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        溶血卵磷脂膽堿?;D(zhuǎn)移酶 1與非小細(xì)胞肺癌患者臨床特征及預(yù)后的關(guān)系

        2021-03-10 13:17:38楊昕劉芳張繼朋
        癌癥進(jìn)展 2021年23期

        楊昕,劉芳,張繼朋

        1陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科,西安 712000

        2空軍軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院胸外科,西安 710038

        非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是一種較為常見的肺癌,其病死率、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率均較高,一直是眾多研究者們關(guān)注的熱點(diǎn)。目前隨著腫瘤分子醫(yī)學(xué)的不斷進(jìn)展,發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展由多種分子及多種因素參與。相關(guān)研究表明,NSCLC患者中溶血卵磷脂膽堿酰基轉(zhuǎn)移 酶1(lysophosphatidylcholine acyltransferase 1,LPCAT1)表達(dá)水平升高,其可將溶血磷脂酰膽堿催化為卵磷脂,對后者的生物合成途徑產(chǎn)生較大影響,可參與腫瘤進(jìn)展。相關(guān)研究證實(shí),LPCATF1在結(jié)腸癌患者中存在高水平表達(dá),能夠直接改變腫瘤細(xì)胞的脂質(zhì)特征,誘導(dǎo)腫瘤的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移。有關(guān)研究顯示,LPCAT1能夠影響NSCLC患者腫瘤細(xì)胞的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移。但目前關(guān)于LPCAT1與NSCLC患者臨床特征及預(yù)后的相關(guān)研究較少,缺乏足量文獻(xiàn)加以證實(shí)。因此,本研究旨在探討LPCAT1與NSCLC患者臨床特征及預(yù)后的關(guān)系,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2017年9月至2018年6月陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院院收治的95例NSCLC患者。納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)病理學(xué)檢查確診為NSCLC;②TNM分期Ⅰ~Ⅲ期;③病歷資料完整且已完成1~3年的隨訪,至隨訪終點(diǎn)無失訪病例;④入院治療前行免疫治療及化療。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他部位腫瘤;②就診時(shí)存在心、肝、腎等臟器功能障礙;③合并除惡性腫瘤外其他肺部疾病如哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺部感染。根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn),本研究共納入95例NSCLC患者,其中男58例,女37例;腫瘤最大直徑1.5~7.1 cm,平均(3.98±0.58)cm;年齡41~74歲,平均(58.59±6.55)歲;分化程度:高分化41例,中分化19例,低分化19例,未分化16例;TNM分期:Ⅰ期13例,Ⅱ期24例,Ⅲ期58例;吸煙史47例;病理類型:鱗狀細(xì)胞癌48例,腺癌47例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

        1.2 研究方法

        在無菌條件下,選取NSCLC患者癌旁組織及腫瘤組織,使用剪刀剪碎上述組織在液氮中研磨后進(jìn)行3000 r/min離心10 min,取上清液待檢。采用賽默飛世爾科技有限公司生產(chǎn)的Trizol總RNA抽取試劑盒對標(biāo)本中的總RNA進(jìn)行提取,采用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)檢測其癌旁組織及腫瘤組織中LPCAT1 mRNA的表達(dá)量。采用上海研卉生物科技有限公司生產(chǎn)的TAKARA反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。PCR總反應(yīng)體系為20 μl,其中含上下游引物各2 μl,焦碳酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate,DEPC)水共3.6 μl,ROX 0.4 μl,互補(bǔ) DNA 2 μl,Mix 10 μl。PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件:溫度95℃,反應(yīng)10 min;溫度95℃,反應(yīng)20 s;溫度60℃,反應(yīng)20 s;溫度72℃,反應(yīng)1 min,共40個(gè)循環(huán)。LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量用2法計(jì)算。參考PrimerBank公布的基因序列,以GAPDH為內(nèi)參,GAPDH上游引物:5'-AATCCCATCACCATCTTCCAG-3',下游引物:5'-GAGCCCCAGCCTTCTCCAT-3';LPCAT1 mRNA 上游引物:5'-ACCTATTCCGAGCCATTGACC-3’,下游引物:5'-CCTAATCCAGCTTCTTGCGAAC-3'。

        1.3 觀察指標(biāo)

        收集所有NSCLC患者的病歷資料,觀察記錄每例患者的年齡、性別、病理類型、腫瘤直徑、TNM分期、分化程度、預(yù)后情況。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        2 結(jié)果

        2.1 LPCAT 1 mRNA相對表達(dá)量的比較

        NSCLC患者癌旁組織LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量為(0.069±0.017),明顯低于腫瘤組織的(0.621±0.124),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=24.254,P<0.01)。

        2.2 不同臨床特征NSCLC患者腫瘤組織中LPCAT 1 mRNA相對表達(dá)量的比較

        TNM分期為Ⅲ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的NSCLC患者腫瘤組織中LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量均明顯高于TNM分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.01);不同年齡、性別、病理類型、腫瘤直徑、分化程度及是否吸煙NSCLC患者的LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(表1)

        表1 不同臨床特征NSCLC患者腫瘤組織中LPCAT 1 mRNA相對表達(dá)量的比較(n=95)

        2.3 腫瘤組織中LPCAT 1 mRNA相對表達(dá)量水平與NSCLC患者預(yù)后的關(guān)系

        將LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量≥0.651設(shè)為高水平組(n=48),LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量<0.651設(shè)為低水平組(n=47)。高水平組患者總生存率為37.50%(18/48),低于低水平組的68.09%(32/47),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        3 討論

        NSCLC是最常見的肺癌類型之一,約占肺癌患者總數(shù)的85%,其發(fā)病率及病死率均處于較高水平。隨著治療方案的不斷更新,NSCLC患者的有多種化療方案,但目前仍以鉑類藥物為代表的方案為主。臨床研究驗(yàn)表明,NSCLC患者經(jīng)放療、手術(shù)治療及化療后仍有部分患者出現(xiàn)侵襲性轉(zhuǎn)移,且采用相同方案治療的患者預(yù)后也具有明顯差異。部分研究顯示,對NSCLC患者間的差異性進(jìn)行比較,對于尋找新型治療靶點(diǎn)具有重要的臨床意義。

        隨著分子醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展及關(guān)于腫瘤研究的不斷深入,相關(guān)研究顯示,LPCAT1在前列腺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、肝癌等多種腫瘤患者中高表達(dá),LPCAT1為一種重要的磷脂重構(gòu)酶,位于5p15.33,該基因長度為67 498 bp,分子量59 151 Da,編碼單位由534個(gè)氨基酸組成。目前研究顯示,LPCAT1參與棕櫚酰溶血磷脂酰膽堿轉(zhuǎn)化為二棕櫚酰磷脂酰膽堿的生物學(xué)過程,其中后者為人體中重要的肺表面活性物質(zhì)磷脂酰膽堿的主要成分,故認(rèn)為LPCAT1在人體呼吸系統(tǒng)疾病病理及生理過程中發(fā)揮重要作用。部分研究證實(shí)了LPCAT1的高表達(dá)與前列腺癌患者的臨床特征相關(guān),在轉(zhuǎn)移性前列腺癌患者中LPCAT1表達(dá)明顯升高。部分研究證實(shí),前列腺癌患者的分期、分級(jí)與LPCAT1免疫組化評分呈正相關(guān),局限期前列腺癌患者LPCAT1的表達(dá)水平明顯低于進(jìn)展期患者。研究證實(shí),肝癌組織中溶血磷脂膽堿酶水平升高,磷脂膽堿酶表達(dá)水平降低,其LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量明顯升高,而對LPCAT1基因進(jìn)行敲除后,可觀察到肝癌細(xì)胞的侵襲、增殖能力明顯下降。上述研究證實(shí)了LPCAT1在腫瘤細(xì)胞生長中的重要作用,其可能通過改變磷脂成分進(jìn)而發(fā)揮促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖及侵襲的功能。本研究結(jié)果顯示,NSCLC患者癌旁組織LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量低于腫瘤組織,NSCLC患者中TNM分期為Ⅲ期的患者相對表達(dá)量高于Ⅰ~Ⅱ期,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者相對表達(dá)量高于無淋巴轉(zhuǎn)移者,提示LPCAT1參與了NSCLC患者病情的進(jìn)展及腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移,表明LPCAT1能促進(jìn)患者腫瘤細(xì)胞中二棕櫚酰卵磷脂及磷脂酰膽堿的合成及富集,對腫瘤細(xì)胞表面電荷產(chǎn)生明顯影響,改變膜電位水平,進(jìn)而改變細(xì)胞膜的流動(dòng)性及黏附性,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲性轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示,LPCAT1 mRNA高水平組NSCLC患者總生存率低于低水平組,提示LPCAT1 mRNA與NSCLC患者預(yù)后具有一定關(guān)系。國外研究顯示,磷脂酰膽堿中含有不飽和脂肪酸,在二?;视王;D(zhuǎn)移酶的作用下,不飽和脂肪酸能夠轉(zhuǎn)化生成三酰甘油,后者作為機(jī)體細(xì)胞中脂質(zhì)代謝最重要的細(xì)胞分子,可為腫瘤細(xì)胞的生長提供大量能量,進(jìn)而達(dá)到促進(jìn)腫瘤生長的作用。此外有研究證實(shí),LPCAT1 mRNA的高水平表達(dá)可增強(qiáng)機(jī)體中血小板活化因子的合成,能夠參與腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸過程,避免自然殺傷細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺滅作用,進(jìn)而惡化患者預(yù)后。

        綜上所述,NSCLC患者腫瘤組織中LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量高于癌旁組織,且NSCLC患者臨床特征及預(yù)后與LPCAT1 mRNA相對表達(dá)量有關(guān)。

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