閆玉敏，王希柱，張振飛，常紹菊，陳榮花，賈洪娟，宋巧鳳

高血壓是臨床常見慢性病，長(zhǎng)期高血壓可改變患者心臟及血管功能，因此其是導(dǎo)致靶器官損傷及心腦血管疾病的基礎(chǔ)，其中左心室肥厚是高血壓導(dǎo)致的常見靶器官損傷表現(xiàn)之一，可進(jìn)一步導(dǎo)致患者出現(xiàn)心力衰竭、急性心肌梗死、腦卒中及猝死等［1-3］。因此，及早診斷并有效防治對(duì)高血壓性左心室肥厚患者尤為關(guān)鍵。左心室心肌質(zhì)量指數(shù)（left ventricular mass index，LVMI）是衡量心肌肥厚及心臟重構(gòu)的主要參考指標(biāo)。微小RNA（microRNA，miRNA）作為一類小的非編碼RNA，可調(diào)節(jié)各種細(xì)胞活動(dòng)包括細(xì)胞的增殖、分化、發(fā)育及凋亡，其在基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄后的調(diào)節(jié)中具有重要作用，同樣在心肌重構(gòu)及細(xì)胞增殖、分化等過(guò)程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。研究表明，miRNA-26b、miRNA-195與心肌重構(gòu)密切相關(guān)［4］。另有研究表明，高血壓發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其中血小板在高血壓發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用［5］?；诖?，本研究旨在分析平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）與血小板計(jì)數(shù)（platelet count，PLT）比值（MPV/PLT）、miRNA-26b、miRNA-195與高血壓性左心室肥厚的關(guān)系，并分析其對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2017年4月—2019年12月唐山市人民醫(yī)院收治的高血壓性左心室肥厚患者102例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《中國(guó)高血壓防治指南（2010年修訂版）》［6］中的原發(fā)性高血壓病診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）經(jīng)超聲心動(dòng)圖檢查顯示左心室后壁厚度≥12 mm，符合左心室肥厚的判定標(biāo)準(zhǔn)［7］；（3）左心室射血分?jǐn)?shù)＞40%。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）繼發(fā)性高血壓者；（2）肥厚型、縮窄型心肌病者；（3）合并糖尿病、先天性心臟病、中重度瓣膜病、冠心病、心力衰竭、惡性腫瘤者；（4）伴有甲狀腺功能亢進(jìn)或減退者；（5）合并嚴(yán)重肝腎功能不全者；（6）正在或已服用降壓藥物者。根據(jù)LVMI將所有患者分為低LVMI（≤110 g/m2）組52例與高LVMI（＞110 g/m2）組50例。本研究經(jīng)唐山市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，患者對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 通過(guò)病案系統(tǒng)收集患者入院時(shí)臨床資料，包括性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動(dòng)脈壓、24 h動(dòng)態(tài)收縮壓、24 h動(dòng)態(tài)舒張壓、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、24 h動(dòng)態(tài)平均動(dòng)脈壓、左心室射血分?jǐn)?shù)、心輸出量、每搏輸出量、左心室心肌質(zhì)量（left ventricular mass，LVM）、LVMI、MPV、PLT等，其中空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、MPV、PLT應(yīng)用日本SYSMEX公司XE-2100型血細(xì)胞分析儀、Beeckman Coulter全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動(dòng)脈壓、24 h動(dòng)態(tài)收縮壓、24 h動(dòng)態(tài)舒張壓、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、24 h動(dòng)態(tài)平均動(dòng)脈壓應(yīng)用Meditech ABPM-05無(wú)創(chuàng)性攜帶動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)儀測(cè)量，左心室射血分?jǐn)?shù)、心輸出量、每搏輸出量應(yīng)用美國(guó)PHILIPS EPIQ7C心臟超聲診斷儀檢測(cè)。

1.2.2 miRNA-26b、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量檢測(cè) 患者均于入院后晨起抽取空腹外周靜脈血5 ml，在4 ℃環(huán)境下3 000 r/min離心處理10 min（離心半徑為15 cm），取血漿并置于無(wú)RNA酶的EP管內(nèi)，置于-80 ℃環(huán)境中保存待測(cè)；按照TRIZOL試劑盒〔天根生化科技（北京）有限公司提供〕說(shuō)明書提取血漿總RNA，而后采用0.1% DEPC水溶解，采用Bio-Rad檢測(cè)RNA純度、濃度，另取1 μl RNA經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其完整性；采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)進(jìn)行試驗(yàn)，反應(yīng)條件為 95 ℃ 15 min，94 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，70 ℃ 34 s共進(jìn)行40個(gè)循環(huán)；采用2-ΔΔCt方法計(jì)算miRNA-26b、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量，ΔCt值=Ct值（目的基因）-Ct值（內(nèi)參基因）。

1.2.3 預(yù)后 將患者6個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)心腦血管事件（包括心絞痛、無(wú)癥狀心肌缺血、心功能不全、心律失常、腦血管意外）視為預(yù)后不良，未出現(xiàn)則視為預(yù)后良好。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用多元線性回歸分析探討高血壓性左心室肥厚患者LVMI的影響因素；采用多因素Logistic回歸分析探討高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的影響因素；繪制受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）以分析LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量及其聯(lián)合對(duì)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。雙側(cè)檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 高LVMI組、低LVMI組患者臨床資料、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量比較 高LVMI組患者24 h動(dòng)態(tài)收縮壓、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、LVM、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量高于低LVMI組，MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量低于低LVMI組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者性別、年齡、BMI、空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動(dòng)脈壓、24 h動(dòng)態(tài)舒張壓、24 h動(dòng)態(tài)平均動(dòng)脈壓、左心室射血分?jǐn)?shù)、心輸出量、每搏輸出量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者臨床資料、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量比較Table 1 Comparison of clinical data and relative expression levels of miRNA-26b，miRNA-195 between the two groups

2.2 高血壓性左心室肥厚患者LVMI的影響因素分析將表1中有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的指標(biāo)作為自變量（賦值均為實(shí)測(cè)值），高血壓性左心室肥厚患者LVMI（賦值：實(shí)測(cè)值）作為因變量，進(jìn)行多元線性回歸分析，結(jié)果顯示：24 h動(dòng)態(tài)收縮壓、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、LVM、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的獨(dú)立影響因素（P＜0.05），見表2。

表2 高血壓性左心室肥厚患者LVMI相關(guān)因素的多元線性回歸分析Table 2 Multiple linear regression analysis on related factors of LVMI in patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

2.3 高LVMI組、低LVMI組患者預(yù)后比較 高LVMI組患者中預(yù)后良好33例（66.0%），預(yù)后不良17例（34.0%）；低LVMI組患者中預(yù)后良好44例（84.6%），預(yù)后不良8例（15.4%）。高LVMI組患者預(yù)后良好發(fā)生率低于低LVMI組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.774，P=0.029）。

2.4 不同預(yù)后的高血壓性左心室肥厚患者的臨床資料、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量比較 預(yù)后不良的高血壓性左心室肥厚患者24 h動(dòng)態(tài)收縮壓、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、LVM、LVMI、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量高于預(yù)后良好者，MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量低于預(yù)后良好者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同預(yù)后的高血壓性左心室肥厚患者性別、年齡、BMI、空腹血糖、血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、診室收縮壓、診室舒張壓、診室脈壓、診室平均動(dòng)脈壓、24 h動(dòng)態(tài)舒張壓、24 h動(dòng)態(tài)平均動(dòng)脈壓、左心室射血分?jǐn)?shù)、心輸出量、每搏輸出量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 不同預(yù)后的高血壓性左心室肥厚患者臨床資料、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量比較Table 3 Comparison of clinical data and relative expression levels of miRNA-26b，miRNA-195 of patients with hypertensive left ventricular hypertrophy in different prognosis

2.5 高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的影響因素分析將表3中有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的指標(biāo)作為自變量（賦值均為實(shí)測(cè)值），高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后作為因變量（賦值：良好=0，不良=1），進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，24 h動(dòng)態(tài)收縮壓、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、LVM、LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量及miRNA-195相對(duì)表達(dá)量是高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素（P＜0.05），見表4。

表4 高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后影響因素的多因素Logistic回歸分析Table 4 Multiple Logistic regression analysis of influencing factors of prognosis in patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

2.6 LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量及其聯(lián)合對(duì)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量聯(lián)合預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的曲線下面積（AUC）大于各指標(biāo)單獨(dú)預(yù)測(cè)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z值分別為6.303、4.469、6.675、3.670，P值均＜0.001），見表5、圖1。

表5 LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量及其聯(lián)合對(duì)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 5 Predictive value of LVMI，MPV/PLT，miRNA-26b relative expression level，miRNA-195 relative expression level and their combination on the prognosis of patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

圖1 LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量及其聯(lián)合預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的ROC曲線Figure 1 ROC curve of LVMI，MPV/PLT，miRNA-26b relative expression level，miRNA-195 relative expression level and their combination in predicting the prognosis of patients with hypertensive left ventricular hypertrophy

3 討論

高血壓是多種心血管疾病的危險(xiǎn)因素，長(zhǎng)期血壓控制不佳者心肌細(xì)胞在高壓力負(fù)荷刺激下可出現(xiàn)肥厚性生長(zhǎng)應(yīng)答，主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞肥大、心肌纖維化及胞質(zhì)蛋白合成等，進(jìn)而導(dǎo)致心臟結(jié)構(gòu)及功能改變，引發(fā)左心室肥厚［8］。左心室肥厚作為一種因高血壓引發(fā)的常見亞臨床臟器損傷，可一定程度增加心血管疾病發(fā)生率及病死率［9］。據(jù)調(diào)查，20%～40%的高血壓患者并發(fā)左心室肥厚［10］。因此，及時(shí)掌握患者左心室肥厚程度并調(diào)整臨床治療方案對(duì)改善高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后具有積極意義。

研究指出，高血壓患者M(jìn)PV、PLT、P選擇素等血小板活性指標(biāo)均明顯升高［11-12］，其中MPV、PLT獲取簡(jiǎn)單。LVMI是判斷左心室重構(gòu)、左心室肥厚程度的重要指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，高LVMI組患者M(jìn)PV/PLT低于低LVMI組，提示高LVMI的高血壓性左心室肥厚患者血小板功能較差。本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，LVMI預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的AUC為0.832，可見LVMI對(duì)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。MPV是反映血小板功能的有效指標(biāo)，與炎性反應(yīng)及血栓形成關(guān)系密切，MPV越大則血小板聚集功能越好。有研究表明，機(jī)體在重度炎癥狀態(tài)下，MPV越大、越具活性，則其消耗量越大［13］。PLT可反映機(jī)體血液循環(huán)中血小板數(shù)量，PLT越高則血漿可溶性CD40L分泌、釋放越多，進(jìn)而促進(jìn)炎性反應(yīng)及血栓形成［14］。由此推測(cè)，高血壓性左心室肥厚患者M(jìn)PV/PLT降低可能與炎性反應(yīng)有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，MPV/PLT是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的獨(dú)立影響因素，且其預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的AUC為0.745，靈敏度為80.00%，可見MPV/PLT可作為預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚及患者預(yù)后的潛在指標(biāo)。

miRNA作為一類具有高度保守性的非編碼小RNA分子，對(duì)生物體基因表達(dá)具有精準(zhǔn)的調(diào)控作用。目前，miRNA在循環(huán)系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及消化系統(tǒng)疾病中取得極大的研究進(jìn)展，且已成為心血管領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。研究表明，miRNA在心血管疾病生理、病理過(guò)程中具有重要的調(diào)節(jié)作用，并參與心臟發(fā)育、冠狀動(dòng)脈病變、心律失常及心室重構(gòu)等過(guò)程［15］，還參與了心室肥厚的發(fā)生、發(fā)展［16］。多項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，miRNA-26b與心室肥厚密切相關(guān)，并參與了心室肥厚及重構(gòu)過(guò)程［17-18］。馮崴等［19］研究顯示，miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量診斷老年高血壓患者左心室肥厚的AUC為0.836，且二者呈負(fù)相關(guān)，推測(cè)miRNA-26b可作為潛在生物標(biāo)志物用于老年高血壓患者左心室肥厚的診斷?；诖?，本研究分析miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量與高血壓性左心室肥厚的關(guān)系，結(jié)果顯示：miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的影響因素，推測(cè)原因?yàn)椋焊哐獕盒宰笮氖曳屎窕颊適iRNA-26b相對(duì)表達(dá)量較低，更利于其心肌細(xì)胞增殖并出現(xiàn)代償性肥大，且心肌間質(zhì)膠原也可隨之增加，進(jìn)而導(dǎo)致心肌纖維化，致使肥厚心肌出現(xiàn)功能及生物反應(yīng)異常，最終造成心臟舒張功能進(jìn)行性下降，加重病情，不利于患者預(yù)后。本研究結(jié)果顯示，miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的AUC為0.796，靈敏度高達(dá)98.70%，可見miRNA-26b相對(duì)表達(dá)可作為預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的重要指標(biāo)?？妆氲龋?0］研究表明，miRNA-195在糖尿病心肌病乳鼠心肌細(xì)胞肥大中發(fā)揮著重要作用。另有研究表明，miRNA-195可誘導(dǎo)小鼠心臟病理性增大，且與心肌重構(gòu)關(guān)系密切［21］。王文峰等［22］發(fā)現(xiàn)，自發(fā)性高血壓大鼠心臟miRNA-195相對(duì)表達(dá)量明顯升高，甚至是血壓正常大鼠的4倍，提示miRNA-195相對(duì)表達(dá)量可能與血壓有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，高LVMI組患者miRNA-195相對(duì)表達(dá)量高于低LVMI組，且miRNA-195相對(duì)表達(dá)量是高血壓性左心室肥厚患者LVMI的獨(dú)立影響因素，與曾伏虎等［23］研究結(jié)果一致，提示miRNA-195相對(duì)表達(dá)量與高血壓性左心室肥厚相關(guān)，可作為診斷高血壓性左心室肥厚的生物標(biāo)志物。此外，本研究結(jié)果還顯示，miRNA-195相對(duì)表達(dá)量預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的AUC為0.719，靈敏度為68.00%，特異度為71.43%，提示miRNA-195相對(duì)表達(dá)量可作為預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的潛在標(biāo)志物。此外，本研究結(jié)果還顯示，LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量聯(lián)合預(yù)測(cè)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的AUC大于各指標(biāo)單獨(dú)預(yù)測(cè)，可見各指標(biāo)聯(lián)合對(duì)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值更高。

綜上所述，LVM、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量是高血壓性左心室肥厚的獨(dú)立影響因素，且LVMI、MPV/PLT、miRNA-26b相對(duì)表達(dá)量、miRNA-195相對(duì)表達(dá)量聯(lián)合對(duì)高血壓性左心室肥厚患者預(yù)后具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值。但本研究納入樣本量較少，結(jié)果可能存在一定偏倚，后續(xù)還需納入更多樣本量進(jìn)一步研究證實(shí)結(jié)論。

作者貢獻(xiàn)：閆玉敏進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)，負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校；王希柱進(jìn)行研究的實(shí)施與可行性分析；張振飛進(jìn)行數(shù)據(jù)收集、整理、分析；常紹菊進(jìn)行結(jié)果分析與解釋；閆玉敏、陳榮花撰寫論文；賈洪娟進(jìn)行論文的修訂；宋巧鳳對(duì)文章整體負(fù)責(zé)、監(jiān)督管理。

本文無(wú)利益沖突。