齊格其

(赤峰市元寶山區(qū)環(huán)境保護(hù)監(jiān)測站，內(nèi)蒙古 赤峰 024076)

0 引言

目前測定揮發(fā)酚最經(jīng)典的方法是4-氨基安替比林分光光度法，因此作為顯色劑的4-氨基安替比林顯得尤為重要。在實際工作中發(fā)現(xiàn)4-氨基安替比林容易變質(zhì)，氧化產(chǎn)生安替比林紅，導(dǎo)致藥品顏色變深，實驗空白值明顯變高。本文就如何提純4-氨基安替比林，降低實驗空白值進(jìn)行了探索，通過不同方法的比較擇優(yōu)選擇最佳方法，大大降低了實驗空白，提高了方法的靈敏度和準(zhǔn)確度。

1 主要實驗器材和藥品

1.1 實驗器材

全玻璃蒸餾器，500mL聚四氟乙烯芯分液漏斗。

1.2 藥品

4-氨基安替比林(國藥)，活性炭(國藥)(200℃烘干2h)；硅酸鎂吸附劑(600℃烘干4h)；三氯甲烷。

2 4-氨基安替比林提純方法的選擇

2.1 無酚水的制備

每升純水中加入0.2g活性炭，充分搖勻幾次，放置過夜，用雙層濾紙過濾，使用前檢驗無酚水。

2.2 4-氨基安替比林提純方法

《HJ 503-2009水質(zhì) 揮發(fā)酚的測定 4-氨基安替比林分光光度法》中規(guī)定的提純方法是硅酸鎂吸附劑(弗羅里硅土)提純法，除此之外可行性方法有活性炭脫色法，乙醇提純法，苯洗法(劇毒暫時不推薦)，氯仿萃取法等。提純4-氨基安替比林不只會降低實驗空白，還會降低藥品活性、方法靈敏度等。因此提純方法應(yīng)選實驗空白低、靈敏度盡量高、曲線斜率高的的方法。

空白點加最高點基本可以看出斜率是多少。最高點的吸光度范圍可看出方法的穩(wěn)定性,可以減少工作量。提純方法必須滿足盡量以少量的提純劑達(dá)到提純藥品的目的、曲線斜率(曲線最高點吸光度)高和曲線最高點的吸光度穩(wěn)定性等三個條件。以下選擇幾個提純4-氨基安替比林的方法做了幾組對比。

4-氨基安替比林溶液：稱取2.2g 4-氨基安替比林溶于100mL水中，搖勻。通過不同提純方法用3cm比色皿在460nm波長處測定空白值和曲線最高點吸光度值的比較，選擇最佳提純方法。

通過大量實驗的數(shù)據(jù)比較可以看出：

(1)不同提純方法的降低空白吸光度的幅度不同，活性炭+硅酸鎂吸附劑效果最好。

(2)提純藥品量增加空白會明顯降低甚至無色，但是最高點同時下降的也大，斜率也降低，各個點的萃取吸光度差距變小而基本實驗室操作也變得繁雜。

(3)有機(jī)溶劑氯仿提純，可以降低空白，但氯仿有毒，同時最高點吸光度下降并且穩(wěn)定性變差。

(4)選擇合適的方法最關(guān)鍵，如果4-氨基安替比林原始空白低建議使用標(biāo)準(zhǔn)里的10g硅酸鎂吸附劑來提純，因藥品易潮解，氧化變質(zhì)，經(jīng)實驗此方法達(dá)不到檢測方法的基本要求。

(5)使用活性炭脫色再加硅酸鎂吸附劑提純的辦法(或者用三硅酸鎂代替)可以基本滿足提純的三個條件，不同批次4-氨基安替比林藥品空白值不同，通過調(diào)整加活性炭和硅酸鎂吸附劑的量，以達(dá)到最好的效果并避免氯仿類似有機(jī)溶劑提純帶來的吸光度不穩(wěn)定。

通過大量實驗證明，活性炭+硅酸鎂吸附劑提純4-氨基安替比林是比標(biāo)準(zhǔn)方法更理想的提純方法。

表1 各個提純方法的空白和最高點的吸光度比對分析

2.3 提純方法

2.2g 4-氨基安替比林溶解到100mL水中，配制好的4-氨基安替比林放在碘量瓶內(nèi)加2g活性炭攪拌靜置一會，用雙層濾紙過濾，濾液再加6g硅酸鎂吸附劑攪拌靜置一會，用雙層濾紙過濾，最后濾液變?yōu)橥该鞯S色液體。如果渾濁可以用離心機(jī)離心變透明。此方法操作簡單，空白低，穩(wěn)定性較好。建議活性炭最大使用量不能超過2.5g，硅酸鎂吸附劑提純最大量不超過10g。

3 方法驗證步驟

天然水中的揮發(fā)酚含量一般很低，樣品測定值跟空白值在一個數(shù)量級。所以空白值的高低和穩(wěn)定性將嚴(yán)重影響樣品的分析結(jié)果?？瞻字禍y定的結(jié)果，從某種程度上反應(yīng)了本化驗室的儀器試劑和化驗員的基本操作水平。

3.1 方法概述

本方法依據(jù)《HJ 503-2009水質(zhì) 揮發(fā)酚的測定 4-氨基安替比林分光光度法》。酚類化合物在鐵氰化鉀催化劑存在的pH值(10±0.2)溶液中與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色安替比林染料被三氯甲烷萃取，在最大吸收波長460nm處測量。

圖1 化學(xué)式

3.2 校準(zhǔn)曲線

于一組 8個分液漏斗中，分別加入100mL水，依次加入0.00、0.25 、 0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00 mL1.00mg/L的苯酚標(biāo)準(zhǔn)使用液，加水至250mL，加2.0mL緩沖溶液，混勻，再加1.5mL提純好的 4- 氨基安替比林溶液，混勻，再加1.5mL鐵氰化鉀溶液，充分混勻后，密塞，放置10min。在上述顯色分液漏斗中準(zhǔn)確加入10.0mL三氯甲烷，密塞，手工劇烈振搖3min，分層后放氣。用濾紙拭干分液漏斗頸管內(nèi)壁，頸管內(nèi)塞一小團(tuán)濾紙，棄去初濾出的數(shù)滴萃取液后，將余下的三氯甲烷直接放入光程為30mm的比色皿中。

表2 校準(zhǔn)曲線

3.3 精密度和準(zhǔn)確度

對5.00μg/mL和9.00μg/mL高低兩個標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度樣品和環(huán)保部標(biāo)準(zhǔn)品研究所的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行實驗室驗證。

結(jié)果表明：平行樣測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差滿足標(biāo)準(zhǔn)要求，標(biāo)準(zhǔn)樣品測定結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度范圍之內(nèi)。

3.4 實際樣品測定

取附近3個地下水樣品和1個河流斷面地表水樣品進(jìn)行分析。

表3 精密度實驗和標(biāo)準(zhǔn)樣品測試數(shù)據(jù)

表4 地下水和河流斷面樣品測定結(jié)果

4 方法質(zhì)量控制

(1)實驗前檢查無酚水質(zhì)量，合格的無酚水會使實驗空白值保持在低水平。

(2)嚴(yán)格控制反應(yīng)溶液的pH值，使其pH值在9.8～10.2。緩沖溶液的加入量要準(zhǔn)確。

(3)分液漏斗是這個實驗最重要的玻璃儀器，全玻璃活塞分液漏斗萃取時候容易漏液，推薦使用聚四氟乙烯芯分液漏斗，萃取中盡量不放氣以減少分液漏斗漏液導(dǎo)致的萃取失敗，萃取完全后放氣。

(4)地下水和污水的采樣瓶和蒸餾設(shè)備不能混用，防止交叉干擾。

(5)盡量避免使用有機(jī)溶劑提純4-氨基安替比林，不穩(wěn)定。

(6)在萃取時，震蕩分液漏斗盡量采用手工震蕩，因手工震蕩力度大，三氯甲烷和溶液混合較為充分，萃取效率高。震蕩的速度和力度不一樣，達(dá)到萃取完全的時間也不一樣。但多次試驗結(jié)果表明震蕩時間3min以上可以達(dá)到完全萃取。

(7) 建議4-氨基安替比林最好埋藏于干燥器硅膠中保存或者于氮氣袋中保存。

5 結(jié)語

通過大量實驗和工作探索發(fā)現(xiàn)，在萃取法測定揮發(fā)酚的時候，4-氨基安替比林的純度是實驗成敗的關(guān)鍵，用活性炭+硅酸鎂吸附劑提純4-氨基安替比林溶液，有顯著降低實驗空白、提高靈敏度、操作簡便等優(yōu)點，是理想的提純方法，應(yīng)用于實際監(jiān)測工作中是切實可行的。同時應(yīng)注重方法質(zhì)量控制，才能使監(jiān)測結(jié)果更加科學(xué)準(zhǔn)確。