陳祥，蔣最明，顧敏，肖鵬程，胡衛(wèi)，李娟，易婷，唐滿玲

（株洲市中心醫(yī)院，湖南 株洲 412007）

特應(yīng)性皮炎（Atopic dermatitis，AD）是一種慢性復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病，以反復(fù)發(fā)生的劇烈瘙癢及皮膚干燥為基本特征[1-2]。臨床上可分為嬰兒期（出生～2歲）、兒童期（2～12歲）、青少年和成人期（＞12歲）。本病初發(fā)于嬰兒期[3]，多見于兒童和青少年期，在世界范圍內(nèi)，15%～30%的兒童及2%～10%的成人受到AD的影響，是兒童最常見的慢性皮膚疾病[4]。在我國，最新的門診研究數(shù)據(jù)顯示，1～7歲兒童AD的總體發(fā)病率為12.94%[5]。近年來，AD在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率逐年增加，已成為日益嚴(yán)重的公眾健康問題。

目前，AD的發(fā)病機(jī)制尚未明確，但已認(rèn)識到皮膚屏障功能障礙、異常免疫應(yīng)答是發(fā)病機(jī)制中的重要環(huán)節(jié)。比如有研究表明，脂類相關(guān)物質(zhì)在維持皮膚正常屏障功能中發(fā)揮了重要的作用，其代謝的異常將破壞正常的皮膚屏障功能，并可能通過誘導(dǎo)皮膚固有免疫失調(diào)誘發(fā)過敏性疾病的發(fā)生[6-7]。在Yamane等[8]的研究中，通過對AD患者的皮膚組織進(jìn)行活檢，發(fā)現(xiàn)在炎性病變中apo A1的表達(dá)水平顯著升高，并伴隨一些脂類相關(guān)物資的代謝異常，如apo A2、FABP-5、α-enolase等。另外，apo A1在其他過敏性疾病中也存在同樣的高濃度的情況[9]。這些研究表明脂類相關(guān)蛋白比如apo A1可能在維持皮膚的正常免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用，可能參與過敏性疾病的發(fā)生。目前，還沒有關(guān)于血液中apo含量與AD發(fā)生之間相關(guān)性的研究報(bào)道。因此，本研究以2～7歲兒童AD為研究對象，探討血液中脂類相關(guān)蛋白如apo A1、apo B、apo E與AD發(fā)生之間是否存在關(guān)聯(lián)，旨在初步闡明apo A1、apo B、apo E與AD發(fā)生之間的關(guān)系，并且分析這些apo與患者血清IgE水平之間的相關(guān)性。

1 對象與方法

1.1 研究對象 本研究采用病例對照研究的方法，于2016年1月—2017年6月在中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬株洲醫(yī)院皮膚科門診診斷為AD的患者中選擇進(jìn)行過敏原檢測的血液標(biāo)本，參照適合我國臨床和流行病學(xué)調(diào)查的Williams診斷準(zhǔn)則，以有經(jīng)驗(yàn)的皮膚科醫(yī)生的臨床診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，選取300例2～7歲AD患者為病例組。Williams診斷準(zhǔn)則如下：必須有皮膚瘙癢史加上以下標(biāo)準(zhǔn)中的3條或以上：①屈側(cè)皮膚受累史，包括肘窩、腘窩、踝前或頸周（10歲以下兒童包括頰部）；②個(gè)人哮喘或過敏性鼻炎史（或4歲以下兒童的一級親屬特應(yīng)性疾病史）；③全身皮膚干燥史；④可見的屈側(cè)濕疹；⑤2歲前發(fā)病。另選擇同期來源于本院健康體檢中心和門診的健康兒童100例（通過醫(yī)師詢問排除過敏性疾病史，并排除近2個(gè)月服用皮質(zhì)類固醇激素、抗組胺藥患者或者近2周內(nèi)無外用皮質(zhì)類固醇激素的健康體檢者）作為對照組，其中男38例，女62例，年齡（4.0±1.7）歲。所有采集的血清標(biāo)本，置于-20℃凍存。本研究通過中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬株洲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 血清 apo A1、apo B、apo E 檢測 apo A1、apo B、apoE檢測采用免疫比濁法，檢測儀器為羅氏cobas C501全自動(dòng)生化分析儀。apo A1和apo B試劑與質(zhì)控品均購自羅氏診斷產(chǎn)品有限公司，apo E試劑和質(zhì)控品購自寧波普瑞柏生物技術(shù)股份有限公司。檢測儀器的檢測器件性能良好，在校準(zhǔn)周期內(nèi)。

1.3 過敏原與總IgE水平檢測 采用德國AllergyScreen過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒（免疫印跡法），操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。特異性IgE（sIgE）結(jié)果為定量資料；總IgE結(jié)果為分類資料，以＜100 kU/L、100～200 kU/L、＞200 kU/L 表示。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，2組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。分類型數(shù)據(jù)采用Logistic向前逐步法回歸模型進(jìn)行分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清apo A1、apo B、apo E在2組中的含量 利用羅氏cobas C501全自動(dòng)生化分析儀檢測AD組和對照組中血清apo A1、apo B、apo E的含量，結(jié)果顯示，AD組apo A1濃度顯著高于對照組，對照組apo E濃度顯著高于AD組，而apo B在2組中的含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果見表1。

表1 apo A1、apo B、apo E在AD組以及對照組中的含量

2.2 AD患者血清總IgE水平和sIgE陽性率的分布 300例AD患者中有266例（88.7%）sIgE陽性，其中男 108例（36.0%）、女 192例（64.0%）；有 175例（58.3%）總IgE＞200 kU/L，其中男 71例（40.6%）、女104例（59.4%）。sIgE陽性者的男女比例與總IgE＞200 kU/L者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 血清apo A1、apo B、apo E與AD患病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系 Logistic回歸分析顯示，未校正混雜因素時(shí)，apo A1每升高1 g/L，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)增加4.716倍（95%CI：1.636～13.596，P=0.004）；apo E 每升高 1 g/L，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)是原來的 0.967倍（95%CI：0.946～0.989，P=0.003），進(jìn)一步校正年齡、性別后，apo A1每升高1 g/L，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)增加7.415倍（95%CI：2.549～22.763，P=0.002）；apo E 每升高 1 g/L，AD 的患病風(fēng)險(xiǎn)是原來的 0.958倍（95%CI：0.936～0.980，P＜0.001）；apo B校正前和校正年齡、性別后都不與AD患病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)；年齡每增加1歲，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)是原來的 0.968 倍（95%CI：0.921～0.983，P＜0.001）；性別與AD的患病風(fēng)險(xiǎn)沒有顯著相關(guān)性。

2.4 血清 apo A1、apo B、apo E與總IgE及特異性IgE濃度的關(guān)系 無論校正年齡、性別混雜因素與否，apo B、apo E均不與總IgE的濃度有相關(guān)性，而在未校正混雜因素時(shí)，apo A1每升高1 g/L，總IgE＞200 IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)增加 6.069倍（95%CI：1.759～22.156，P=0.004）；校正年齡、性別后，apo A1 每升高1 g/L，總IgE＞200 IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)仍然增加7.018倍（95%CI：1.746～20.762，P=0.005）。無論校正年齡、性別混雜因素與否，3種apo均與特異性IgE濃度增加無顯著相關(guān)性。

3 討論

AD是一種以皮膚干燥、瘙癢和炎性反應(yīng)為主要特征的慢性、復(fù)發(fā)性疾病，發(fā)病與年齡高度有關(guān)，雖可發(fā)生于任何年齡，但多見于嬰幼兒時(shí)期。因此本研究選取2～7歲兒童AD為研究對象，符合該疾病的發(fā)病特征?，F(xiàn)有研究表明，AD的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，與遺傳、環(huán)境、免疫等多方面因素有關(guān)[10]，其機(jī)制至今還沒完全闡明清楚。近年來，隨著研究的不斷深入，已經(jīng)證實(shí)皮膚屏障功能障礙、異常免疫應(yīng)答是AD發(fā)病過程中的重要環(huán)節(jié)，表皮中的一些載脂蛋白參與維持正常的皮膚屏障功能，其代謝的異常將破壞正常的皮膚屏障功能，并可能通過誘導(dǎo)皮膚固有免疫失調(diào)誘發(fā)過敏性疾病的發(fā)生，比如apo A1在AD等過敏性疾病的病變皮膚中表達(dá)上調(diào)[8-9]，另外也有文獻(xiàn)表明，apo C1也參與AD的發(fā)生[11]，因此諸多證據(jù)提示筆者，脂類相關(guān)蛋白在維持人體正常的固有免疫中扮演了重要的角色，脂類蛋白比如apoA1、B和E代謝異?？赡芘c過敏性疾病的發(fā)生有關(guān)。

在本研究中，筆者選取2～7歲兒童為研究對象，初步探討了apo A1、B和E與一種常見的過敏性疾病即AD之間的相關(guān)性，并且對3種apo與患者血清總IgE及特異性IgE濃度的關(guān)系進(jìn)行了分析。研究結(jié)果顯示，AD組比對照組血清中有更高濃度的apo A1，且無論校正年齡、性別與否，apo A1與AD的患病風(fēng)險(xiǎn)呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，這與有學(xué)者報(bào)道apo A1在過敏性疾病病變組織中高表達(dá)的結(jié)論一致，這為apo A1與過敏性疾病的關(guān)系提供了新的證據(jù)，表明apo A1可能是兒童AD發(fā)生的危險(xiǎn)因子[11]。另外，研究還發(fā)現(xiàn)對照組血清中有更高含量的apo E，且無論校正年齡、性別與否，apo E與AD的患病風(fēng)險(xiǎn)呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，這與Kim等[12]的研究結(jié)論一致，這表明apo E可能是兒童AD發(fā)生的保護(hù)因子。而本研究并沒有發(fā)現(xiàn)apo B與AD的發(fā)生有顯著相關(guān)性。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，隨著年齡的增加，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)呈逐年遞減的趨勢，性別與AD并無顯著相關(guān)性，這些結(jié)論與國內(nèi)其他的研究結(jié)果一致[13-14]。另一方面，多項(xiàng)研究表明AD的發(fā)生與總IgE及特異性IgE存在相關(guān)性，二者被認(rèn)為是輔助診斷AD常用的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，并且有些研究認(rèn)為總IgE濃度隨著疾病的嚴(yán)重程度而改變[15]，因此，本研究也探討了 apo A1、B、E與總IgE、sIgE之間的關(guān)系。筆者的研究結(jié)果顯示，無論校正年齡、性別與否，apo A1能增加總IgE＞200 IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)，apo B、apoE無論校正年齡、性別與否均與總IgE＞200IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)增加無顯著相關(guān)性，這表明，apo A1可能通過IgE介導(dǎo)途徑參與AD的發(fā)生，apo E可能通過非IgE介導(dǎo)途徑參與AD的發(fā)生。另外，無論校正年齡、性別混雜因素與否，3種apo均與sIgE濃度增加無顯著相關(guān)性，這可能是由于這可能是由于本研究檢測的過敏原并不覆蓋所有過敏原種類，有些特異性IgE濃度很低的標(biāo)本會(huì)出現(xiàn)總IgE濃度高水平的情況，導(dǎo)致特異性IgE濃度與總IgE濃度并不平行變化。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)，apo A1可能是通過IgE介導(dǎo)途徑參與AD發(fā)生的危險(xiǎn)因子，apo E可能是獨(dú)立于IgE介導(dǎo)途徑AD的保護(hù)因子，apo B與AD的發(fā)生無顯著相關(guān)性。總之，這些研究結(jié)果初步闡明了apo A1、B、E與AD的關(guān)系，豐富了脂質(zhì)相關(guān)蛋白與AD發(fā)生之間的關(guān)系，為AD與宿主脂質(zhì)相關(guān)免疫機(jī)制的深入研究提供了新的證據(jù)。