（山東省廣饒縣動物疫病防治服務(wù)中心 257300）

肝功指數(shù)（Liver function index,LFI）是Trevisi 提出的利用奶牛產(chǎn)后3d 及28d 血液中白蛋白（ALB）、總膽固醇（TC）和總膽紅素（TBIL）含量計(jì)算出的能綜合評價(jià)肝臟功能的指標(biāo)[1]。奶牛分娩后，為滿足泌乳需要，乳腺組織的發(fā)育和更新加快，奶牛對能量和營養(yǎng)物質(zhì)的需求也隨之增加。為滿足自身能量的供應(yīng)，奶牛需要動用體脂，使體內(nèi)游離脂肪酸增多，誘發(fā)奶牛酮病及脂肪肝的發(fā)生[2]，進(jìn)一步損害奶牛肝臟功能。

眾所周知，圍產(chǎn)期奶牛體脂大量動員會給奶牛健康帶來負(fù)面影響。其中，肝臟代謝負(fù)擔(dān)加重，釋放大量的急性期蛋白[3,4]。圍產(chǎn)期奶牛LFI 變化范圍為-12～5，當(dāng)LFI 為正值時(shí)，表明奶牛圍產(chǎn)期營養(yǎng)和管理比較適當(dāng)，機(jī)體處于健康狀況[5]。圍產(chǎn)期能量負(fù)平衡引起的體脂動員對奶牛繁殖性能產(chǎn)生了負(fù)面影響，是影響牧場經(jīng)濟(jì)效益的重要因素[6]。

近年來，奶牛單產(chǎn)不斷提高，繁殖力確呈現(xiàn)下降趨勢，表現(xiàn)為產(chǎn)后乏情、發(fā)情周期紊亂等。但國內(nèi)集約化牛場并未開展肝功的綜合評價(jià)。為此，本試驗(yàn)開展圍產(chǎn)期奶牛肝功指數(shù)與繁殖性能和代謝健康的關(guān)系研究，以便為奶牛業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物及分組

本試驗(yàn)在黑龍江綏化裕達(dá)牧業(yè)奶牛場開展，所選試驗(yàn)動物的年齡、體況、胎次相近。所有試驗(yàn)動物均為散欄式，自由采食，全混合日糧（TMR）的飼養(yǎng)模式。泌乳早期日糧組成：大豆皮2.43%、糖蜜1.2%、玉米青貯41.3%、小蘇打0.81%、玉米23.5%、豆粕6.39%、食鹽0.38%；營養(yǎng)水平：干物質(zhì)73.54%、粗脂肪3.83%、粗蛋白質(zhì)6.96%、粗纖維12.42%、鉀0.81%、磷鈣2.50%、鎂0.40%。

試驗(yàn)動物分組：按照肝功能指數(shù)高低將試驗(yàn)牛分為高（UP-LFI），中（IN-LFI），低（LO-LFI）3 組，每組10 頭。計(jì)算肝功能指數(shù)（LFI）分為兩步[1]。

（1）白蛋白亞指數(shù)(Subindex of albumin，SI.ALB)=50%×C3+50%×(C28-C3)，總膽固醇亞指數(shù)(Subindex of TC，SI.TC)=50%×C3+50% (C28-C3)，總膽紅素亞指數(shù)(Subindex of TBIL，SI.TBIL)=67%×C3+33%× (C3-C28)；

（2）LFI=(SI.ALB-17.71)/1.08+(SI.TC-2.57)/0.43-(SI.TBIL-6.08)/2.17。其中，C3 和C28 分別表示奶牛產(chǎn)后第3d 和第28d 的ALB、TC 和TBIL 在血漿中的濃度，單位分別為g/L、mmol/L 和umol/L。LFI 的取值范圍為。-12＜LFI＜5，當(dāng)LFI＞0 時(shí)，表明奶牛圍產(chǎn)期營養(yǎng)和管理比較適當(dāng)，機(jī)體處于健康狀態(tài)。

1.2 檢測指標(biāo)及方法

1.2.1 血液指標(biāo)

所有試驗(yàn)?zāi)膛＞诋a(chǎn)后3d 和產(chǎn)后28d 清晨空腹時(shí)進(jìn)行尾根靜脈采血10ml，并在4000 r/min 離心5min，吸取上清液，再用12000r/min 高速離心5min，分裝血清，保存于-80℃待測。

肝功指標(biāo)檢測：血清中白蛋白（ALB）、總膽固醇（TC）、總膽紅素（TBIL）由南京建成生物公司檢測；甘油三酯（TG）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）含量由艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心檢測；β-羥基丁酸（BHBA）、葡萄糖（Glu）含量采用試紙條法測定，試紙條分別購自北京田園農(nóng)人生物科技有限公司、三諾生物傳感有限公司。

1.2.2 奶牛基本信息采集

根據(jù)牛場日常應(yīng)用的阿菲金管理軟件及現(xiàn)場跟蹤觀察記錄統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)牛的基本信息（年齡、胎次、體況評分、泌乳量）、繁殖數(shù)據(jù)（首次發(fā)情天數(shù)、產(chǎn)后50d 內(nèi)發(fā)情次數(shù)）及病史等基本信息。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同組之間進(jìn)行獨(dú)立樣本T 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。p＜0.05 表示差異顯著，p＜0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 試驗(yàn)?zāi)膛１尘靶畔⒓胺敝承阅芙y(tǒng)計(jì)

由表1 可知，LO-LFI 組奶牛體況評分顯著高于UP-LFI，IN-LFI 組（p＜0.05）；LO-LFI 組奶牛泌乳量極顯著低于UPLFI，IN-LFI 組（p＜0.01）；IN-LFI，LO-LFI 組奶牛產(chǎn)后首次發(fā)情天數(shù)極顯著晚于UP-LFI 組（p＜0.01）；奶牛產(chǎn)后50d 內(nèi)發(fā)情次數(shù)，UP-LFI 組顯著高于IN-LFI 組（p＜0.05），IN-LFI 組顯著高于LO-LFI 組（p＜0.05），且UP-LFI 組奶牛極顯著高于LOLFI 組（p＜0.01）。

2.2 試驗(yàn)?zāi)膛Ｄ芰考案喂χ笜?biāo)狀況

由表2 可知，血漿Glu 水平，奶牛產(chǎn)后3d UP-LFI，INLFI 組顯著高于LO-LFI 組（p＜0.05），產(chǎn)后28d UP-LFI 組極顯著高于IN-LFI，LO-LFI 組（p＜0.01）；血漿BHBA 水平，奶牛產(chǎn)后3d LO-LFI 組顯著高于UP-LFI，IN-LFI 組（P＜0.05），產(chǎn)后28d 組間無顯著差異（p＞0.05）；血漿AST 水平，奶牛產(chǎn)后3d 組間無顯著差異（p＞0.05），產(chǎn)后28d IN-LFI，LO-LFI 組奶牛顯著高于UP-LFI 組（p＜0.05）；血漿ALB 水平，奶牛產(chǎn)后3d LO-LFI 組顯著低于IN-LFI 組（p＜0.05），血漿TG 水平，奶牛產(chǎn)后3d LO-LFI 組顯著高于IN-LFI 組（p＜0.05），IN-LFI 組顯著高于UP-LFI 組（p＜0.05），且LO-LFI 組與UP-LFI 組差異極顯著（p＜0.01）。

表1 試驗(yàn)?zāi)膛１尘靶畔⒓胺敝承阅?/p>

表2 試驗(yàn)?zāi)膛Ｑ獫{能量和肝功指標(biāo)水平

3 討論

3.1 奶牛肝功能指數(shù)與能量及肝功指標(biāo)的關(guān)系

圍產(chǎn)期奶牛產(chǎn)后3d 和28d 是奶牛產(chǎn)后重要的時(shí)期，奶牛產(chǎn)后隨著泌乳的啟動，自身對能量的需求也隨之增加，此時(shí)奶牛易處于能量負(fù)平衡狀態(tài)[7]。由表2 結(jié)果可知，泌乳早期LFI較高奶牛的血液葡萄糖水平較高，酮體水平較低，提示LFI 較高奶牛在泌乳早期的能量負(fù)平衡嚴(yán)重程度較低。LFI 較低時(shí)能量代謝指標(biāo)表現(xiàn)為能量負(fù)平衡狀態(tài)，即低血糖、高酮體的狀況。

文獻(xiàn)報(bào)道，圍產(chǎn)期能量負(fù)平衡奶牛體脂大量動員后，體內(nèi)血液中游離脂肪酸增多，甘油三酯（TG）含量升高，易引發(fā)酮病。TG 是奶牛體內(nèi)含量最多的脂類[8]，它可與極低密度脂蛋白(Very low density lipoprotein，VLDL) 結(jié)合，被轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟，不會在肝臟中蓄積。圍產(chǎn)期奶牛發(fā)生能量負(fù)平衡時(shí)，大量游離脂肪酸進(jìn)入肝臟代謝，超出肝臟代謝能力后，造成TG 不能及時(shí)的轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟，造成肝細(xì)胞脂肪浸潤，甚至是脂肪肝，進(jìn)一步降低肝臟功能[9,10]。本研究TG 含量在LFI 較低的奶牛中顯著較高，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。同時(shí)，本試驗(yàn)?zāi)膛．a(chǎn)后3d 不同肝功能指數(shù)奶牛血中AST 含量無顯著差異，而產(chǎn)后28d，血中AST含量較高，血中白蛋白含量下降。這與研究報(bào)道低LFI 奶牛肝功降低后影響血中AST 與ALB 含量[11]的結(jié)果一致。

3.2 肝功能指數(shù)與奶牛繁殖性能的關(guān)系

本試驗(yàn)表1 顯示，低、中LFI 的奶牛產(chǎn)后首次發(fā)情天數(shù)顯著晚于高LFI 的奶牛，產(chǎn)后50d 內(nèi)奶牛發(fā)情次數(shù)，高、中、低LFI 的奶牛不同組之間存在顯著差異，這表明低LFI 與奶牛繁殖性能降低之間存在密切關(guān)系。研究表明，圍產(chǎn)期低LFI 奶牛繁殖相關(guān)疾病發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢，最終降低奶牛繁殖效率[11]。并且，不同組LFI 的奶牛圍產(chǎn)期泌乳量中低LFI 的奶牛日平均泌乳量顯著較低，這表明LFI 降低會降低奶牛泌乳性能，最終表現(xiàn)為奶牛生產(chǎn)性能下降。另外，Esposito G 等[12]與Li P等[13]報(bào)道，泌乳早期高體況奶牛容易發(fā)生酮病，本試驗(yàn)中與高LFI 的奶牛相比，低LFI 的奶牛體況顯著較高。因此，文獻(xiàn)報(bào)道和本試驗(yàn)都證實(shí)了低LFI 的奶牛發(fā)生酮病幾率明顯增高。

綜上所述，奶牛產(chǎn)后肝功指數(shù)越低或負(fù)值越大，表明肝功障礙程度越高，會導(dǎo)致奶牛產(chǎn)后能量代謝障礙、泌乳性能和繁殖性能下降。因此，加強(qiáng)奶牛產(chǎn)后肝功監(jiān)測對提高奶牛繁殖力和牧場經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。