECA高滴度組病兒外周血WBC、CRP和ESR檢測結果高于低滴度組（

P

＜0.05），表明隨著外周血中IgG-AECA滴度的增加，病兒炎癥反應越強烈，結果見表3。

3 討論

川崎病是一種急性自限性全身血管炎性疾病，早期表現(xiàn)為全身微血管炎，后期為動脈內膜炎和動脈周圍炎，并發(fā)癥以冠狀動脈損傷最為嚴重，是影響預后的主要因素。AECA是一組針對血管內皮細胞表面不同抗原決定簇的異質性抗體，其可在多種與血管炎性疾病有關的免疫性疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡、川崎病、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、混合性結締組織病、移植免疫、系統(tǒng)性血管炎、干燥綜合征、韋格納肉芽腫等）病人的外周血中表達，可作為一種有用的自身抗體指標用于疾病診斷和預后判斷，特別是對疾病的活動性評估具有重要意義。本研究結果顯示，川崎病急性期病兒外周血中IgG-AECA陽性率明顯高于一般發(fā)熱病兒和正常兒童，且合并CAL時IgG-AECA陽性率高于未合并CAL病兒，表明IgG-AECA參與到川崎病疾病發(fā)生發(fā)展過程，對川崎病早期診斷具有一定的臨床意義。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，IgG-AECA陽性病兒外周血中WBC、CRP和ESR等反映炎癥程度強弱的指標均高于IgG-AECA陰性病兒，IgG-AECA高滴度組病兒外周血WBC、CRP和ESR高于低滴度組，表明IgGAECA在川崎病早期的炎癥性病變其中起著一定的促進作用。綜上，IgG-AECA參與了川崎病的發(fā)病過程，且與疾病的活動性呈正相關，通過檢測病兒外周血中IgG-AECA的表達情況，可以揭示其在臨床疾病診斷、治療和預后評估中的應用價值，特別是預測并發(fā)癥具有重要的意義。

表3 兒童川崎病80例急性期IgG型抗內皮細胞抗體（IgGAECA）不同滴度組外周血白細胞總數(shù)（WBC）、C反應蛋白（CRP）和血細胞沉降率（ESR）結果比較/±s