李燕華 王夢杰 馬本賀 李左宏 王海華

(1 江西省水產(chǎn)科學(xué)研究所，農(nóng)業(yè)部湖泊漁業(yè)資源環(huán)境科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站，江西南昌 330039；2 南昌市特種水產(chǎn)繁育與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西南昌 330039)

攀鱸(Anabastestudineus)又稱龜殼攀鱸、過山鯽，隸屬于鱸形目、攀鱸科、攀鱸屬(Anabas)，因其外形似鱸、能依靠鰭和鰓蓋攀爬而得名，主要分布于我國東南部各省，為熱帶、亞熱帶野生淡水經(jīng)濟(jì)型魚類。攀鱸在全球僅有2個(gè)種，我國僅龜殼攀鱸1種[1]。該魚不僅生長速度快，而且適應(yīng)性極強(qiáng)，其肉質(zhì)嫩滑、味道鮮美、營養(yǎng)豐富，在南方地區(qū)備受歡迎，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，養(yǎng)殖潛力很大。目前有關(guān)攀鱸的研究主要集中在人工繁殖及育苗[2-3]、規(guī)?；B(yǎng)殖技術(shù)[4]、生態(tài)毒理學(xué)[5-8]等方面。隨著養(yǎng)殖技術(shù)的成熟和養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，攀鱸的病害情況日益嚴(yán)峻。攀鱸在苗種培育和成魚養(yǎng)殖階段容易感染各種疾病，在生產(chǎn)中廣泛使用一些消毒、殺菌、滅蟲的藥物，但有關(guān)常用漁藥對攀鱸急性毒性效應(yīng)的報(bào)道較少。本試驗(yàn)通過研究敵百蟲、硫酸銅、二氧化氯等3種生產(chǎn)上常用的藥物對攀鱸幼魚的急性毒性，探討攀鱸幼魚對這3種藥物的耐受性，旨在為養(yǎng)殖生產(chǎn)中漁藥的安全使用提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用攀鱸幼魚來自江西省水產(chǎn)科學(xué)研究所，體質(zhì)量(7.78±1.60)g，全長(7.89±0.44)cm。挑選體表無傷、活力強(qiáng)、規(guī)格一致的幼魚放在規(guī)格4.0 m×1.6 m×0.8 m的水泥池中暫養(yǎng)7 d。暫養(yǎng)期間每天投飼2次，微流水養(yǎng)殖。試驗(yàn)用水為地下水，水質(zhì)指標(biāo)符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB 11607—89)。

試驗(yàn)藥物分別為敵百蟲、硫酸銅和二氧化氯，藥品規(guī)格和生產(chǎn)廠家等情況見表1。

表1 試驗(yàn)用漁藥的規(guī)格和成分

1.2 試驗(yàn)方法

正式試驗(yàn)前，先通過預(yù)試驗(yàn)初步確定3種試驗(yàn)藥物質(zhì)量濃度的上下限范圍，再按照等比例間距分別設(shè)5個(gè)濃度梯度組和1個(gè)空白對照組(見表2～表4)，每個(gè)質(zhì)量濃度組設(shè)2個(gè)平行。試驗(yàn)用塑料箱規(guī)格為37 cm×28 cm×20 cm(長×寬×高)，每箱放入10 L試驗(yàn)藥液(先將試驗(yàn)藥物配制成母液，再根據(jù)試驗(yàn)濃度要求加水稀釋到相應(yīng)濃度)，并放入10尾攀鱸幼魚。

試驗(yàn)開始后，連續(xù)12 h觀察幼魚的中毒癥狀和游動情況，以鑷子夾住魚尾柄部1 min內(nèi)試驗(yàn)魚無反應(yīng)作為死亡標(biāo)準(zhǔn)。觀察并記錄各組24、48、72、96 h的死亡魚數(shù)量，及時(shí)將死魚撈出。為保證試驗(yàn)水體中藥物的質(zhì)量濃度和水質(zhì)，每隔24 h更換1次試驗(yàn)溶液。試驗(yàn)水溫為(30±1)℃，溶解氧不小于5.0 mg/L，試驗(yàn)周期為96 h，試驗(yàn)過程中不投飼。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用寇氏法[5-7]計(jì)算3種藥物對攀鱸幼魚的半致死質(zhì)量濃度(LC50)，并計(jì)算安全質(zhì)量濃度(SC)，公式如下。

logLC50=χm-d(∑p-0.5)

(1)

(2)

式(1)～(2)中，χm為死亡組最大質(zhì)量濃度的對數(shù)；d為相鄰2組質(zhì)量濃度的對數(shù)差；p為各組的死亡率(%)。

2 結(jié)果

2.1 攀鱸幼魚的中毒癥狀

試驗(yàn)開始時(shí)，3種藥物各個(gè)質(zhì)量濃度組攀鱸幼魚的活動情況與對照組相似，大多靜伏于水中，或緩慢游動。隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長，高濃度組試驗(yàn)魚開始出現(xiàn)一系列中毒癥狀。3種藥物試驗(yàn)組魚的中毒癥狀并無明顯差異，具體表現(xiàn)為：試驗(yàn)魚沿箱壁快速游動、欲跳出水面、游動和平衡能力減弱、呼吸頻率加快等，隨后試驗(yàn)魚側(cè)臥于箱底，但并未立即死亡，輕輕觸碰即快速游動，一段時(shí)間后死亡。死亡魚體表黏液增多，嘴微張開。

2.2 3種藥物對攀鱸幼魚的急性毒性

由表2～表4可見，各個(gè)質(zhì)量濃度組試驗(yàn)魚96 h的死亡率均高于72、48及24 h，而同一時(shí)間高質(zhì)量濃度組死亡率明顯高于低質(zhì)量濃度組，說明3種漁藥對攀鱸幼魚的毒性作用隨著暴露時(shí)長的增加和濃度的升高而增強(qiáng)。對照組攀鱸未出現(xiàn)死亡情況。

敵百蟲質(zhì)量濃度為20.0 mg/L時(shí)，24 h內(nèi)無死亡現(xiàn)象。隨著其質(zhì)量濃度的升高，攀鱸幼魚開始出現(xiàn)死亡，24.0、28.9 mg/L質(zhì)量濃度組24 h時(shí)死亡率分別為20%、15%，48 h時(shí)分別為40%、60%，72 h時(shí)分別為60%、80%。幼魚死亡率隨著敵百蟲質(zhì)量濃度的升高、作用時(shí)間的增加呈明顯上升趨勢。當(dāng)敵百蟲質(zhì)量濃度升高到34.6、41.5 mg/L時(shí)，幼魚分別于16、10 h時(shí)開始出現(xiàn)死亡，48 h內(nèi)全部死亡(見表2)。

表2 敵百蟲對攀鱸幼魚的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

硫酸銅在低質(zhì)量濃度(20.0、24.0、28.9 mg/L)時(shí)，24、48 h的死亡率無明顯差距。當(dāng)質(zhì)量濃度升高至34.6 mg/L時(shí)，攀鱸幼魚于14 h時(shí)開始出現(xiàn)死亡，24、48 h死亡率分別為20%、60%，72 h試驗(yàn)魚全部死亡。當(dāng)硫酸銅質(zhì)量濃度為41.5 mg/L時(shí)，幼魚12 h時(shí)開始死亡，24、48 h死亡率分別為40%、80%，72 h全部死亡(見表3)。

表3 硫酸銅對攀鱸幼魚的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

二氧化氯對攀鱸幼魚的毒性效應(yīng)較為溫和，質(zhì)量濃度70.0 mg/L試驗(yàn)組幼魚24、48 h均無死亡，72、96 h死亡率均為20%。當(dāng)質(zhì)量濃度升高至77.0 mg/L時(shí)，幼魚于24 h時(shí)開始出現(xiàn)死亡，且隨著作用時(shí)間的增加死亡率逐漸升高。93.2 mg/L試驗(yàn)組24、48 h死亡率分別為60%、70%，96 h時(shí)試驗(yàn)魚全部死亡。當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)102.5 mg/L時(shí)，幼魚9 h開始出現(xiàn)死亡，24 h死亡率達(dá)90%，48 h全部死亡(見表4)。

表4 二氧化氯對攀鱸幼魚的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

2.3 3種漁藥對攀鱸幼魚的半致死濃度和安全濃度

受試藥物對攀鱸幼魚的24、48、72、96 h半致死質(zhì)量濃度(LC50)以及安全質(zhì)量濃度(SC)見表5。敵百蟲、硫酸銅、二氧化氯對攀鱸幼魚的96 h半致死質(zhì)量濃度分別為20.57、23.37、77.74 mg/L，安全質(zhì)量濃度分別為3.351、7.010、24.691 mg/L。

表5 3種藥物對攀鱸幼魚的半致死質(zhì)量濃度(LC50)和安全濃度(SC)

3 討論

半致死濃度通常用來衡量某種藥物對特定試驗(yàn)對象的毒性大小，其值越低，藥物毒性越強(qiáng)，其值越高，藥物毒性越弱[9]。其中，又以96 h半致死濃度作為急性毒性的分級標(biāo)準(zhǔn)，即分為劇毒(半致死質(zhì)量濃度≤0.1 mg/L)、高毒(0.1 mg/L<半致死質(zhì)量濃度≤1.0 mg/L)、中毒(1.0 mg/L<半致死質(zhì)量濃度≤10.0 mg/L)和低毒(半致死質(zhì)量濃度>10.0 mg/L)[10]。本試驗(yàn)中,敵百蟲、硫酸銅、二氧化氯對攀鱸幼魚的96 h半致死質(zhì)量濃度分別為20.57、23.37、77.74 mg/L，表明這3種藥物對攀鱸幼魚均屬低毒。

敵百蟲是1種有機(jī)磷殺蟲劑，能抑制膽堿酯酶活性，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)主要用于防治魚類體外寄生蟲病，具有高效、低毒、低殘留等特點(diǎn)，常用劑量為0.2～0.5 mg/L[11]。本試驗(yàn)中，敵百蟲對攀鱸幼魚的安全質(zhì)量濃度為3.351 mg/L，高于松江鱸魚(TrachidermusfasciatusHeckel)(0.60 mg/L)[12]、黃鱔(Monopterusalbus)(2.27 mg/L)[13]，也遠(yuǎn)高于其常用劑量，說明可以在生產(chǎn)中安全使用。硫酸銅晶體溶于水后，游離的銅離子通過破壞氧化還原酶系統(tǒng)的活性，抑制蛋白質(zhì)的合成，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用來治療寄生蟲病，也用于防治真菌、細(xì)菌類疾病[14]，常用劑量在0.4～0.7 mg/L。本試驗(yàn)中，硫酸銅對攀鱸幼魚的安全質(zhì)量濃度為7.010 mg/L，高于梭鱸(Sanderlucioperca)(0.59 mg/L)[14]、黃鱔(2.1 mg/L)[13]等魚類，也高于其常用劑量。二氧化氯是1種安全、無毒的廣譜消毒劑，能殺死病毒、細(xì)菌、原生生物以及藻類、真菌和各種孢子，同時(shí)在消毒過程中不會與有機(jī)物發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生有害物質(zhì)[15-16]。本試驗(yàn)中，二氧化氯的安全質(zhì)量濃度為24.691 mg/L，高于草魚(Ctenopharyngodonidellus)(8.26 mg/L)[17]，遠(yuǎn)低于泥鰍(Misgurnusanguillicaudatus)(232 mg/L)[18]。二氧化氯在生產(chǎn)中常用的潑灑質(zhì)量濃度為0.3 mg/L，可見該藥物對攀鱸的損傷較小。

敵百蟲、硫酸銅和二氧化氯均是水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中常用的消毒、殺蟲制劑。本試驗(yàn)中，攀鱸幼魚對這3種漁藥的敏感性存在差異，敏感性從高到低依次為敵百蟲>硫酸銅>二氧化氯，這與藥物本身的性質(zhì)有關(guān)。不同魚類對各種藥物的耐受性有很大差異，總體而言，攀鱸的耐受性要強(qiáng)于絕大多數(shù)魚類。一些藥物對魚類的安全濃度往往是遠(yuǎn)高于常用潑灑劑量[12-14,17-18]。然而，在實(shí)際生產(chǎn)中，漁藥的毒性常常受到水溫、水質(zhì)、用藥時(shí)長及魚的體質(zhì)等諸多因素的影響，因此在養(yǎng)殖過程中，應(yīng)根據(jù)具體情況合理配制藥物的質(zhì)量濃度，并密切觀察魚的活動情況，以確保用藥的安全性和有效性。