孔存權(quán)， 連利霞

（河南省人民醫(yī)院 鄭州大學(xué)人民醫(yī)院，河南 鄭州 450003）

新型冠狀病毒肺炎（corona virus disease 2019，COVID-19）是一種由嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）引發(fā)的新發(fā)傳染病，其來源、病理機(jī)制、治療策略等諸多方面尚不完全明確。在COVID-19的發(fā)生、發(fā)展和治療過程中，實(shí)驗(yàn)室檢查對(duì)監(jiān)測(cè)COVID-19患者病情變化及療效評(píng)價(jià)非常重要。為此，本研究對(duì)COVID-19患者多項(xiàng)外周血指標(biāo)進(jìn)行分析，以期為臨床治療COVID-19提供有價(jià)值的信息。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2020年1—3月河南省人民醫(yī)院收治的COVID-19確診患者53例（接診患者17例、他院轉(zhuǎn)診的重型患者36例），其中男28例，女25例，年齡20～90歲。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn)及分型依據(jù)

1.2.1 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：患者鼻咽分泌物樣本SARS-CoV-2核酸檢測(cè)陽(yáng)性。排除標(biāo)準(zhǔn)：入院前已確診為COVID-19，入院時(shí)SARS-CoV-2核酸檢測(cè)結(jié)果已轉(zhuǎn)為陰性；病歷資料缺失。

1.2.2 分型 參照《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》[1]將患者分為普通型（24例）、重型（19例）和危重型（10例）。本研究將重型、危重型合并，分為普通型組和重型組2組。

1.3 方法

收集所有患者的臨床資料，包括性別、年齡、初發(fā)癥狀、基礎(chǔ)疾?。ㄖ饕ǜ哐獕?、糖尿病、冠心病、慢性支氣管炎、肝功能異常、貧血）等?；颊呷朐汉罅⒓床杉潇o脈血5 mL，以完善實(shí)驗(yàn)室檢查。采用Pentra MS CRP五分類血細(xì)胞分析儀（日本HORIBA公司）及配套試劑檢測(cè)血常規(guī)指標(biāo)[白細(xì)胞（white blood cell，WBC）計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比（lymphocyte percentage，LYMPH%）、淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)（the absolute value of lymphocyte，LYMPH#）、中性粒細(xì)胞百分比（neutrophil percentage，NEUT%）、中性粒細(xì)胞絕對(duì)數(shù)（the absolute value of neutrophil，NEUT#）]及C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）。采用NovoCyte D2041R流式細(xì)胞儀[艾森生物（杭州）有限公司]及配套試劑檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群，包括淋巴細(xì)胞總數(shù)、CD3+細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD3+細(xì)胞百分比（CD3+%）、CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD4+細(xì)胞百分比（CD4+%），CD4+/CD8+比值。采用ADVIA Workcell全自動(dòng)生化免疫流水線（德國(guó)西門子公司）及配套試劑檢查乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。

采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s表示，2個(gè)組之間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，組間比較Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。采用非條件多因素Logistic多元回歸分析評(píng)估重癥COVID-19的危險(xiǎn)因素。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 COVID-19患者的一般資料比較

以呼吸系統(tǒng)癥狀（發(fā)熱，咳嗽，胸悶，咽部不適）為首發(fā)癥狀的有49例，以消化系統(tǒng)癥狀（納差，惡心，腹瀉）為首發(fā)癥狀的有4例。普通型組與重型組之間年齡、基礎(chǔ)疾病比例及就診間隔時(shí)長(zhǎng)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

表1 COVID-19患者的一般資料比較

2.2 普通型組與重型組各項(xiàng)指標(biāo)的比較

普通型組與重型組之間W B C計(jì)數(shù)、LYMPH%、NEUT%、NEUT#、LDH、CD4+%、CD4+/CD8+比值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），LYMPH#、淋巴細(xì)胞總數(shù)、CRP、CD3+%、CD3+細(xì)胞計(jì)數(shù)及CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 COVID-19患者一般資料及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.3 重型COVID-19的危險(xiǎn)因素評(píng)估

以疾病嚴(yán)重程度為因變量，以差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)為自變量進(jìn)行非條件多因素Logistic回歸分析，采用逐步向前法進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，基礎(chǔ)疾病、就診間隔時(shí)長(zhǎng)、淋巴細(xì)胞總數(shù)是重型COVID-19的危險(xiǎn)因素[風(fēng)險(xiǎn)比（hazard ratio，HR）分別為116.47、1.24、9.83，95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）分別為4.83～2 805.89、1.04～1.48、1.91～466.20]。見表3。

表3 COVID-19患者病情相關(guān)因素的Logistic多元回歸分析

3 討論

目前，COVID-19診斷主要通過病毒核酸結(jié)合影像學(xué)特點(diǎn)來確診，尚未能找到合適的血清學(xué)指標(biāo)來對(duì)患者病情及預(yù)后進(jìn)行判斷和分級(jí)[2]。尋找可在早期判斷COVID-19嚴(yán)重程度的指標(biāo)不僅可改善患者預(yù)后，甚至還可降低病亡率。WBC計(jì)數(shù)、LYMPH%、LYMPH#、NEUT%、NEUT#、淋巴細(xì)胞總數(shù)、CRP、LDH是目前常用的快速輔助診斷感染性疾病的指標(biāo)，而淋巴細(xì)胞亞群（CD3+%、CD3+細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD4+%、CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)和CD4+/CD8+比值等）是反映機(jī)體免疫功能的指標(biāo)。以上這些指標(biāo)都可能與COVID-19的病情及轉(zhuǎn)歸有關(guān)。

有研究結(jié)果顯示，病情較為嚴(yán)重的COVID-19患者血液中的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)更低，中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)更高[3]，因此WBC計(jì)數(shù)正常、中性粒細(xì)胞升高或WBC計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞均升高者發(fā)展為重癥的可能性較大，而WBC計(jì)數(shù)和與中性粒細(xì)胞均正常的COVID-19患者發(fā)展為重癥的可能性較小，但要注意部分患者NEUT%升高有可能是T淋巴細(xì)胞降低導(dǎo)致的。本研究結(jié)果顯示，COVID-19普通型組與重型組之間年齡、基礎(chǔ)疾病比例及就診間隔時(shí)長(zhǎng)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），且WBC計(jì)數(shù)、LYMPH%、NEUT%、NEUT#、LDH、CD4+%、CD4+/CD8+比值2個(gè)組之間差異也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。胡家光等[4]的研究結(jié)果顯示，免疫衰老能夠減弱或加劇對(duì)SARS-CoV-2的免疫應(yīng)答。T淋巴細(xì)胞在機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)抗病毒感染中起著極為重要的作用。輔助性T細(xì)胞（T helper cell，Th）改變、Th1與Th2不平衡會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞因子水平異常，進(jìn)而可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞因子風(fēng)暴的發(fā)生[5]。本研究結(jié)果還顯示，普通型組LDH水平多數(shù)正常，而重型組明顯升高（P=0.003），因此LDH或許可作為鑒別普通型與重型COVID-19的指標(biāo)。

非條件多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，基礎(chǔ)疾病、就診間隔時(shí)長(zhǎng)、淋巴細(xì)胞總數(shù)是重型COVID-19的危險(xiǎn)因素（HR值分別為116.47、1.24、9.83，95%CI分別為4.83～2 805.89、1.04～1.48、1.91～466.20）。普通型組與重型組之間淋巴細(xì)胞總數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但Logistic回歸分析結(jié)果仍顯示淋巴細(xì)胞總數(shù)是重型COVID-19的危險(xiǎn)因素，這可能與COVID-19患者感染的程度、淋巴細(xì)胞遷移平衡被打破，以及不同患者應(yīng)激狀態(tài)的差異等有關(guān)，具體原因還有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，W B C計(jì)數(shù)、N E U T#、NEUT%、LYMPH%、LDH、CD4+%、CD4+/CD8+比值在COVID-19的輔助診斷中有一定的價(jià)值，或可用于COVID-19的輔助診斷及不同型別的區(qū)分。